用免疫組化的方法研究E-cadherinN-cadherin在胃癌中的表達(dá)

莊 英

黑龍江省黑河市第一人民醫(yī)院病理科，黑龍江黑河 223859

胃癌是常見的惡性腫瘤之一。 在臨床上胃癌治療失敗的主要原因是腫瘤轉(zhuǎn)移，這也是腫瘤研究的重點(diǎn)。 研究發(fā)現(xiàn)，在某些上皮癌中有N-cadherin 的反常表達(dá)，且在增強(qiáng)癌細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移方面較E-cadherin 低表達(dá)或不表達(dá)更為明顯和直接，這之中可能存在E-cadherin 向N-cadherin 的轉(zhuǎn)化，并認(rèn)為這是EMT 的一個(gè)重要機(jī)制[1]。 本文對(duì)96 例胃癌組織標(biāo)本進(jìn)行免疫組織化學(xué)方法的蛋白檢測(cè)，探討E-cadherin 與N-cadherin 在胃癌中的表達(dá)情況。

1 . 資料與方法

1.1 一般資料

收集本院2004年6月～2010年5月間術(shù)前均未接受化療及放療胃癌患者的切除標(biāo)本96 例。 其中男59 例，女37 例；年齡24～78 歲，平均年齡56.2 歲。 腫瘤組織學(xué)類型按WHO 分型標(biāo)準(zhǔn)，包括高分化腺癌15 例，中分化腺癌29 例，低分化腺癌52 例。 將上述標(biāo)本安癌細(xì)胞浸潤(rùn)程度分為超過漿膜層68 例，未超過漿膜層28 例。發(fā)生局部淋巴轉(zhuǎn)移72 例，無局部淋巴轉(zhuǎn)移24 例。另選取癌旁組織80 例為對(duì)照組。 所有標(biāo)本術(shù)前均未行放療和化療。 標(biāo)本用10%中性甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，厚連續(xù)切片以備免疫組化應(yīng)用。

1.2 方法

采用Elivision 二步法免疫組化染色。 染色步驟嚴(yán)格按照說明書操作，DAB 顯色，蘇木素復(fù)染，脫水透明封片。陽性對(duì)照采用已知陽性對(duì)照片PBS 代替一抗作空白對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定

E-cadherin、N-cadherin 以細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性表達(dá)，N-cadherin 按照陽性細(xì)胞占視野中總細(xì)胞的百分比劃分陽性與陰性，＜20%為陰性，≥20%為陽性。 E-cadherin 陽性判定標(biāo)準(zhǔn)為陽性細(xì)胞數(shù)＜90%為陰性，≥90%為陽性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 11.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。采用χ2檢驗(yàn)，P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 E-cadherin、N-cadherin 表達(dá)情況

胃癌組織中E-cadherin 的陽性表達(dá)率為37.5%(36／96)，低于癌旁組織100%(80／80)，兩者比較差異有顯著性(P < 0.05)；Ncadherin 陽性率為44.8%(43／96)， 高于癌旁組織l1.3%(9／80)，兩者比較差異有顯著性(P < 0.05)。

2.2 胃癌組織中N-cadherinE-cadhefin 的表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系

根據(jù)癌組織分化程度、浸潤(rùn)程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況對(duì)96 例胃癌組織進(jìn)行分組比較N-cadherin 與E-cadhefin 的表達(dá)情況，結(jié)果見表1。

表1 胃癌組織中N-cadherinE-cadhefin 的表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系（例）

3 討論

E-cadherin 和N-cadherin 是與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系最密切的兩種類型。E-cadherin 屬于介導(dǎo)同型細(xì)胞相互粘附性的跨膜糖蛋白，除具有調(diào)節(jié)胚胎組織的發(fā)育、組織形成、參與細(xì)胞與細(xì)胞間信息傳遞交流等作用外，對(duì)促進(jìn)細(xì)胞的粘附聚集、維持上皮形態(tài)結(jié)構(gòu)的完整性、維持細(xì)胞極性和參與分化調(diào)節(jié)也至關(guān)重要[2]。 大量的臨床病理研究證實(shí)，低分化腫瘤中的E-cadherin 表達(dá)完全喪失或下調(diào)。E-cadherin基因定位于16 號(hào)染色體，N-cadherin 基因定位于18 號(hào)染色體。 但二者在腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用卻相反，有學(xué)者提出了“鈣粘蛋白轉(zhuǎn)換”(cadherin switch)的概念，并認(rèn)為這是EMT 的一個(gè)重要機(jī)制[3]。本組研究顯示，隨著腫瘤分化程度的增高，N-cadherin 的陽性表達(dá)降低，而E-cadherin 的表達(dá)增高，兩者呈負(fù)相關(guān)。 同時(shí)，我們認(rèn)為E-cadherin的表達(dá)下降和N-cadherin 表達(dá)增加與胃癌的惡化、轉(zhuǎn)移有關(guān)同時(shí)在胃癌中可能也存在著E-cadherin 向N-cadherin 轉(zhuǎn)化現(xiàn)象。

胃癌EMT 與侵襲轉(zhuǎn)移是多因素共同作用的復(fù)雜病理過程.E-cadherin 蛋白的低表達(dá)與N-cadherin 的反常表達(dá)發(fā)揮重要作用，有待于更深入的研究。

[1] 劉愛東,劉士生,許志萍，等.E-cadherin 在胃癌中的表達(dá)及意義[J].廣東醫(yī)學(xué)，2007，28（11）.

[2] 吳晶晶,王貴吉,張明智.N-cadherin 和MMP-3 在胃癌中的表達(dá)及意義[J].中國現(xiàn)代醫(yī)生，2010,48(23).

[3] Lascombe I，Clairotte A，F(xiàn)auconnet S，et a1.N-cadherin as anovel prognosUc marker of progression in superficial urothelial tumors [J].Clin Cancer Res，2006，12(9)：2780-2787.