色木槭組織培養技術研究

李蘊峰，柴汝松，劉宇明

（黑龍江省森林植物園，黑龍江 哈爾濱150040）

色木槭（Acer mono Maxim.），又名五角槭、色木，為槭樹科槭樹屬，落葉喬木，樹勢優美，枝葉濃密，葉形秀麗，嫩葉紅色，入秋變成橙黃或紅色，花色清淡，翅果美麗，甚為美觀，是良好的園林綠化樹種，可孤植、片植、群植。耐陰性較好，可植于建筑物北側、西側或東側。在廠礦綠化中也能有較好的生長，可作為樹樁盆景材料［1］。色木槭主要是用種子來進行繁殖［2］，組織培養技術不受環境季節的影響和制約，可以解決種苗短缺的難題，實現集約化、工廠化的管理生產［3］。

1 材料與方法

1.1 材料的采集

試驗所用材料采于黑龍江省五常市鳳凰山，采后于4℃冰箱中保存、備用。

1.2 試驗方法

1.2.1 無菌材料的獲得 水培3～4d，腋芽生長有嫩莖，易操作，對外植體進行滅菌消毒實驗，用75%乙醇30s＋0.2%HgCl2溶液10min進行體表滅菌，無菌水沖洗6次后置于無菌水中備用。

1.2.2 基本培養基 采用 MS作為基本培養基，pH值5.8，蔗糖25g·L－1。外植體為長2～3cm的帶頂芽莖段，每瓶接種1個莖段，每組重復10瓶，4組重復試驗。莖段接種后培養30d時觀察生長狀況。

1.2.3 培養室的條件 培養室溫度為25℃，光/暗周期為14/10h，光照強度2 500～3 500lx。

1.2.4 培養基的選擇 啟動培養基：MS添加不同濃度的 NAA0.1、0.2、0.3mg·L－1，pH 值5.8，瓊脂0.7%，糖25g·L－1。增殖培養基：MS添加不同濃度的6－BA 2、3、4、5mg·L－1，pH 5.8，瓊脂0.7%，糖25g·L－1。

1.2.5 生根培養 培養基1/2MS添加0.1mg·L－1NAA，其中pH 5.8，瓊脂0.7%，糖20g·L－1。

1.3 統計分析

用Excel 2003軟件進行數據處理。

計算公式如下：

莖段增殖系數＝增殖出新芽苗的莖段總數/接種的莖段總數

生根率（%）＝生根的苗數×100/用于生根培養的總苗數

成活率（%）＝成活苗株數×100/煉苗總數

2 結果與分析

2.1 不同滅菌時間對莖芽萌發和莖芽生長的影響

色木槭由于木質含糖，這是其莖段滅菌成功率低的重要原因。外植體滅菌時間對外植體影響很大。在組培試驗中，莖段的滅菌最佳滅菌劑是HgCl2，但滅菌時間過長也會對材料本身具有殺傷作用，影響成活率。

表1 0.2%HgCl2不同滅菌時間對色木槭莖芽生長的影響

從表1中可以看出，當0.2%升汞滅菌時間為12min時，色木槭莖芽成活率最高，所以選擇12 min為色木槭莖芽最佳滅菌時間。

2.2 植物生長調節劑對莖芽生長和增殖的影響

植物生長調節劑可以調節植物的生長發育進程、分化方向和器官發生［4，5］，而不同植物生長調節劑結合使用時，濃度的相對比例要在一定的范圍內才能夠對器官發生起到明顯的誘導增殖作用［6，7］。在色木槭的啟動培養中，當NAA濃度為0.2mg·L－1時，莖芽成活率最高，見表2。

表2 不同濃度的NAA對色木槭莖芽生長的影響

使用6－BA對色木槭增殖培養時發現，隨著6－BA濃度升高，莖芽增殖系數先增大后減小，當6－BA為3.0mg·L－1時，增殖系數最大，為5.0，見表3。

表3 不同濃度6－BA對色木槭莖芽增殖的影響

2.3 生根培養

以1/2MS為基本培養基，取培養后健壯的芽苗，接種到含有0.1mg·L－1NAA的培養基上進行生根培養。在培養瓶內生根培養30d后，將株高2 cm以上、根系發達、葉片展開2～4片的健壯幼苗在培養室內將培養瓶敞口煉苗5～7d，然后用水將根系附著的培養基洗凈，移植到營養基質中，將基質澆透水并用塑料薄膜覆蓋容器口，于溫室內培養，培養期間保持較高的濕度。10d左右待葉片變為深綠色，逐漸把保鮮膜移除，將再生植株移栽到溫室的花盆中。

3 結論

外植體滅菌時間對外植體影響很大。在組培試驗中，莖段的滅菌最佳滅菌劑是HgCl2，12min為色木槭莖芽最佳滅菌時間。

在色木槭的組織培養中，當NAA濃度為0.2 mg·L－1時，莖芽成活率最高。

使用6－BA對色木槭增殖培養時發現，隨著6－BA濃度升高，莖芽增殖系數先增大后減小，當6－BA為3.0mg·L－1時，增殖系數最大，為5.0。

以1/2MS為基本培養基，取培養后健壯的芽苗，接種到含有0.1mg·L－1NAA的培養基上進行生根培養，可以建立色木槭組織培養體系。

［1］卜亞玲.槭樹的造景特色［J］.湖南林業，2008（2）：28

［2］胡興無，楊淑玲，李殿波.色木槭綠化用大規格苗木的培育［J］.特種經濟動植物，2008（7）：23－24

［3］胡海波，黃丹，許岳香.木犀科植物組織培養研究綜述［J］.林業科技開發，2009，23（3）：5－8

［4］鞏振輝，申書興.植物組織培養［M］.北京：化學工業出版社，2007

［5］Pradeep C，Robert M，Mary T，et al.Somatic embryogenesis，organogenesis and plant regeneration in taro（Colocasia esculenta var.esculenta）［J］.Plant Cell Tiss Organ Cult，2009，99：61－71

［6］張紅曉，康向陽，沈燕，等.白刺組培快繁的研究［J］.經濟林研究，2003，21（4）：60－63

［7］李小川，張華通，周麗華，等.迷迭香帶芽莖段的組織培養技術［J］.經濟林研究，2006，24（3）：15－20