康愛梅,周 欣,胡 惠,仇正英
(1.武漢亞洲心臟病醫院,2.華中農業大學動物醫學院,武漢 430022)
動物醫學實驗的質量關系人類健康和安全。尤其在外科手術動物模型的操作中,實踐中遇到的問題和采取的對策都可能對后期工作起到指導作用。2011年起我院心外科與華中農業大學動物醫學院合作實施10例山羊植入式左心室輔助裝置(LVAD)手術,實驗過程遵循實驗動物管理法規和倫理準則,針對手術動物的特性,制定了圍手術期環境控制和術后特殊維護的管理措施,有效提升實驗質量和效率,減少工作失誤,穩定手術實驗的成功率。
動物手術實驗室占地面積300 m2。手術區實行潔污線管理:區域劃分明確,嚴格按照“三區二通道”的原則布局,即手術區、準備區、輔助區(更衣室和刷手間)、兩條潔凈走道。內走廊為手術人員、無菌敷料、器械的通道。外走廊,為實驗動物、手術后器械、敷料的運行通道[1]。重癥監護室在手術區旁,便于實驗動物轉運與監護。
由于實驗手術室利用度低于日常手術室,備用周期長。為了避免實驗動物術后感染,對術前手術室清潔、消毒和物品管理的要求更為嚴謹、細致:①動物實驗前兩日,手術室內進行濕式清掃,用含氯消毒劑擦拭無影燈、手術臺及室內所有物品。②術前1日,用臭氧消毒滅菌器對手術室進行密封式消毒。③手術當日,用循環風紫外線進行空氣消毒。④及時記錄紫外線消毒日期和持續時間,便于更換到期的紫外線燈管。⑤使用的清潔工具不宜用掉纖維的織物材料制作,拖把是細菌的滋生源和傳播細菌的載體,故不得“三區”混用。應在拖把上做明顯標志,在每次使用后,用流動的水反復沖洗,并用消毒液浸泡30min后懸掛于通風干燥處[1]。⑥手術室的無菌物品、一次性用品及藥品進行分類,把必要與非必要的物品區分開來,把非必要物品及時退出手術區,將必要物品的儲存數量降到最適當程度[2]。手術室設備和必要物品做好分類,固定放置的位置并好做標記、術前按數量進行核查。以便于查缺補漏,避免一次性用品或藥品擠壓過期,也提高設備利用率降低投入成本。⑦因醫療垃圾含有大量的病菌和病毒,處理不當不僅會給環境帶來嚴重污染,威脅人類健康[3]。因此嚴格按照醫療廢棄物的管理,將實驗垃圾分類放置、分類處理。
山羊動物重癥監護室是術后裝置運行與觀察的重要實施地點,需要有足夠的空間便于實驗動物的轉運與籠欄的放置。重癥監護室配備有心電監護儀、微量注射泵、ACT監測儀、血氣、血糖和血常規監測儀,安裝空調、監控攝像和遠程監控系統。
溫度、濕度是動物體熱平衡的重要因素之一,過低或過高,不僅會使動物感到不舒適,同時也影響動物的代謝[4]。手術室和重癥監護室均配裝5匹柜機空調,根據室內溫濕度表調節溫濕度,保證溫度維持在12~24℃,濕度維持在40% ~70%。
光照強度和光照周期也可影響動物的生理和行為。監護室安裝設備先進的紅外線攝像系統。術后看護實驗動物時,白天采用自然光源,晚上利用紅外線攝像,盡量避免強光對動物的照射。工作人員通過攝像系統實時觀察和記錄術后動物的情況,以保證動物實驗結果的科學性、可靠性和可重復性。
山羊屬反芻動物,在注意力分散的情況下不能很好的反芻,影響營養吸收與利用,所以醫護人員和工作者在操作過程中要做到四輕(說話輕、操作輕、關門輕、走路輕),人員有序輪替,盡量避免嘈雜及儀器轉運時發出的尖銳金屬音。
左心輔助裝置(LVAD)手術實驗配備有管理人員3名,執業獸醫人員7名,心臟外科手術人員3名、心臟重癥監護醫護人員4名、體外循環和麻醉師7名、設備控制人員1名、檢驗科人員1名。實驗配備管理人員主要負責實驗的日常工作管理;執業獸醫人員控制實驗動物的疾病防治、飼養和術后的護理工作。重癥監護人員負責動物手術后的監護工作。執業獸醫人員需持有資格證書,其他工作人員需認真學習國家和相關部門頒發的有關實驗動物的法規,如實驗動物管理條例、實驗動物國家標準等[4]。
參與人員應提高對動物實驗的重視度,培養良好工作習慣,完善工作內容,協調合作,自發性維護術中秩序,遵守管理條例與制度,加強討論和交流,提高隊伍專業素質的穩定性。
實驗選用健康波爾系雜交山羊,術前做好驅蟲和環境熟悉訓練工作,適度草場運動,標準日糧飼喂,自由飲水。
術后山羊采食量會下降,應及時通過靜脈補充山羊能量損耗;早期飼喂適口且易于消化的青飼,以增強山羊的食欲。促進其消化道蠕動,降低瘤胃鼓氣的風險和腸道阻塞癥狀的發生以提高消化率;實驗動物飲水來自生活飲用水,符合動物飼喂衛生標準。
山羊在術后可以很快恢復意識,甚至可以自行站立,但術后山羊體外連接多種監護補液導管,儀器連接也需要保護,山羊需要一定的限動措施。我院自主設計可拆卸組合式動物轉運監護床(申請國家專利號:201210042605.8)。該飼養床由主體床、側欄、手搖式升降柄、車輪和輸液架組成。該床制作材質光滑,不傷及動物,易于清理和消毒;四周安裝了可折疊圍欄并配有手搖式升降柄,便于適時調節圈欄的高度,簡化了動物手術的轉運和監護程序、避免實驗動物因手術后多次搬運造成的痛苦、達到一定的限動目的[5]、保證了動物胸腔引流管的通暢;監護飼養床四周均設有輸液掛鉤,便于輸液使用;動物實驗結束后,拆卸存放節省室內空間。
新的《實驗動物管理條例》出臺后,人們越來越關注“動物福利”,實驗手術動物是人類的替難者,應該人道地管理和使用實驗動物。根據動物實驗管理制度和動物實驗福利倫理要求,慎重對待每次動物實驗。實驗前參與人員反復討論,嚴謹地設計麻醉和手術方案。術前實驗動物(山羊)需備皮和禁食12 h,安排專人對動物進行監護,根據山羊的生命體征和血檢結果及時做好保暖和補液工作。術中安排有經驗的心臟外科專家和專職獸醫參與麻醉、手術,減輕實驗動物因術者對其解剖結構的不熟悉所導致的不必要痛苦,保證動物實驗的成功率。術后安排專職獸醫人員和心臟重癥監護醫護人員共同看護實驗動物,幫助動物維護正常的血流動力學并積極進行止痛、抗感染等處理,以期減輕動物的痛苦。實驗動物死亡后尸體裝入專用尸體袋中并在指定場地進行焚燒。
實驗過程中根據每次的實驗結果不斷改良儀器設備,以保證實驗的順利開展。該項實驗中“人工心臟泵”植入實驗山羊體內時,需要在山羊心尖部打孔,心尖部打孔的操作要求極高,如不慎會出現心尖部大出血致動物死亡。為了避免大出血的并發癥,我們自行研制螺旋式心肌打孔器,術中打孔器成螺旋式慢慢旋轉在心尖部打孔,術中心肌出血較少,利于動物的術后恢復。
2011年11月起用于山羊植入式左心輔助裝置手術10例,其中前3例為預實驗,實驗過程依照管理措施得以改進。其余7例手術,左心輔助裝置成功安裝,術后有3例實驗山羊存活48 h以上。實驗期間,人員協調合作,手術順利進行,動物轉運順暢,術后監護數據采集與計劃無異,管理措施安全可行。
我國人工心臟研發剛剛起步,山羊植入式LVAD手術中遇到的問題和采取的對策對后期工作起到指導作用。在實驗過程中的管理工作還有待進一步提升,總結每次的實驗手術過程存在的問題,不斷地完善和改進是每個工作人員該有的態度,從而提升工作效率,減少工作失誤。
[1]翟青新,黃麗潔,哈惠馨,等.動物潔凈手術室的維護與管理[J].實驗動物科學與管理,2007,24(2):43 -44.
[2]鄧麗,李曉玲,劉美燕,手術室管理中應用“五常法”的探討[J].實用全科醫學,2007,5(6):556.
[3]胡少芬,馬紅寶.醫療廢棄物管理分析與探討[J].中華現代醫院管理雜志,2005,3(4):356-357.
[4]王寧,王蕭,王金林,等,基于動物福利的實驗動物管理[J].動物醫學進展,2010,31(12):148-151.
[5]陶涼.可拆卸式山羊轉運和監護飼養床.中國國家發明專利,專利號:201210042605.8 專批準利時間:2012.2.24.