肥胖乳腺癌組織中NF-κB的表達及其預后意義

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤，其發病率在我國呈明顯的上升趨勢。肥胖是乳腺癌的高危發病因素。核轉錄因子κB是一種有多種調節功能的轉錄因子，具有調控細胞增殖、分化、凋亡以及惡性轉化［1］。NF-κB在肥胖性乳腺癌的表達水平是否與其發生演變有關，目前研究甚少。本研究采用免疫組化的方法檢測肥胖乳腺癌組織中NF-κB的表達水平，旨在探討其陽性表達與肥胖乳腺癌的關系及對其預后影響，為臨床肥胖乳腺癌的治療、預后判斷提供理論基礎。

資料與方法

依據病歷和家屬提供的性別、體重、身高及年齡情況，經患者同意后抽取2005年7月～2007年7月在新鄉醫學院第一和第三附屬醫院住院的接受手術治療的乳腺癌患者82例，患者均為女性，年齡42～69歲，平均51.2歲。其中45例為肥胖乳腺癌患者，37例為正常體重乳腺癌患者，術前均未化療、放療，所有病例均經病理切片診斷為乳腺癌。術后隨訪>5年。

主要試劑：兔抗人NF-κB多克隆抗體、SP試劑盒、DAB顯色劑均購自北京某公司。

免疫組織化學染色：所有標本經甲醛固定，常規脫水、透明、浸蠟、石蠟包埋，5μm連續切片，采用SP二步法按說明書進行操作。兔抗人NF-κB多克隆抗體工作液濃度1:200，用PBS替代一抗作陰性對照。結果判斷標準：NF-κB蛋白表達陽性染色為淡黃色、棕黃色或棕褐色，定位于乳腺細胞胞質內，每張切片于100×高倍鏡下顯微照相，陽性細胞胞質為棕黃色，隨機選取40個標本，采用Motic Images Advanced 3.0圖像分析軟件檢測其陽性信號平均光密度值以反映NF-κB表達的強弱，光密度值越高，NF-κB的表達就越強。

統計學處理：SPSS13.0軟件包進行統計分析，實驗數據以(X±S)，采用方差分析；計數資料行X2檢驗，以P＜0.05為差異有顯著性。

結果

NF-κB蛋白在肥胖乳腺癌組織中的表達：癌組織中NF-κB陽性定位于細胞核內，呈灶性或彌漫染色，胞漿及間質細胞表達量極少。肥胖乳腺癌NF-κB蛋白陽性表達平均光密度值分別為12.23±1.51，n=31與正常體重乳腺癌組NF-κB蛋白陽性表達平均光密度值5.37±0.78，n=15比較，差異有顯著性(P＜0.05)。

NF-κB蛋白表達與5年復發轉移的關系：45例肥胖乳腺癌中，有31例NF-κB陽性患者，其中24例(77.4%)發生5年復發轉移；而14例NF-κB陰性患者中，僅3例(21.4%)發生5年復發轉移，有明顯差異(P＜0.05)。37例正常體重乳腺癌NF-κB陽性患者15例中，僅3例(20%)發生5年復發轉移；而22例NF-κB陰性患者中，有9例(40.9%)發生5年復發轉移，差異無顯著性(P＞0.05)。

討論

核轉錄因子κB(NF-κB)是1986年從成熟B細胞核抽提物中發現的一種核轉錄因子，屬于Rel蛋白家族成員，廣泛存在于細胞中，是信號轉導通路上的的交匯點。研究表明，活化的NF-κB可促進細胞增殖，抑制細胞凋亡［2］。因此，NF-κB與多種腫瘤的發生、發展有關，如宮頸癌、胰腺癌、膀胱癌等。本研究結果顯示：NF-κB在肥胖乳腺癌組織中陽性表達的平均光密度值分別為12.23±1.51與正常體重乳腺癌組中蛋白陽性表達的平均光密度值5.37±0.78比較，差異有顯著性(P＜0.05)，提示NF-κB參與肥胖乳腺癌的發生發展過程。

有研究表明，NF-κB具有促進腫瘤細胞增殖、侵襲和惡化的作用［3］。最近的的研究也證實，NF-κB激活在乳腺上皮細胞向惡性表型的轉變過程中起著重要作用［4］。本實驗結果顯示，肥胖乳腺癌組織中NF-κB的陽性率與5年復發轉移呈明顯的正相關，進一步提示NF-κB表達的強弱對于估計肥胖乳腺癌的預后具有現實意義。

綜上所述，肥胖乳腺癌的預后是受多方面因素、多種機制控制的復雜過程。但就NF-κB是否能作為肥胖乳腺癌發生發展的標志物有待進一步的研究。

參考文獻

1 Mayo MW，Baldwin AS.The transcription factor NF-κB:control of oncogenesis and cancer therapy resistance［J］.BiochimicaetBiopysicaActa，2000，1470:M55-62.

2 Perkins ND.NF-κappa B:tumor promoter or sup-pressor［J］.Trends Cell Biol，2004，14(2):64-69.

3 Omstein DL，Zacharsk LR.Iron stimulates urokinase plasminogen activator expression and activates NF-kappa B in human prostate cancer cells［J］.Nutr cancer，2007，58(1):115-126.

4 Raphae lle RM，Esther LB，David C，et al.Protein kinase CK2 promotes aberrant activation of nuclear fcator-κB，transformed phenotype，and survuval of breast cancer cells［J］.Cancer Res，2005，62(6):6770-6778.