昂丹司瓊對異氟烷催眠和鎮痛作用的影響

韓平平，蔡慧明，周美艷，劉亞君，張明陽，戴體俊

(徐州醫學院1.藥學院，2.麻醉學院，3.麻醉藥理教研室，江蘇 徐州 221002)

全身麻醉的作用包括鎮痛、催眠、意識喪失、認知障礙、肌松和抑制異常應激反應等諸多方面，其中催眠鎮痛最為重要，但到目前為止其作用機制仍不甚清楚。以往研究表明，GABA-A受體［1］、甘氨酸受體［2］、N-甲基-D-天冬氨酸受體［3］和煙堿受體［4］與全麻藥催眠和鎮痛有關。這些靶位主要是配體門控離子通道。5-羥色胺(血清素)3受體(serotonin 3 receptor，5-HT3)受體也是一種配體門控離子通道［5］。已有研究表明吸入麻醉藥對5-HT3受體有調控作用［6－7］。現有研究表明5-HT3受體可能對乳化七氟烷的催眠、鎮痛有調制作用［8］。曾有研究表明5-HT3受體在睡眠中起到重要的調節作用［9］，大鼠ip給予5-HT3受體阻滯劑昂丹司瓊能夠減少覺醒、增加慢波睡眠和快眼動相睡眠［10］。動物實驗已證明全身應用昂丹司瓊對慢性神經病理性疼痛有很好的療效［11］，同時減輕丙泊酚注射引起的疼痛［12］，對炎癥刺激有效［13］等。異氟烷為臨床常用的吸入全麻藥，因其毒性低，代謝率低，理化性質接近理想，有一定的鎮痛作用［14］，注射給藥也能達到麻醉作用［15］。昂丹司瓊常用于異氟烷麻醉手術后的止吐，但是昂丹司瓊能否影響異氟烷的催眠、鎮痛作用則未見報道。因此，本實驗觀察兩藥合用時，對異氟烷的催眠和鎮痛作用的影響，并探討異氟烷的催眠、鎮痛作用與5-HT3受體的關系。

1 材料與方法

1.1 藥品及動物

異氟烷購自山東魯南貝特制藥有限公司，批號060902;昂丹司瓊購自湖北賽博化工有限公司，批號100706。

昆明種小鼠雌雄兼用，體質量18～22 g，清潔級，由徐州醫學院實驗動物中心提供。實驗前2 d使小鼠熟悉實驗室環境，自由攝食飲水，為避免小鼠各時間段可能出現行為差異對研究結果的影響，實驗于每日同一時間段進行。

1.2 檢測昂丹司瓊對異氟烷催眠的作用

1.2.1 催醒實驗

昆明種小鼠40只，♀♂兼用，分為正常對照(ip給生理鹽水)和昂丹司瓊 1，2和4 mg·kg－14組，15 min 后 ip 異氟烷1.0 ml·kg－1，記錄從翻正反射消失到翻正反射恢復翻正反射持續時間。

1.2.2 測定催眠ED50

采用序貫法［16］給藥進行實驗。30只昆明小鼠分為2組，每組15只。小鼠分別ip給予生理鹽水或昂丹司瓊2 mg·kg－1，15 min 后 ip 異氟烷 1.12，0.90，0.72，0.58 和0.46 ml·kg－1(按1∶0.8等比劑量)。以小鼠翻正反射消失10 s為睡眠指標。若小鼠翻正反射消失，下一只小鼠異氟烷減低一個劑量級;若翻正反射未消失，下一只小鼠異氟烷增加一個劑量級。采用 Dixon-Mood 法［15］計算 ED50。

1.3 檢測昂丹司瓊對異氟烷鎮痛的作用

1.3.1 扭體法［17］

昆明種小鼠80只，♀♂各半，隨機分為正常對照組，昂丹司瓊 1，2 和 4 mg·kg－1，異 氟烷1.0 ml·kg－1，昂丹司瓊 1，2 和 4 mg·kg－1+ 異氟烷組。小鼠先ip給予生理鹽水或昂丹司瓊，10 min后，合用組 sc 給予異氟烷 1.0 ml·kg－1，5 min 后均再 ip 0.6%冰醋酸溶液0.01 ml·g－1，記錄 15 min 內小鼠扭體次數。

1.3.2 熱板法［17］

雌性昆明小鼠置于恒溫熱板 (55±0.5)℃，記錄從其足部接觸熱板到開始添后足的時間(s)作為熱板法痛閾值(pain threshold in hot plate test，HPPT)。給藥前每只小鼠測2次HPPT，間隔5 min，選基礎痛閾在5～30 s小鼠。給藥后，限定停留時間不超過60 s，超過者，其HPPT記為60 s。實驗分組同扭體法。8組小鼠先ip給予生理鹽水或昂丹司瓊，昂丹司瓊+異氟烷組10 min后ip給予異氟烷0.4 ml·kg－1。觀察各組小鼠末次給藥后 5，10，15，20和25 min的HPPT變化。

1.4 統計學分析

2 結果

2.1 昂丹司瓊對異氟烷催眠作用的影響

2.1.1 催醒實驗

表1結果顯示，昂丹司瓊對異氟烷的催眠作用無影響，翻正反射持續時間無顯著差異。

Tab.1 Effect of ondansetron on righting reflex disappearance time in isoflurane given mice

2.1.2 昂丹司瓊對異氟烷催眠ED50的影響

昂丹司瓊+異氟烷組和單獨異氟烷組催眠ED50分別為 0.84(0.69 ～ 1.02)ml·kg－1和 0.64(0.48 ～0.86)ml·kg－1，兩者無統計學差異。

2.2 昂丹司瓊對異氟烷鎮痛作用的影響

2.2.1 扭體法

表2結果顯示，與正常對照組比較，昂丹司瓊4 mg·kg－1和異氟烷 1.0 ml·kg－1顯著降低正常清醒小鼠的扭體次數(P＜0.01)。給予昂丹司瓊后再給予異氟烷1.0 ml·kg－1，小鼠扭體次數進一步減少，但與異氟烷 1.0 ml·kg－1麻醉組無顯著差異。

Tab.2 Effect of ondansetron on writhing times in conscious and isoflurance given mice

2.2.2 熱板法

表3結果顯示，昂丹司瓊對正常清醒小鼠HPPT無明顯影響。小鼠ip給予異氟烷后，引起HPPT增加(P＜0.01);與異氟烷麻醉組比，昂丹司瓊+異氟烷兩藥合用組HPPT差異無統計學意義。

Tab.3 Effect of ondansetron on hot-plate pain threshold(HPPT)in conscious and isoflurane given mice

3 討論

本實驗表明，昂丹司瓊對異氟烷催眠小鼠翻正反射消失的持續時間、異氟烷催眠ED50、扭體次數和熱板法HTTP均無明顯影響。催醒和催眠ED50實驗結果表明，昂丹司瓊對異氟烷的催眠作用無明顯影響，提示5-HT3受體可能不是異氟烷的催眠作用靶點。

為了避免動物出現明顯的中樞抑制而影響實驗結果，本實驗選擇了異氟烷的亞麻醉劑量建立鎮痛模型。此模型異氟烷的鎮痛作用明顯，對小鼠正常活動影響輕微，小鼠的翻正反射并不消失。扭體實驗中，為了避免腹腔同時注射異氟烷和醋酸溶液可能發生理化相互作用，因此采用sc給予異氟烷。

在熱板實驗中，昂丹司瓊對異氟烷小鼠HPPT無明顯影響，提示5-HT3受體可能不是異氟烷抗熱刺激傷害作用的靶位。馬濤等［18］曾采用鞘內注射另一種5-HT3受體阻斷劑托烷司瓊，發現其不能拮抗異氟烷的抗熱刺激傷害作用。本實驗結果與其一致。醋酸注入小鼠腹腔內，會刺激臟層和壁層腹膜，引起較大面積較長的炎性疼痛。昂丹司瓊能夠減少小鼠的扭體次數，這可能是由于昂丹司瓊拮抗了受化學刺激的組織釋放的致痛物質5-HT對5-HT3受體的激活作用。

綜上所述，昂丹司瓊用于異氟烷麻醉后止吐時，對異氟烷的催眠、鎮痛作用無顯著影響;由于昂丹司瓊是5-HT3受體阻滯劑，提示5-HT3受體可能不是異氟烷催眠和鎮痛作用的靶位。

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