HER-2、EGFR及P16在宮頸鱗癌中的表達及臨床意義

王亞萍 鄒 娜 于 水 陳 琦 劉 微

大連市婦產醫院病理科，遼寧大連 116033

子宮頸癌是女性生殖系統最常見的惡性腫瘤之一，近年來發病趨于年輕化，5年總體生存率約在52%左右，其發生發展的過程復雜并伴有多因素的參與。本文利用免疫組化檢測技術觀察宮頸鱗癌中人表皮生長因子受體2（HER-2）、表皮生長因子受體（EGFR）及 P16基因的表達情況，以探討其與宮頸癌發生、發展、浸潤與轉移的關系及其在判斷預后和臨床治療方面的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2010年4月～2012年10月期間宮頸鱗癌住院手術患者30例，年齡40～69歲，平均48.5歲。按照國際婦產科聯盟（FIGO）2000年的分期標準：Ⅰ期10例，Ⅱ期8例，Ⅲ期12例；組織學分級：Ⅰ級及Ⅱ級共8例，Ⅲ級22例；有淋巴結轉移12例，無淋巴結轉移18例；有脈管浸潤者16例，無脈管浸潤14例；浸潤深度≤1/2者10例，＞1/2者20例；另選取正常人15例（年齡31～55歲，平均42.8歲）宮頸組織為對照。患者術前均未進行化療、放療、免疫治療及激素等治療。

1.2 主要試劑

即用型鼠抗人HER-2、EGFR和P16單克隆抗體及SP試劑盒均購自福州邁新生物技術開發公司。

1.3 方法

上述標本均經中性福爾馬林固定、常規石蠟包埋，制成4 μm切片。采用免疫組化S-P法進行染色，按試劑盒說明方法操作。用已知陽性的切片做陽性對照，用磷酸鹽緩沖液（PBS）分別代替一抗做陰性對照。

1.4 結果判定

HER-2、EGFR及P16陽性均為淺黃色或棕黃褐色顆粒，其中HER-2定位于細胞膜；EGFR定位于細胞膜和細胞質；P16定位于細胞核。（1）EGFR和HEr-2陽性判斷為腫瘤細胞無棕黃色染色或僅少于10%腫瘤細胞呈較弱棕級，>10%腫瘤細胞呈較弱～中等棕黃色染色為2級，>10%腫瘤細胞呈高棕黃色染色為 3級[1]；（2）P16，陽性細胞數<10%為0級，10%～25%為1級，26%～50%為2級，>50%為3級。

1.5 統計學方法

采用SPSS 13.0統計軟件進行χ2檢驗和相關性分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HER-2、EGFR和P16蛋白的表達

本研究中宮頸鱗癌HER-2、EGFR和P16蛋白的陽性表達率分別為66.67%、60.00%和73.33%，而正常宮頸組織中這三者均無表達，兩者差異有統計學意義（P＜0.01），見表1。

2.2 HER-2、EGFR及P16的表達與臨床病理參數的關系

本研究中顯示宮頸鱗癌HER-2的表達與組織學分級和淋巴結轉移相關，EGFR的表達與淋巴結轉移密切相關，P16表達與組織學分級及浸潤深度相關，這三者都與臨床分期和脈管浸潤無關。具體見表2。

2.3 HER-2、EGFR和P16蛋白之間的相關性

通過Spearman等級相關分析發現HER-2的表達和EGFR 的表達呈正相關（r=0.6000，P=0.0201），而 HER-2和 P16 （r=0.4667，P=0.1709） 以及 EGFR 和 P16 （r=0.0667，P=0.7921）之間無相關性。

3 討論

宮頸癌的發生、發展、浸潤及轉移等是比較復雜的過程，除了目前已研究明確的人乳頭瘤病毒（HPV）感染是主要的致病因素以外，還有一些癌基因、抑癌基因以及生長因子受體等參與其中。

HER-2基因定位于人染色體17q21，編碼具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白，能促進腫瘤形成新生血管，抑制細胞凋亡，增強腫瘤細胞的侵襲破壞作用。HER-2基因在正常組織中表達較低，而在惡性腫瘤中有著程度不同的高表達。在其陽性表達中，盆腔淋巴結轉移率高于陰性，故與淋巴結的轉移及預后有關[2]。本研究中HER-2在正常宮頸組織中沒有表達，而在宮頸鱗癌中的表達率為66.67%，與魏芳等[3]報道的表達率為69%比較接近，本次實驗中顯示宮頸鱗癌HER-2的表達與組織學分級和淋巴結轉移相關，故HER-2陽性表達的腫瘤可能具有更強的增殖活性及侵襲性，可以以此作為預測患者預后的一個指標，過度表達提示預后不良。

表皮生長因子受體（EGFR）廣泛存在于上皮細胞的細胞膜及細胞質，是一種跨膜糖蛋白受體。EGFR具有蛋白激酶活性及受體自身磷酸化功能，參與細胞信號的傳遞，該受體的持續激活可導致細胞不斷生長、分裂，可能是導致細胞惡變的因素之一[4]。EGFR在許多腫瘤中呈現高表達，例如食管癌、內膜癌[5-6]，EGFR高表達具有抑制凋亡和促進腫瘤內血管增生的作用，因此能夠促進腫瘤發生、轉移和侵襲[7]。本實驗中正常宮頸組織中無EGFR的表達，而在鱗癌中表達為60%，略低于于曉紅等[8]報道的69.53%，且與淋巴結轉移密切相關，但與臨床分期及組織學分級無關。此結果提示EGFR在宮頸鱗癌的發生發展和轉移浸潤中發揮一定的作用，測定腫瘤組織中EGFR的表達可以作為判斷預后的一個指標。

抑癌基因P16通過控制腫瘤抑制蛋白pRb的活性在細胞周期起到抑制細胞分化的關鍵作用，使細胞停止于G1期。當P16基因發生突變時，致使細胞異常增生。本次實驗結果提示P16在正常宮頸組織中沒有表達，而在鱗癌組織中的表達與組織學分級及浸潤深度相關，腫瘤組織分化越低，浸潤越深，則表達越強。這與有些作者報道P16陽性表達與宮頸腫瘤的細胞分化程度有關，細胞分化好的表達明顯低于分化差的結果基本一致[9]。因此推測抑癌基因P16突變在腫瘤的發生發展及浸潤過程中具有一定的作用。

HER-2可與EGFR受體形成異源二聚體，從而使得EGFR過度表達[10]，預示HER-2與EGFR之間存在著某些聯系。近年來，也有研究顯示，在宮頸鱗癌中HER-2與EGFR的聯合表達預示患者的預后較差，無瘤生存期及無盆腔擴散生存期將縮短，即便同時輔以放化療效果也不佳[11]。本研究中HER-2與EGFR的表達呈正相關，與夏紅強等[12]報道在乳腺癌中兩者表達呈負相關不同，這表明HER-2與EGFR之間具有復雜密切的關系，兩者的聯合過度表達對宮頸鱗癌的進展可能起到協同作用。

惡性腫瘤的發生、發展是一個多因素、多基因共同參與的過程，探討HER-2、EGFR及P16在宮頸癌的發生、發展及浸潤等方面的作用及相互關系對于腫瘤的診斷、治療和預后判斷具有重要的臨床意義，并將為分子靶向藥物治療及放化療相結合的綜合療法提供參考和幫助。

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