紫萁不同器官、不同生長期黃酮含量比較研究

夏 艷，趙海泉，張 莉

（1.安徽農業大學 生命科學學院，安徽 合肥230061；2.皖西學院 生物與制藥工程學院，安徽 六安237012）

紫萁（Osmunda japonica Thunb）屬紫萁科紫萁屬多年生草本蕨類植物［1］，別名老虎牙、紫萁貫眾等［2］。其嫰葉干制后稱為“薇菜”，并具有很高的營養價值，是人們喜愛的一種山野菜［3］。黃酮類物質具有抗氧化、抗菌、抗過敏降血糖、降血脂等功能，具有廣闊開發前景［4］。本研究對不同生活時期紫萁的不同部位進行黃酮含量比較研究，為紫萁黃酮的開發利用提供依據。

1 材料和方法

1.1 材料

紫萁植株分別于2008年4月22日和5月7日采于安徽省金寨縣的響洪甸水庫南邊的山地。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器

TU-1901紫外可見光分光光度計（北京普析通用儀器設備有限公司）；101AS-2型不銹鋼數顯電熱鼓風干燥箱（上海浦東躍欣科學儀器廠）；HH-4數顯恒溫水浴鍋（國華電器有限公司）等。

1.2.2 試劑

蘆丁為標準品、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、乙醇、無水乙醚等均為國產分析純。

1.3 紫萁黃酮類化合物的提取［6］

將干燥后的各生長期的樣品分別稱取約3g，用乙醚脫脂后用70%乙醇，在90℃水浴中回流浸提，浸提固液比第一次采用1∶15（g∶ml），以后每次固液比為1∶7（g∶ml），浸提時間每次均為2h。共浸提11次，收集11次浸提液與250ml容量瓶中，并用70%乙醇定容至250ml。

1.4 提取液中黃酮類化合物含量的測定［7］

采用陳乃富等人［7］的亞硝酸鈉-硝酸鋁比色法。

由標準系列的測定得回歸方程：Y＝12.064 X-0.018，相關系數r＝0.9996

首先，在進行深度校企合作時，應組織學生到相關企業進行實習，并邀請工程造價一線從業人員對企業內部業務進行講解。通過實訓的方式給學生營造真實的操作環境，使其對實際的業務內容有直觀的了解。其次，在企業設置并完善實習生制度。應根據實習生的實際情況進行分組，要合理利用已建或在建的相關工程資料來檢驗學生的工程造價技能，并利用激勵和淘汰機制要求學生在規定時間內獨立完成相應的工程計量和計價任務，采取優勝劣汰的方式，最終優秀畢業實習生獲得與企業簽訂勞動合同的機會。在此過程中，學生通過實際工程獲得了鍛煉與實習的機會。

提取液中黃酮類化合物的測定：取一定量的粗黃酮提取液在6 000r／min下離心10min，取上層清液測定其黃酮含量。

2 結果與分析

2.1 同生長期不同部位的黃酮含量差異

Ⅰ期和Ⅱ期部分器官沒有完全形成，因此不同部位的黃酮含量差異未進行分析。

2.1.1 生長Ⅲ期紫萁各部位的黃酮含量

生長期Ⅲ紫萁各部位黃酮含量見表1。從表1可以看出，紫萁根狀莖的黃酮含量很高，葉片、植株地上部分（整體）和葉柄的黃酮含量近似且較低。以植株地上部分（整體）為標準進行比較分析，與根狀莖的黃酮含量差異極顯著，而與其他部分比較差異不顯著。

表1 紫萁生長Ⅲ期黃酮含量結果分析（S）

表1 紫萁生長Ⅲ期黃酮含量結果分析（S）

注：＊＊差異極顯著（P＜0.01）

紫萁部位 凈重（g）吸光度（A）黃酮含量（%）植株地上部分（整體）3.0023±0.0003 0.1941±0.0033 1.498±0.0432葉柄部分 3.0016±0.0002 0.1738±0.0023 1.320±0.0347葉片部分 3.0014±0.0002 0.1709±0.0030 1.568±0.0244根狀莖 3.0042±0.0004 0.5574±0.0038 3.531±0.0337＊＊

2.1.2 生長Ⅳ期紫萁各個部位的黃酮含量

生長期Ⅳ各部位的黃酮含量見表2。從表2可以看出，紫萁葉片和植株地上部分（整體）的黃酮含量近似且較高；葉柄部分的黃酮含量低。以植株地上部分（整體）為標準進行比較分析，與葉柄的黃酮含量差異顯著；與葉片部分比較差異不顯著。

表2 紫萁生長Ⅳ期黃酮含量結果分析（S）

表2 紫萁生長Ⅳ期黃酮含量結果分析（S）

注：＊差異顯著（P＜0.05）

紫萁部位 凈重 （g）吸光度（A）黃酮含量（%）植株地上部分（整體）3.0048±0.0002 0.1721±0.0031 1.2437±0.0623 3.0059±0.0004 0.1438±0.0025 1.1243±0.0241葉柄部分 3.0047±0.0001 0.1156±0.0020 0.8749±0.0433＊葉片部分

2.1.3 生長Ⅴ期紫萁各個部位的黃酮含量

生長Ⅴ期各部位的黃酮見表3。從表3可以看出，紫萁根狀莖的黃酮含量最高，其次是葉片部分和植株的地上部分，葉柄部分的黃酮含量最低。以植株地上部分（整體）為標準進行比較分析，與葉柄、葉片和根狀莖的黃酮含量差異都極顯著。

表3 紫萁生長Ⅴ期黃酮含量結果分析（S）

表3 紫萁生長Ⅴ期黃酮含量結果分析（S）

注：＊＊差異極顯著（P﹤0.01）

紫萁部位 凈重（g）吸光度（A）黃酮含量（%）植株地上部分3.0031±0.0004 0.3456±0.0031 2.7233±0.0422葉柄部分 3.0044±0.0002 0.1982±0.0023 1.3652±0.0541＊＊葉片部分 3.0087±0.0004 0.5246±0.0035 4.0438±0.0473＊＊根狀莖 3.0064±0.0003 0.8969±0.0014 8.1223±0.0235＊＊

2.1.4 生長Ⅵ期的紫萁各個部位的黃酮含量

生長期Ⅵ各部位的黃酮見表4。從表4可以看出，紫萁孢子部分的黃酮含量最高；葉柄部分的黃酮含量最低。以植株地上部分（整體）為標準進行比較分析，與葉柄和孢子的黃酮含量差異都極顯著。

表4 紫萁生長Ⅵ期黃酮含量結果分析（S）

表4 紫萁生長Ⅵ期黃酮含量結果分析（S）

注：＊＊差異極顯著（P＜0.01）

紫萁部位 凈重 （g）吸光度（A）黃酮含量（%）植株地上部分3.0031±0.0002 0.3548±0.0010 2.5749±0.0137葉柄部分 3.0043±0.0001 0.1870±0.0025 1.4153±0.0347＊＊孢子 3.0043±0.0002 0.6288±0.0025 4.6204±0.0339＊＊

2.2 同一部位不同生長期的黃酮含量差異

2.2.1 不同生長期的紫萁植株地上部分的黃酮含量不同生長期的紫萁植株地上部分的黃酮含量如表5所示。從表5可以看出，在紫萁前兩個生長期植株地上部分的黃酮含量逐漸增加，在生長期Ⅲ和生長期Ⅳ時，黃酮含量急劇下降，隨后在生長期Ⅴ和生長期Ⅵ時，黃酮含量又逐漸增加。以植株地上部分生長期Ⅳ（含量最低）為標準進行比較分析，與生長期Ⅲ有顯著差異；與其他幾組有極顯著差異。

2.2.2 不同生長期的紫萁葉柄部分的黃酮含量

不同生長期的紫萁葉柄部分的黃酮含量如表6所示。從表6可以看出，紫萁在生長期Ⅳ葉柄部分的黃酮含量最低，其他各期都較高且含量相近。以生長期Ⅳ（含量最低）為標準進行比較分析，與其他幾組有極顯著差異。

表5 紫萁植株地上部分不同生長期黃酮含量結果分析（S）

表5 紫萁植株地上部分不同生長期黃酮含量結果分析（S）

注：＊差異顯著（P＜0.05）；＊＊差異極顯著（P＜0.01）

紫萁生長期 凈重（g）吸光度（A）黃酮含量（%）生長期Ⅰ 3.0024±0.0001 0.2698±0.0034 2.2932±0.0347＊＊生長期Ⅱ 3.0052±0.0004 0.2139±0.0024 3.0042±0.0418＊＊生長期Ⅲ 3.0023±0.0003 0.1941±0.0033 1.498±0.0432＊生長期Ⅳ 3.0059±0.0004 0.1438±0.0025 1.1239±0.0241生長期Ⅴ 3.0031±0.0004 0.3456±0.0031 2.7233±0.0422＊＊生長期Ⅵ 3.0031±0.0002 0.3548±0.0010 2.5749±0.0137＊＊

表6 紫萁葉柄部部分不同生長期黃酮含量結果分析（S）

表6 紫萁葉柄部部分不同生長期黃酮含量結果分析（S）

注：＊＊差異極顯著（P＜0.01）

紫萁生長期 凈重（g）吸光度（A）黃酮含量（℅）生長期Ⅲ 3.0016±0.0002 0.1738±0.0023 1.320±0.0347＊＊生長期Ⅳ 3.0047±0.0001 0.1156±0.0020 0.87±0.0433生長期Ⅴ 3.0044±0.0002 0.1982±0.0023 1.3652±0.0541＊＊生長期Ⅵ 3.0043±0.0001 0.1870±0.0025 1.4153±0.0347＊＊

2.2.3 不同生長期紫萁葉片部分的黃酮含量差異

不同生長期的紫萁葉片部分的黃酮含量如表7所示。從表7可以看出，紫萁生長期Ⅳ葉片部分的黃酮含量最低，生長期Ⅴ最高。以生長期Ⅳ（含量最低）為標準進行比較分析，與生長期Ⅲ有顯著差異；與生長期Ⅴ有極顯著差異。

表7 紫萁葉片部部分不同生長期黃酮含量結果分析（S）

表7 紫萁葉片部部分不同生長期黃酮含量結果分析（S）

注：＊差異顯著（P＜0.05）；＊＊差異極顯著（P＜0.01）

紫萁生長期 凈重（g）吸光度（A）黃酮含量（%）生長期Ⅲ 3.0014±0.0002 0.1709±0.0030 1.568±0.0244＊生長期Ⅳ 3.0048±0.0002 0.1721±0.0031 1.2437±0.0623生長期Ⅴ 3.0087±0.0004 0.5246±0.0035 4.0438±0.0473＊＊

2.2.4 不同生長期紫萁根狀莖部分的黃酮含量差異

不同生長期的紫萁根狀莖部分的黃酮含量如表8所示。從表8可以看出，紫萁根狀莖部分的黃酮含量整體較高；其中紫萁生長期Ⅴ的黃酮含量很高，紫萁生長期Ⅲ較低。以紫萁生長期Ⅲ（含量最低）為標準進行比較分析，與紫萁生長期Ⅴ有極顯著差異。

表8 紫萁根狀莖部分不同生長期黃酮含量結果分析（S）

表8 紫萁根狀莖部分不同生長期黃酮含量結果分析（S）

注：＊＊差異極顯著（P＜0.01）

紫萁生長期 凈重（g）吸光度（A）黃酮含量（%）3.0042±0.0004 0.5574±0.0038 3.5312±0.0337生長期Ⅴ 3.0064±0.0003 0.8969±0.0014 8.1223±0.0235生長期Ⅲ＊＊

3 小結

從以上分析結果可以看出，紫萁葉柄部分的黃酮含量普遍很低，紫萁根狀莖部分的黃酮含量普遍很高。在同一部位的不同生長期，紫萁植株地上部分的黃酮含量在生長期Ⅰ和生長期Ⅱ逐漸增加，在隨后紫萁生長期Ⅲ和生長期Ⅳ的黃酮含量一直降低，在紫萁生長期Ⅴ的黃酮含量又升高，在生長期Ⅵ的黃酮含量又下降；葉片部分的黃酮含量隨生長期的變化而逐漸升高，在紫萁生長期Ⅴ黃酮含量達到最高；葉柄部分的黃酮含量一直較低，隨生長期的變化不明顯；在生長期Ⅵ的孢子體中，孢子部分的黃酮含量較高。綜上可知，紫萁在同一生活時期不同部位之間的黃酮含量是存在差異的，具體機理還有待于進一步研究。

［1］吳兆倫，秦仁昌.中國蕨類植物科屬志［M］.北京：科學出版社，1991.

［2］全國中草藥匯編編寫組.全國中草藥匯編（上冊）［M］.北京：人民衛生出版社，1983.

［3］樓之岑，石碧，王浴生，等.常用中藥材品種整理和質量研究［M］.北京：北京醫科大學、中國協和醫科大學聯合出版社，1995.

［4］馮玉斌，孫華，姜淑蘭，等.蕨菜和薇菜的利用［J］.吉林農業，2000，（10）：14-16.

［5］張莉，陳乃富，吳美.蕨根莖及老嫩葉中黃酮含量的比較［J］.食品與發酵工業，2006，32（11）：43-46.

［6］徐雅琴，孫艷梅，付紅，等.穗醋栗葉片中黃酮類物質的研究［J］.天然產物研究與開發，2001，13（2）：21-23.

［7］陳乃富，張莉.蕨菜黃酮類化合物的提取與分析［J］.中國林副特產，2004，（6）：13-15.