血必凈注射液對機體炎性反應抑制作用的研究進展

劉亞坤(綜述)，王萬鐵，游 昕(審校)

(1.溫州醫學院病理生理學系，浙江溫州325035;2.解放軍第四五四醫院胸心外科，南京210002)

血必凈注射液是我國著名的急救醫學專家王今達教授，根據中西醫結合“菌、毒、炎并治”的新理論，經30余年的臨床經驗研制的，由天津紅日藥業股份有限公司生產的中藥復方注射液，2004年2月獲得國家二級新藥證書和生產批文，填補了目前國內尚無對癥治療膿毒癥和多器官功能障礙綜合征(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)藥物的空白。該藥物經北京中醫藥大學、中國中醫科學院等多家國家臨床藥理基地臨床研究證實，治療膿毒癥和MODS的有效率超過了85%，居國際領先水平。近些年有關血必凈的研究主要是局限在國內，而國外尚未有相關的研究。

1 血必凈注射液組成成分

血必凈注射液由紅花、赤芍、當歸、丹參、川芎等藥物的有效成分組成，生藥濃度為500 g/L，單味中藥濃度為100 g/L，其提取物的有效成分包括紅花黃色素A、川芎嗪、丹參素、阿魏酸、芍藥苷、原兒茶醛等，其中紅花黃色素A濃度＞0.5 g/L，芍藥苷濃度＞1 g/L，阿魏酸濃度 ＞0.01 g/L［1］。

2 血必凈注射液的抗炎作用

2.1 血必凈與白細胞介素1β及腫瘤壞死因子α白細胞介素(interleukin，IL)1和腫瘤壞死因子 α(tumor necrosis factor－α，TNF－α)是介導急性期炎性反應最重要的因子。IL－1和TNF－α作用于下丘腦的體溫調節中樞，通過在局部產生前列腺素E引起發熱。IL－1 和 TNF－α 可誘導 IL－6 的產生，而 IL－6 能刺激肝臟合成纖維蛋白原等急性反應期血漿蛋白，促進紅細胞凝聚，使血細胞沉降率加快。IL－1、TNF、干擾素 γ(interferon－γ，IFN－γ)缺氧和某些亞致死性損傷可引起內皮細胞骨架重構，內皮細胞發生收縮。近內皮細胞間連接處由相互連接的囊泡所構成的囊泡體，形成穿胞通道，富含蛋白質的液體通過穿胞通道穿越內皮細胞，使得血管通透性增加，為炎癥的發生提供條件。TNF在化學趨化因子的協同作用下，可大大激活白細胞，白細胞游出并抵達炎癥病灶，吞噬病原體和組織碎片，而白細胞的這種滲出是炎性反應最重要的特征。IL－1和TNF－α作為主要的炎性介質，它們可以通過改變內皮細胞基因表達激活內皮細胞產生其他炎性介質，產生引起基質重構的酶，增加在內皮細胞表面形成血栓的能力。TNF可促進中性粒細胞聚集，使間葉細胞釋放蛋白溶解酶。TNF和IL－1可引起發熱、食欲不振、產生慢波睡眠、促進骨髓向末梢血循環釋放中性粒細胞、促進促腎上腺皮質激素和腎上腺皮質激素的釋放。TNF可引起敗血癥患者血壓降低、血管外周阻力降低、心率加快和血液pH降低。TNF－α還可引起惡病質。

目前已有資料證實，血必凈注射液可能通過抑制 TNF－α、IL－1β 的產生對胰腺炎產生治療作用［2］;血必凈與烏司他丁聯合治療MODS時，較對照組血清中 TNF、IL－1、IL－6 均明顯下降［3］;血必凈治療復蘇后 MODS時，血必凈治療后第3 天血清 TNF－α、IL－1、IL－6均較治療前明顯下降，生存率較對照組明顯提高，住ICU的時間也比對照組明顯縮短［4］;血必凈注射液可以顯著降低熱射病大鼠血漿的凝血指標、生化指標以及細胞因子濃度，減輕熱射病時肝的病理損害，可以通過降低系統炎性反應、凝血活性以及減輕組織缺血和損傷的程度，延長熱射病大鼠的生存時間［5］;在急性冠狀動脈綜合征患者的治療中，血必凈注射液治療組較對照組更能快速地降低患者IL－1、IL－6 和超敏 C 反應蛋白(high－sensitivity C－reactive protein，hs－CRP)含量［6］;血必凈注射液可能通過下調 TNF－α、IL－1β、IL－6 等的表達而對大鼠的急性肺損傷發揮保護作用［7］;在肝缺血/再灌注后，血必凈可減輕全身炎性反應，血必凈組較缺血/再灌注組TNF－α、IL－1β、IL－6、IL－8、細胞間黏附分子 1(intercelluar adhesion molecule－1，ICAM－1)均低［8］;血必凈注射液可以通過抑制炎性介質的過度釋放，減輕炎性反應，改善重癥患者的病情，對ICU重癥患者起到積極治療作用［9］;血必凈注射液可以降低急性呼吸窘迫綜合征患者血漿炎性介質水平，有利于急性呼吸窘迫綜合征患者呼吸功能的恢復，縮短機械通氣和住ICU時間［10］;血必凈注射液對老年冠狀動脈搭橋術后患者有益，可以有效降低患者的炎性反應，降低全身炎性反應綜合征的嚴重程度［11］;血必凈注射液可能通過降低老年膿毒癥患者血清中 TNF－α、IL－1β、IL－6 的水平及提高IL－10的濃度，來改善老年膿毒癥患者的病情，降低病死率［12］;血必凈注射液結合常規西醫治療能有效抑制重癥急性盆腔炎性介質釋放，對重癥急性盆腔炎治療有積極作用。治療后，血必凈組與對照組比較，血中依前列醇、依前列醇/血栓素A2、補體 C3、C4有一定程度的升高，而血栓素 A2、TNF－α、IL－1、IL－6、IL－8、CRP 水平降低［13］;血必凈注射液能改善膿毒癥大鼠的心肌損傷，其機制可能與下調TNF－α、IL－1β 水平有關［14］;血必凈注射液能有效降低小腸缺血/再灌注大鼠血清中 TNF－α、IL－1、IL－6 的水平［15］;多發性創傷早期應用血必凈注射液能減輕病情嚴重程度，顯著降低膿毒癥、MODS的發生率，從而改善多發性創傷患者的預后［16］;在急性百草枯中毒中，血必凈注射液可抑制部分炎性因子的活力，對臟器損害發揮保護作用［17］;血必凈注射液可以明顯減低急性有機磷農藥中毒患者血清中炎性因子的水平，改善其預后，降低病死率［18］;血必凈注射液能降低患者血清TNF－α水平，減少IL－6釋放，改善炎性反應［19］。

2.2 血必凈與ICAM－1 ICAM－1屬于免疫球蛋白超家族分子，而白細胞借助于免疫球蛋白超家族分子和整合蛋白類分子黏附于內皮細胞，這又與白細胞的滲出有關，從而促進炎性反應。淋巴細胞是慢性炎癥中浸潤的一種炎性細胞，淋巴細胞運動到炎癥灶主要是通過整合素 α4β1/血管細胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule－1，VCAM－1)、ICAM－1/淋巴功能相關的抗原1(lymphocyte function associated antigen－1，LFA－1)和淋巴細胞化學趨化因子介導的。淋巴細胞接觸到抗原后可被激活，發揮細胞和體液免疫作用，當然亦可產生針對自身抗原的抗體。激活的淋巴細胞可產生淋巴因子，IFN－γ是其中之一，是激活單核巨噬細胞的主要因子。而單核巨噬細胞系統的激活是慢性炎癥的一個重要特征，單核巨噬細胞產生的細胞因子反過來又可激活淋巴細胞，使慢性炎性反應周而復始、連綿不斷。

血必凈注射液可以抑制ICAM－1及其配體LFA－1在SD大鼠急性壞死性胰腺炎合并多器官損傷模型中的表達，減輕肺組織損傷程度，減少腹水的產生，從而在急性壞死性胰腺炎合并多器官損傷的病變發展過程中發揮一定的保護作用［20］;對膿毒癥小鼠，血必凈注射液能明顯抑制肝組織髓過氧化物酶活性，減少肝組織ICAM－1和VCAM－1蛋白的表達水平，從而減輕嚴重燒傷后組織白細胞聚集，改善肝功能，有效減輕肝臟炎性反應［21］;對嚴重膿毒癥患者，血必凈治療組的促炎性因子VCAM－1和ICAM－1明顯低于常規治療組［22］;對于心臟驟停復蘇大鼠，血必凈治療組比模型組心、腦中ICAM－1的水平低，血必凈可明顯抑制心、腦組織中的細胞因子，從而緩解心搏驟停大鼠復蘇中缺氧/再灌注后炎性因子所帶來的損傷［23］;在骨骼肌缺血/再灌注后腎損傷中 ICAM－1的表達明顯上調，血必凈可抑制ICAM－1表達上調，對骨骼肌缺血/再灌注腎損傷有明顯保護作用［24］;聯合運用血必凈和硫酸鎂可以有效緩解急性重癥胰腺炎臨床癥狀，減輕炎性反應，縮短住院時間，與對照組比較，患者血清 ICAM－1 水平較低［25］。

2.3 血必凈與核因子κB 核因子κB(nuclear factor－kappa B，NF－κB)是參與免疫與炎性反應的重要轉錄因子。靜息時NF－κB的二聚體與其抑制性蛋白IκB結合，以無活性的形式存在于胞質中。脂多糖、促炎細胞因子(IL－1，TNF－α 等)等能通過各自的受體激活 IκB 激酶(IKK 或 IκK)，后者可使 IκB 磷酸化，導致 IκB 與 NF－κB 解離并被降解，NF－κB 得以進入核內調節多種基因，包括多種細胞因子(IL－2、－6、－8，TNF－α，粒細胞－巨噬細胞集落刺激因子，IFN－β 等)、趨化因子、某些黏附分子以及誘導性一氧化氮合酶等的表達，參與炎性反應。

血必凈注射液可顯著抑制膿毒癥大鼠傷后24～72 h肝組織蛋白C mRNA表達的下調，而活化的蛋白C可通過阻斷抑制性－κB降解而下調NF－κB的表達［26］;血必凈注射液可抑制 NF－κB 及炎性細胞活性，對百草枯中毒大鼠急性肺損傷有治療作用［27］;Toll樣受體素 4(Toll－like receptor 4，TLR4)－NF－κB 通路參與了創傷弧菌膿毒癥損傷的早期病理生理過程，血必凈注射液能抑制 TLR4－NF－κB活化，減輕創傷弧菌膿毒癥大鼠肺損傷［28］;血必凈注射液能抑制NF－κB p65 的表達，而 NF－κB p65 參與了創傷弧菌膿毒癥肺損傷的過程，從而起到保護創傷弧菌膿毒癥大鼠肺組織的作用［29］;重癥肺炎患者 NF－κB 活化，凝血功能紊亂，NF－κB參與調控炎性反應，血必凈注射液可通過抑制NF－κB活化及抗凝機制減輕重癥肺炎的全身炎性反應［30］;對重癥急性胰腺炎患者，血必凈注射液治療后可使患者血清中的NF－κB p65明顯降低［31］;血必凈注射液可通過抑制腎組織間質NF－κB p65及轉化生長因子β1的表達，減輕腎間質炎性損害，并對早期腎間質纖維化有抑制作用［32］;血必凈注射液可抑制NF－κB表達上調，對缺血/再灌注腎損傷有明顯保護作用［33］;血必凈注射液可以通過下調腸組織內 TLR4、NF－κB 和 ICAM－1表達減輕膿毒癥大鼠的腸損傷［34］;對急性有機磷中毒性心血管損傷的研究，血必凈注射液可以呈劑量依賴性地抑制中性粒細胞NF－κB的活性，所以早期聯合應用血必凈注射液和常規治療藥物，可改善急性有機磷中毒并發心血管損傷患者的預后，提高救治成功率［35］。

2.4 血必凈與軸突導向因子1 軸突導向因子1(axon guidance factors－1，Netrin1)是由脊椎動物胚胎神經管腹側中線底板細胞和神經膠質細胞分泌的可擴散蛋白，由于調節軸突導向作用而被發現［36］。Netrin－1在血管新生中發揮著抑制或者促進的雙重作用［37］;Netrin－1在胎盤血管新生中也扮演著不可或缺的角色［38］;另外它可以降低急性肺損傷過程中肺泡的炎性反應［39］。

已有資料證實 Netrin－1通過 DCC/ERK1/2/eNOSs1177/NO/DCC前饋機制［40］，對心臟發揮保護作用［41］;另外，Netrin－1 還可以減輕炎性反應［42－44］，并且對缺血/再灌注過程中的炎性反應［45］也起到一定的調節作用。而血必凈注射液是否可以通過促進Netrin－1的生成，而發揮抵抗炎性反應的作用，從而達到對心臟的保護作用呢?這是血必凈注射液抗炎的又一可能機制，而目前對這個可能的機制尚未有研究報道。

3 結語

血必凈注射液作為一種中成藥，發揮著其抗炎作用，對重要臟器的損傷具有保護效應，但也難免會出現一些不良反應。所以，為了使其能更好地應用于臨床，需要進一步研究，最終達到降低不良反應、增強療效的目的。此外，其抗炎作用機制仍需更深層次的探究。

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