非小細(xì)胞肺癌組織Ezrin的表達(dá)及其意義

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導(dǎo)致腫瘤患者最終死亡的一個(gè)重要的原因就是癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移，癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移涉及很多的因素，在腫瘤轉(zhuǎn)移時(shí)，某些蛋白質(zhì)起著至關(guān)重要的推動(dòng)作用。尤其是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的Ezrin蛋白，其作用機(jī)制緊密關(guān)系到癌細(xì)胞的整個(gè)產(chǎn)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移過(guò)程¹。NSCLC作為一種較易出現(xiàn)的惡性腫瘤，其發(fā)病率越來(lái)越高。本文研究采用免疫組化法對(duì)Ezrin蛋白在NSCLC組織中的表達(dá)及關(guān)系進(jìn)行檢測(cè)，以研究Ezrin與NSCLC的臨床病理的關(guān)系。

資料與方法

選取90例存檔石蠟包埋標(biāo)本，其中NSCLC組織標(biāo)本60例，男40例，女20例；年齡32～79歲，平均55.8歲；29例鱗癌，14例腺癌，9例鱗腺癌，8例大細(xì)胞癌；肺癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期分別為21例，14例、13例及12例；高分化、中分化、低分化分別為21例、23例及16例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性37例，陰性23例。另外選取正常肺組織標(biāo)本30例作為對(duì)照，取于腫瘤組織5cm外的組織。所有標(biāo)本都沒(méi)有進(jìn)行放療及化療。

方法：采取免疫組化SP法，將10%福爾馬林固定、石蠟包埋的癌組織制成4～5μm切片，進(jìn)行常規(guī)脫蠟，接著浸到0.01mol/L、pH=6.0的枸櫞酸鹽緩沖液里，利用微波爐，在92～98℃溫度環(huán)境下，進(jìn)行持續(xù)10分鐘的抗原修復(fù)，免疫組織化學(xué)染色用SP法。Ezrin蛋白陽(yáng)性表達(dá)為腫瘤細(xì)胞漿內(nèi)產(chǎn)生典型棕黃色顆粒，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目處在10%～25%范圍表示為（+），處在25%～50%范圍表示為（++），處在50%以上的范圍表示為（+++）。試驗(yàn)中，對(duì)陽(yáng)性和陰性進(jìn)行對(duì)比，陽(yáng)性對(duì)照采用乳腺癌陽(yáng)性切片，陰性用PBS代替一抗。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：本組所有統(tǒng)計(jì)學(xué)資料采用SPSS12.0軟件處理，相關(guān)數(shù)據(jù)檢驗(yàn)采用X2檢驗(yàn)，當(dāng)P<0.05時(shí)認(rèn)為，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

在鱗癌、腺癌、鱗腺癌、大細(xì)胞癌Ezrin蛋白陽(yáng)性率分別是65.52%、71.43%、77.78%、62.50%，在NSCLC中，Ezrin基本表達(dá)于胞漿，蛋白總陽(yáng)性表達(dá)率66.67%，在NL中，Ezrin基本表達(dá)于胞膜，蛋白陽(yáng)性率100%，兩組間蛋白陽(yáng)性率有明顯的差異（P<0.05）。Ezrin蛋白表達(dá)和肺癌組織類(lèi)型的關(guān)系，見(jiàn)表1。

Ezrin蛋白陽(yáng)性表達(dá)和是否具有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系較為密切，且Ezrin蛋白陽(yáng)性表達(dá)在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中比無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高，但其和肺癌組織學(xué)類(lèi)型、腫瘤分化程度、肺癌分期沒(méi)有明顯關(guān)系。Ezrin蛋白陽(yáng)性表達(dá)與生物學(xué)行為的關(guān)系，見(jiàn)表2。

討論

細(xì)胞骨架蛋白Ezrin屬于ERM蛋白家族成員之一，通過(guò)組成膜細(xì)胞骨架相關(guān)復(fù)合體和形成特殊膜結(jié)構(gòu)對(duì)細(xì)胞活動(dòng)進(jìn)行調(diào)節(jié)，如細(xì)胞存活、戮附和運(yùn)動(dòng)，此類(lèi)活動(dòng)對(duì)腫瘤產(chǎn)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移起著至關(guān)重要的作用。

本組結(jié)果顯示，Ezrin蛋白陽(yáng)性表達(dá)和是否具有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系較為密切，但和肺癌組織學(xué)類(lèi)型、腫瘤分化程度、肺癌分期沒(méi)有明顯關(guān)系。且Ezrin蛋白陽(yáng)性表達(dá)在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中比無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組高。過(guò)去的研究資料顯示，Ezrin蛋白可以通過(guò)與CD43、ICAM-1、ICAM-2、磷脂酰絲氨酸4和5-二磷酸鹽結(jié)合等方式，使癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力得到大幅度提高。

有關(guān)資料表明，Ezrin和E-cadherin結(jié)合在一起，并且Ezrin可通過(guò)Rho蛋白調(diào)節(jié)E-cadherin在胞膜上的表達(dá)。也就是說(shuō)，Ezrin對(duì)E-cadherin有著直接或間接作用，同時(shí)發(fā)現(xiàn)，惡性腫瘤浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移中EzrinThr567磷酸化有著很重要的作用。

本組資料表明，Ezrin蛋白陽(yáng)性表達(dá)在肺癌腫瘤細(xì)胞定位也有一定的差別，在正常肺組織主要表達(dá)于胞膜，在非小細(xì)胞肺癌卻主要表達(dá)于胞漿。實(shí)際上，在結(jié)腸癌腫瘤細(xì)胞研究中也發(fā)現(xiàn)有類(lèi)似的差異。目前Ezrin亞細(xì)胞定位變化機(jī)理并不明確，但其對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移起著重要作用。