溫灸法與溫性藥物治療大鼠寒痹療效觀察

方若儀,邵曉梅

(1.浙江中醫藥大學第一臨床醫學院,杭州 310053;2.浙江中醫藥大學針灸神經生物學研究室,杭州 310053)

現今,風濕痹證是臨床常見病癥,由于患者感受寒邪、陽氣不足,寒濕瘀阻的痛痹尤為顯著,包括類風濕關節炎、風濕性關節炎、強直性脊柱炎等疾病。一般表現以肢體關節疼痛為主、病程長、關節功能障礙等為特點,因而又稱痛痹或寒痹。由于西藥治療以非甾體類抗炎藥治療為主,但多伴有嚴重的副反應。中醫藥已廣泛用于治療痛痹,治療原則有“活血化瘀”法、“行氣止痛”法、“清熱化痰”法、“溫經通絡”法等,但基于“寒則溫之”的溫通法治療痛痹仍缺少足夠的研究,因此在痛痹的治療中難以充分發揮“寒則溫之”的治療特色與優勢。本研究通過建立痛痹大鼠關節炎模型,觀察在不同中醫治法和療法下,對實驗性關節炎的炎癥和疼痛程度等的影響,探討“寒則溫之”在實驗性痛痹治療中的應用效果與優勢,現報告如下。

1 材料與方法

1.1 動物分組與處理

46只 Wistar大鼠雄性,[(130±10)g]隨機分為空白組、模型組、消炎痛組、中藥組、艾灸組,空白組10只,其余各組均9只。消炎痛組在造模3 d后給予消炎痛灌胃,劑量3 mg/2 mL/只;中藥組在造模3 d后給予中藥(附子桂枝湯方)灌胃,劑量 2 mg/ 2 mL/只;艾灸組造模3 d后開始艾條溫和灸治療,艾條直徑0.5 cm,取大椎、命門穴,艾灸距離2 cm,艾灸時間20 min/穴。每日治療1次,共治療7 d?？瞻讓φ战M和模型組大鼠不作任何處理。

1.2 造模方法

將實驗大鼠飼養于室溫22℃、濕度65%的環境1星期,并于每日下午置冰浴[(2±1)℃]1 h,空白組大鼠不作冰浴處理;1星期后,將弗氏完全佐劑(Complete Freund's Adjuvant,CFA,美國Sigma公司)注射至大鼠右側后足爪足跖皮下(0.1 mL/只),繼續置于同樣實驗環境中3 d,建立實驗性關節炎痛痹模型。

1.3 檢測指標

1.3.1 足跖腫脹

本研究在造模前、造模后、治療3 d后、治療7 d后分別檢測各組大鼠的足跖腫脹度。以容積測定法測定CFA大鼠足跖腫脹度。以大鼠足跖掌側毛際處作為浸入水中的標記線,固定大鼠,將足爪浸入足跖容積測量儀內,測量并記錄大鼠足跖部浸入水中的體積(mL)。造模后不同時期測定的足跖體積與造模前測定的足跖體積之間的差值即為足跖腫脹度。

1.3.2 機械痛閾

采用動態足底測量儀檢測各組實驗大鼠造模前、造模后、治療3 d后、治療7 d后4個時間點的患側縮腿閾(PWTs)作為大鼠機械痛閾的指標。測量前,實驗大鼠適應環境2 d;測量時,待大鼠安靜后,將類似Von Frey絲的金屬絲(直徑0.5 mm)置于大鼠患側足底中央,以2.5 g/s的速率遞增,直至引發大鼠逃逸反應(縮腿),這時儀器顯示的數字為大鼠的 PWTs,最大刺激力量50 g;連續測量4次,每次間隔3 min,取平均值。

1.3.3 熱疼痛縮足閾潛伏期

采用足底測試儀檢測造模前、造模后、治療 3 d后、治療7 d后4個時間點各組實驗大鼠足底對紅外熱刺激的反應。測量前,大鼠適應性訓練2 d。測量時,待大鼠安靜后,聚焦紅外光源于動物足底(32I.R.intensity),按下開關,等待動物縮回受測爪,儀器自動記錄紅外光強度和持續時間(以 s計),即為熱疼痛縮足閾潛伏期。連續測量3次,每次間隔3 min,取平均值。

1.4 統計學方法

應用SPSS13.0軟件進行統計學處理,數據以均數±標準差表示。方差齊性者,采用單因素方差分析,方差不齊者,比較采用非參數檢驗和Dunnett-t檢驗。均以P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 研究結果

2.1 不同療法對寒痹模型大鼠足跖腫脹度的影響

采用足跖容積測量法檢測各組大鼠造模前、造模后、治療3 d后、治療7 d后的足跖腫脹度。由表1可見,與空白組比較,造模后、治療3 d后和治療7 d后各組足跖腫脹度明顯增高,組間比較差異均具有統計學意義(P＜0.05)。治療7 d后,中藥組大鼠足跖仍明顯腫脹,消炎痛組和艾灸組與中藥組比較明顯下降,組間比較差異均具有統計學意義(P＜0.05)。

表1 不同療法對寒痹模型大鼠足跖腫脹度的影響 (s,mL)

表1 不同療法對寒痹模型大鼠足跖腫脹度的影響 (s,mL)

注:與空白組比較1)P＜0.05;與中藥組比較2)P＜0.05;與模型組比較3)P＜0.05

組別 n 造模前 造模后 治療3 d后 治療7 d后空白組 10 0.79±0.05 0.92±0.04 1.09±0.04 1.08±0.04模型組 9 0.81±0.04 1.41±0.081) 1.65±0.131) 1.49±0.081)消炎痛組 9 0.82±0.05 1.48±0.201) 1.61±0.231) 1.46±0.171)2)中藥組 9 0.84±0.06 1.53±0.091) 1.73±0.101) 1.69±0.091)3)艾灸組 9 0.84±0.04 1.53±0.161) 1.63±0.151) 1.52±0.101)2)

2.2 不同療法對寒痹模型大鼠機械痛的影響

本研究采用機械痛閾測量法檢測了各組大鼠造模前、造模后、治療3 d后、治療7 d后的機械痛。由表 2可見,在造模前,各組機械痛組間比較,差異均無統計學意義(P＞0.05)。造模后,各組機械痛明顯高于空白組,組間比較差異均具有統計學意義(P＜0.05)。治療3 d后,與模型組比較,中藥組和艾灸組明顯增高,組間比較差異均具有統計學意義(P＜0.05),中藥組明顯高于消炎痛組和艾灸組,組間比較差異均具有統計學意義(P＜0.05)。治療7 d后,與模型組比較,消炎痛組、中藥組和艾灸組明顯增高,組間比較差異均具有統計學意義(P＜0.05),其中中藥組明顯高于消炎痛組,組間比較差異有統計學意義(P＜0.05)。

表2 不同療法對寒痹模型大鼠機械痛的影響 (s,g)

表2 不同療法對寒痹模型大鼠機械痛的影響 (s,g)

注:與空白組比較1)P＜0.05;與同組造模前比較2)P＜0.05;與中藥組比較3)P＜0.05;與模型組比較4)P＜0.05

組別 n 造模前 造模后 治療3 d后 治療7 d后空白組 10 9.75±1.49 10.39±1.40 9.89±2.34 10.23±3.02模型組 9 9.70±1.38 4.46±0.971) 4.45±1.361)2) 5.15±1.671)2)消炎痛組 9 9.63±2.94 4.40±1.111) 5.76±0.671)2)3) 7.61±1.201)3)4)中藥組 9 9.89±1.00 4.75±0.821) 8.85±1.731) 10.36±0.924)艾灸組 9 9.10±2.30 3.49±1.061)3) 6.67±1.091)2)3)4) 8.58±1.534)

2.3 不同療法對寒痹模型大鼠熱痛的影響

由表3可見,造模后,各組熱疼痛縮足閾潛伏期明顯低于空白組,組間比較差異均具有統計學意義(P＜0.05)。治療3 d后顯示,與模型組比較,消炎痛組的縮足閾潛伏期明顯增高,組間比較差異具有統計學意義(P＜0.05),中藥組和溫灸組有增高趨勢。治療 7 d后,消炎痛組大鼠的縮足閾潛伏期仍明顯高于模型組(P＜0.05),中藥組和艾灸組大鼠有與治療3 d后比較有進一步增高趨勢。

表3 不同療法對寒痹模型大鼠熱痛的影響 (s)

表3 不同療法對寒痹模型大鼠熱痛的影響 (s)

注:與空白組比較1)P＜0.05;與同組造模前比較2)P＜0.05;與中藥組比較3)P＜0.05;與模型組比較4)P＜0.05

組別 n 造模前 造模后 治療3 d后 治療7 d后空白組 10 14.67±5.02 14.62±4.15 14.62±3.53 17.04±2.87模型組 9 15.15±2.77 5.61±1.871) 7.29±1.101)2) 9.84±1.741)2)消炎痛組 9 13.94±5.24 4.00±2.071) 12.25±3.341)3)4) 14.09±2.751)3)4)中藥組 9 14.49±2.90 3.20±0.881) 9.16±2.541)2) 11.38±2.291)艾灸組 9 13.16±4.16 4.29±1.531) 9.09±1.551)2) 11.26±2.071)

3 討論

痹證是指人體肌表和經絡感受風、寒、濕、熱等諸邪,引起以肢體關節及肌肉酸痛、麻木、重著、屈伸不利,甚至關節腫大、灼熱等為主要表現的一類病證?！督饏T翼·痹證統論》:“痛痹者,寒氣偏勝,陽氣少,陰氣多也。夫宜通而塞則為痛,痹之有痛,以寒氣入經而稽遲,注而不行也?！焙缘闹饕C為人體營衛氣血失調,寒濕外邪侵入人體,注于經絡,留于關節,痹阻氣血而發病[1]。寒為陰邪,其性凝滯,主收引,血氣受寒,凝而留聚;濕性屬陰,其性重濁粘滯,阻礙氣機,故以“寒則溫之”為基本治則。附子桂枝湯以附子為君藥,補命門真火,祛風寒濕邪,輔以桂枝、白芍、細辛等溫通而不傷陰,達到溫經散寒、除濕通絡的治療作用[2]。大椎和命門艾灸,補督脈元陰元陽,以溫陽、祛寒、止痛。

以往對針灸治療炎癥性疼痛的研究多從對炎癥介質的控制著手,認為針灸通過炎癥局部前炎癥細胞因子的干預達到抗炎鎮痛作用[3,4]。研究證實,艾灸能明顯抑制實驗性關節炎癥疼痛模型炎癥局部組織的炎癥過程和炎性細胞的分泌功能,改善其炎性病理形態,減輕關節滑膜的炎性細胞浸潤、滑膜細胞增生,減輕炎癥腫脹[5]。但是本研究中發現,消炎痛、中藥和艾灸3種方法對寒痹大鼠的足跖腫脹度均無明顯干預,其中中藥組大鼠的腫脹更為嚴重,我們認為這可能與本研究的寒痹模型有關,我們將在后續工作中進一步驗證,以明確三種療法在治療炎性疼痛時的適應證。

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