注射用頭孢地嗪鈉液相條件摸索及方法學研究

關鍵詞 注射用頭孢地嗪鈉 高效液相色譜法 含量測定

doi：10.3969/j.issn.1007-614x.2012.30.007

頭孢地嗪（cefodizime）是一個新型第3代頭孢廣譜抗生素，它對革蘭陽性菌、陰性菌均有抗菌活性，對β內酰胺酶穩定，對頭孢菌素酶和青霉素酶極穩定。頭孢地嗪鈉是世界上第一個具有免疫增強功能的第3代頭孢菌素，是德國赫斯特公司和法國羅賽爾公司共同開發的第3代注射用頭孢菌素類抗生素。本文建立了高效液相色譜法的條件和方法學研究，并最終確立了含量測定和有關物質考察的方法[1]。

儀器與試藥

儀器：島津LC-10AT高效液相色譜儀（包括島津SPD-10AVP紫外檢測器、島津LC-10ATVP泵及N2000色譜工作站）；島津UV-2401PC型紫外分光光度計。

試劑：乙腈、甲醇（均為色譜純）、磷酸二氫鉀、無水磷酸氫二鈉（均為分析純）；頭孢地嗪對照品（含量886%），中國藥品生物制品檢定所；自制樣品批號：20110428、20110429、20110430。

液相條件確定

通過檢測波長的選擇、含量測定考察靈敏度試驗和保留時間試驗等，最終確定含量測定的液相條件為：色譜柱：C18柱（150×46mm（id），5μm），Thermo電子公司生產，靈敏度0005，流速10ml/min，波長262nm，流動相：磷酸鹽緩沖液（取磷酸二氫鉀087g與無水磷酸氫二鈉022g，加水溶解并稀釋至1000ml，搖勻）-乙腈（92：8）；有關物質的液相條件：色譜柱及流動相：同含量測定項下，靈敏度0002，流速10ml/分，波長215nm。

含量測定

色譜條件與系統適用性試驗：色譜條件同液相條件確定項下中含量測定液相條件。理論板數按頭孢地嗪峰計應不低于1200，主峰與相鄰雜質峰之間的分離度應符合規定。 測定法：取本品25mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置25ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液；取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取頭孢地嗪對照品，同法測定，按外標法以峰面積計算。

線性范圍考察與標準曲線繪制：取頭孢地嗪對照品，精密稱定，置50ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取3、4、5、6、7ml分別置10ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。取各溶液20μl分別注入色譜儀，記錄色譜圖，由峰面積（A）對溶液濃度（C）線性回歸，得回歸方程及標準曲線。見表1。

頭孢地嗪的濃度60.12～140.28μg/ml，峰面積A與濃度C呈很好的線性關系。

穩定性試驗：取本品，按“含量測定”項下方法配制低、中、高3種濃度的樣品溶液，分別于0小時、2小時、4小時、6小時、8小時進樣，以5次不同時間測定的峰面積結果計算RSD（%）值，考察方法的穩定性。見表2。

進樣精密度試驗：取本品，按“含量測定”方法項下配制樣品溶液，并重復進樣6次，計算6次峰面積的RSD（%），考察進樣精密度。見表3。

耐用性試驗：取本品，按含量測定方法，分別于不同溫度和流速的條件下測定含量，以不同條件下的含量結果考察方法的耐用性。見表4。

樣品檢查：按含量測定項下測定法檢查本品，見表5。

試驗結果表明：在含量測定條件下，該方法的線性范圍、穩定性、重復性、耐用性的考察結果都較滿意。綜上，采用HPLC法對注射用頭孢地嗪鈉含量進行測定具結果準確及操作簡便等優點。

討 論

含量測定方法學考察包括：線性范圍考察與標準曲線繪制試驗明確了主藥在一定濃度范圍內A與C的線性關系；穩定性試驗是考察樣品在此方法狀態下放置的穩定性；耐用性試驗設立4個不同的柱溫和流速條件考察了在不同條件下對含量測定結果的干擾。從以上幾個方面對含量測定的方法學進行考察，經試驗并參照注射用頭孢地嗪鈉的標準，最終確定含量測定的方法。

參考文獻

1 於東暉，林志彬.頭孢地嗪的抗菌活性及其藥動學與臨床應用[J].中國藥學雜志，1998，33（5）：261-265.