提高液基薄層細(xì)胞學(xué)制片質(zhì)量的體會

關(guān)鍵詞液基細(xì)胞學(xué)涂片制片質(zhì)量

doi：10.3969/j.issn.1007—614x.2012.27.194

液基細(xì)胞學(xué)最早出現(xiàn)在臨床是在上個(gè)世紀(jì)90年代，隨著這些年來的不斷完善和推廣，液基細(xì)胞學(xué)在臨床上已經(jīng)漸漸取代傳統(tǒng)涂片方法成為了重要的檢測手段之一，其特點(diǎn)在于能夠有效的祛除紅細(xì)胞和炎癥細(xì)胞等的干擾，提高檢測的準(zhǔn)確率，目前液基細(xì)胞學(xué)已經(jīng)在各個(gè)學(xué)科廣泛開展，相較于傳統(tǒng)涂片而言有著較好的實(shí)用性，降低了了假陽性的概率。但是隨著筆者的應(yīng)用發(fā)現(xiàn)，如何制得一張合格、有效的涂片是提高整體檢測準(zhǔn)確度的關(guān)鍵_[1]，現(xiàn)對近年來應(yīng)用的體會進(jìn)行了回顧性分析，報(bào)告如下。

標(biāo)本的獲取

標(biāo)本的獲取是制作涂片的第1步，如何正確的獲取足夠的細(xì)胞數(shù)量的關(guān)鍵在于能否正確的使用細(xì)胞刷。根據(jù)TBS診斷標(biāo)準(zhǔn)而言，合格的婦科細(xì)胞學(xué)涂片上至少應(yīng)當(dāng)存在5000個(gè)以上的上皮細(xì)胞，而我們在日常工作中發(fā)現(xiàn)上皮細(xì)胞的數(shù)量取樣應(yīng)當(dāng)在20000～40000才能夠保證涂片的質(zhì)量，過高或過少的細(xì)胞數(shù)量都會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成一定的影響。在進(jìn)行取樣時(shí)應(yīng)當(dāng)用細(xì)胞刷放置于宮頸外口，在柱狀上皮和鱗狀上皮交界處進(jìn)行取樣，主要原因是因?yàn)榇颂幨菍m頸病變的好發(fā)點(diǎn)_[2，3]，用細(xì)胞刷順時(shí)針或逆時(shí)針同向旋轉(zhuǎn)3～5圈，力度適中，確保能夠取得足夠樣本的同時(shí)不會造成細(xì)胞變性或出血。

標(biāo)本的送檢

標(biāo)本取下之后應(yīng)當(dāng)詳細(xì)標(biāo)注患者姓名、性別、年齡以及取樣時(shí)間、部位等具體信息，大量的樣本集中放置時(shí)應(yīng)當(dāng)注意編號順序，防止造成標(biāo)本混亂，之后盡快送往檢驗(yàn)科進(jìn)行檢測。

標(biāo)本的轉(zhuǎn)移

標(biāo)本的轉(zhuǎn)移主要指的是將保存瓶中的標(biāo)本向試管中轉(zhuǎn)移，在轉(zhuǎn)移的過程中需要注意的是標(biāo)本瓶中的黏液很可能會將注射器口堵塞，從而導(dǎo)致標(biāo)本不能完全轉(zhuǎn)移，所以在實(shí)際操作中應(yīng)當(dāng)注意觀察，一旦發(fā)現(xiàn)需要將標(biāo)本過濾祛除黏液，以免造成實(shí)驗(yàn)偏差。

震蕩分層

震蕩分層主要是為了將轉(zhuǎn)移到試管中的標(biāo)本細(xì)胞盡可能的進(jìn)行分散，確保細(xì)胞不能聚集成團(tuán)，而達(dá)到薄層制片的目的，震蕩時(shí)間一般2～3分鐘即可，但是最少不應(yīng)超過2分鐘，防止細(xì)胞不能充分分離，大量的細(xì)胞積聚會對實(shí)驗(yàn)觀察造成影響。

離心

離心機(jī)在使用時(shí)應(yīng)當(dāng)將轉(zhuǎn)速控制在600～800r/分，在保持轉(zhuǎn)速的情況下分兩次進(jìn)行離心，第1次可控制在2～3分鐘中間，第2次一般10分鐘左右。

染色及封片

自動(dòng)染色時(shí)需要注意的地方在于在制片過程中密切觀察，一旦發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)問題應(yīng)當(dāng)及時(shí)進(jìn)行處理，操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，發(fā)現(xiàn)吸管出現(xiàn)堵塞情況時(shí)應(yīng)當(dāng)及時(shí)疏通，確保負(fù)壓管通暢的同時(shí)還應(yīng)當(dāng)防止負(fù)壓瓶中的液體滲出。在每天使用結(jié)束后應(yīng)當(dāng)對機(jī)器進(jìn)行沖洗和保養(yǎng)，防止血液或黏塊堵塞出口，每周或每個(gè)月進(jìn)行1次染色機(jī)的徹底清理并消毒；在封片時(shí)應(yīng)當(dāng)進(jìn)行濕封片，確保涂片不應(yīng)在空氣中過長時(shí)間的暴露，以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。此外，在進(jìn)行緩沖液的配置時(shí)應(yīng)當(dāng)注意控制pH值的準(zhǔn)確，以免對涂片造成影響從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)偏差。

討論

確保涂片的正確制作是保證液基細(xì)胞學(xué)檢測準(zhǔn)確的第1步，也是重要的一步，由于各種因素都會對制片的質(zhì)量造成影響，所以在進(jìn)行制片時(shí)應(yīng)當(dāng)注意觀察問題、發(fā)現(xiàn)問題并處理問題，一旦出現(xiàn)非正常現(xiàn)象的發(fā)生應(yīng)當(dāng)及時(shí)和診斷、技術(shù)人員進(jìn)行溝通，分析并查找出原因所在加以排除。總之，只有在工作中不斷的總結(jié)經(jīng)驗(yàn)不斷提高自身的技術(shù)水平，才能夠?qū)⒅破|(zhì)量保證在一個(gè)較好的水平，避免實(shí)驗(yàn)的偏差和失誤，為臨床診斷提供更加翔實(shí)、可靠的依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

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2黎大秀，黃春梅.4427例宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果分析[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥，2011，18（24）：89—90.

3蘇韻華，許丹.宮頸癌及癌前病變多種篩查方法的研究進(jìn)展[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2009，9（25）：529—530.