宮頸癌組織中CD13與CD34的表達

郭 哲，史惠蓉

1)南陽市中心醫院婦產科 南陽473000 2)鄭州大學第一附屬醫院婦產科 鄭州450052

#通訊作者，女，1956年4月生，博士，教授，研究方向:婦科腫瘤，E-mail:huirougshi@yahoo.com.cn

宮頸癌是常見婦科惡性腫瘤之一，是發展中國家婦女死亡的第二大原因，目前其發病率和死亡率有增長趨勢且有明顯年輕化傾向。腫瘤生成依賴血管形成，因此，腫瘤組織內的微血管形態、分布、數量及血液循環狀態對于腫瘤的形成、治療和預后判定有著十分重要的意義。微血管密度(microvessel density，MVD)是目前評估腫瘤血管生成形態學的金標準，且其表達與宮頸癌的預后密切相關［1］。CD13是腫瘤特異性血管標記物，是血管生成的重要調節因子，對處于血管生成過程中的微小血管內皮細胞具有較高的特異性，因此用CD13 標記來檢測MVD已成為當今的研究熱點［2-3］。作者以CD13 和CD34為標記檢測宮頸癌組織中的MVD，探討CD13 作為腫瘤新生血管標記物的臨床意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2009年6月至2011年8月在南陽市中心醫院婦產科住院手術切除的新鮮宮頸癌標本60例。患者年齡38～65(48.5±6.8)歲，術前均未接受輔助放、化療以及其他抗癌治療。標本經組織病理學證實，鱗癌45例，腺癌15例; 其中19例有盆腔淋巴結轉移。按照國際婦產科協會(FIGO)2009年新的宮頸癌臨床分期標準進行分期，Ⅰ期32例，Ⅱ期28例。

1.2 宮頸癌組織中MVD 檢測 鼠抗人CD13、CD34 單克隆抗體、SP 免疫組化試劑盒和DAB 顯色劑均購自上海信然生物技術有限公司。取存檔蠟塊，4 μm 厚連續切片，采用免疫組化SP 法檢測，按試劑盒操作說明進行。用PBS 緩沖液代替一抗作陰性對照。

1.3 結果判定 顯微鏡下觀察，CD13 和CD34 均在血管內皮細胞胞質中表達，呈棕黃色染色。由兩位副主任醫師在鏡下進行微血管計數，凡呈現棕黃色單個內皮細胞或內皮細胞群者，只要與鄰近微血管、腫瘤細胞或其他結締組織分開，就視為一個微血管。參照Weidner 方法，先在40 倍視野下尋找MVD密集區，然后在高倍鏡下計數4 個不同視野的微血管數，取其平均值作為該標本的MVD。

1.4 統計學處理 采用SPSS 13.0 處理數據，2組間均數的比較應用兩獨立樣本t 檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 CD13 和CD34 的表達 顯微鏡下可見CD13主要表達于微血管癌間質內皮細胞的胞質，CD34 在所有血管內皮細胞均著色(圖1)。

2.2 CD13、CD34 標記的MVD 與宮頸癌臨床病理特征的關系 見表1。

圖1 CD13(左)和CD34(右)標記的微血管(×400)

表1 CD13、CD34 標記的MVD 與宮頸癌臨床病理特征的關系

續表

3 討論

CD13 是一種將氨基酸從寡肽N 末端切除的膜結合糖蛋白(氨基肽酶N)，具有鋅離子結合依賴性金屬蛋白酶活性，可酶解基底膜蛋白，促進血管生成，從而調控腫瘤細胞的侵襲和轉移［4］。Kido 等［5］研究發現CD13 在骨肉瘤和黑色素瘤轉移過程中起積極作用，認為與CD13 與促進腫瘤細胞附著、降解細胞外基質蛋白有關。Ikeda 等［6］研究發現，CD13表達水平與胰腺癌腫瘤內MVD 呈平行增加關系，提示CD13 與腫瘤的新血管生成密切相關。Inagaki等［7］證實CD13 抑制劑可以抑制肝癌細胞的侵襲和血管生成，在臨床治療中CD13 抑制劑結合放化療對肝癌的治療效果好于單純放化療［8］。

長期以來，國內外多采用CD34 抗體標記來評價實體腫瘤組織中的MVD，但是CD34 在所有血管內皮細胞均有表達，對腫瘤微血管無特異性。這種對大多數血管內皮細胞具有抗性作用的抗體往往與非增殖性或大血管的內皮細胞反應較好，但在腫瘤組織微血管中表達不穩定，反應特異性較差。該研究結果顯示，CD34 標記的MVD 與宮頸癌患者的臨床分期、盆腔淋巴結轉移及病理分型無關，而Ⅱ期、有盆腔淋巴結轉移及病理類型為腺癌的宮頸癌組織CD13標記的MVD 明顯高于Ⅰ期、無轉移及病理類型為SCC者。臨床分期和盆腔淋巴結轉移是宮頸癌預后的主要影響因素。因此，CD13 標記的MVD 可以作為預測宮頸癌患者的預后指標，對術后的放、化療及其他抗癌治療等有重要的指導作用。

總之，CD13 標記宮頸癌微血管比CD34 更具有特異性，CD13 可以用來判斷宮頸癌生長、浸潤及復發狀況，并較準確地對腫瘤轉移做出預示，可為患者預后提供更有價值的信息。

［1］劉楠，何福仙，鐘剛.血管生長因子、血管生成與宮頸癌的關系［J］.國外醫學:婦產科學分冊，2003，30(4):204

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［3］Terauchi M，Kajiyama H，Shibata K，et al.Inhibition of APN/CD13 leads to suppressed progressive potential in ovarian carcinoma cells［J］.BMC Cancer，2007，7:140

［4］Aozuka Y，Koizumi K，Saitoh Y，et al.Anti-tumor angiogenesis effect of aminopeptidase inhibitor bestatin against B16-BL6 melanoma cells orthotopically implanted into syngeneic mice［J］.Cancer Lett，2004，216(1):35

［5］Kido A，Krueger S，Haeckel C，et al.Inhibitory effect of antisense aminopeptidase N (APN/CD13)cDNA transfection on the invasive potential of osteosarcoma cells［J］.Clin Exp Metastasis，2003，20(7):585

［6］Ikeda N，Nakajima Y，Tokuhara T，et al.Clinical significance of aminopeptidase N/CD13 expression in human pancreatic carcinoma［J］.Clin Cancer Res，2003，9(4):1503

［7］Inagaki Y，Tang W，Zhang L，et al.Novel aminopeptidase N(APN/CD13)inhibitor 24F can suppress invasion of hepatocellular carcinoma cells as well as angiogenesis［J］.Biosci Trends，2010，4(2):56

［8］Haraguchi N，Ishii H，Mimori K，et al.CD13 is a therapeutic target in human liver cancer stem cells［J］.J Clin Invest，2010，120(9):3326