馬齒莧提取液抗磷酸組胺致大鼠足癢閾實驗研究

胡一梅 鐘振東

1.成都中醫藥大學臨床醫學院，四川 成都 610075;2.四川省醫學科學院·四川省人民醫院，四川 成都 610072

急性濕疹是臨床常見的皮膚病，發病率高，因其常伴有瘙癢癥狀，所以嚴重影響患者生活質量。在西藥的外用品中，主要集中在激素和抗組胺類藥物的對癥治療，但急性濕疹的發病機制復雜，加上這類藥物反復使用的副作用較明顯，如何合理有效的控制瘙癢成為目前臨床主要用藥思路和和研究方向，而研究療效肯定且副作用較小的中醫藥的外用藥品的研發就成為了臨床的迫切需求。

臨床上使用馬齒莧提取液治療急慢性濕疹收到顯著療效，副作用少，值得臨床推廣應用［1］，但我們必須對馬齒莧提取物的作用機制有足夠的認識，才能夠更好的應用于臨床。本實驗采用大鼠磷酸組胺致癢法，觀察馬齒莧提取液對大鼠足癢閾的影響，探討馬齒莧提取液對急性濕疹的止癢作用，并為進一步藥學研究提供部分實驗依據。

1 實驗材料

1.1 實驗動物 SD大鼠，SPF級，♂，體重180～220g，由成都達碩生物科技有限公司提供，實驗動物合格證號: scxk(111)2008－24。

實驗動物按4只/籠飼養于四川省醫學科學院·四川省人民醫院屏障級實驗動物實驗室，獨立通氣籠具 (Inde-Pendent Ventilative Cage，IVC)系統內。該IVC系統的使用許可證號:109(2006年核發，使用期5年)。飼養溫度: 22±1℃，濕度:59% ～61%，每天光照與黑暗時間各為12h。所用籠具、飼料、墊料、飲水均高壓滅菌 (15磅、20min)。實驗期間的灌胃、換水、添加飼料等操作均在超凈工作臺內進行，由專人管理。

1.2 受試藥物 ▲馬齒莧提取液:新鮮馬齒莧莖葉約500g，用自來水洗凈泥沙及雜草，再用蒸餾水浸泡沖洗3次，每次5min;取出放置于消毒過的手術隔離單上晾干;放于消毒柜內，用巴氏低溫消毒法消毒 45min;榨汁機用75% 酒精消毒后，用蒸餾水反復沖洗3次;將新鮮馬齒莧約500g，放于榨汁機內榨取約400mL新鮮馬齒莧粗汁;用無菌紗布5層過濾，獲得淺綠色馬齒莧提取液，盛放在消毒處理的玻璃瓶內，置于7℃保存。

▲組胺磷酸鹽:批號F20080505，國藥集團化學試劑有限公司

▲陽性藥:復方黃柏液，功能主治:神經性皮炎、接觸性皮炎、慢性濕疹等。用法用量:外用，一日1～2次，取少量涂于患處，輕柔片刻。江西康瑞堂實業有限公司生產，生產批號:WS3－517(Z－076)－2002(Z)。［2］

2 實驗方法

2.1 實驗分組 取大鼠50只，隨機分為5組即正常對照組，陽性對照組，馬齒莧低劑量組、中劑量組、高劑量組。把臨床成人用藥劑量的1、2、4倍分別按“人和動物間按體表面積折算的等效劑量比率表”折算成大鼠用量的高、中、低三個劑量組。成人的體重按70kg，人用臨床劑量為每日生藥1.4mg/kg計算。馬齒莧提取物高 (4倍等效量)、中(2倍等效量)、低(等效量)3個劑量組。故低劑量組給藥 0.008mg/kg，中劑量為 0.016mg/kg，高劑量為0.032mg/kg。

2.2 造模、給藥 各組按規定的劑量外用給藥，正常對照組組給予等量的蒸餾水，每組都外用相應藥物一次，0.lml/足，每天二次，連續三天。實驗當日，用O號砂紙擦傷大鼠剃毛處，擦任程度以損傷表皮、不傷真皮、皮膚輕度滲血為度，面積約1cm2，局部再涂各組相應藥物1次，末次涂藥后 10min，開始于創面處滴 0.01%磷酸組胺每只0.05mL，此后每隔 3min依 0.01%，0.02%，0.03%，0.04%…濃度遞增，每次均為每只0.05mL，每一濃度滴加后觀察3min內大鼠是否回頭舔右后足背，如未出現舔右后足背現象，則繼續滴加下一較高濃度磷酸組胺溶液，直至出現舔右后足背現象為止，以此時所給子的磷酸組胺總量為致癢閾，若磷酸組胺溶液濃度提高到0.3%時大鼠仍未出現舔右后足背反應則不再增加濃度，按此時磷酸組胺總量計算致癢閡［3］。

2.3 觀察指標 觀察并記錄各組大鼠回頭舔足時所予以的磷酸組胺不同濃度的滴數及磷酸組胺的總量。

3 統計方法

實驗數據用SPSS18.0統計軟件進行統計分析。計量數據均用(±s)表示，組間比較用t檢驗;計數資料用χ2檢驗。

4 結果

由表1可知，與空白對照組比較，馬齒莧提取物高、中劑量組大鼠致癢閾均有極顯著增大 (P＜0.01)，低劑量組有顯著增大 (P＜0.05)，表明馬齒莧具有顯著止癢作用。

表1 藥物對大鼠致癢閾的影響 (±s，n=10)

表1 藥物對大鼠致癢閾的影響 (±s，n=10)

與正常對照組比較，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;與陽性對照組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

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5 討論

急性濕疹的發病是一個急性過程，可發生于身體任部位，全身泛發或局限于一處，常對稱分布。皮疹呈多形性，集成片狀，邊界不清。病處輕度腫脹，紅斑，丘疹，水皰，瘙癢明顯，因搔抓常引起糜爛結痂等，滲出明顯。有部分研究表明［4］，皮膚局限性瘙癢是由多種因素相互作用的結果，許多炎性介質和特異的神經傳導通路參與瘙癢的發生，因此，局部抗炎與神經傳導調控對治療局限性皮膚瘙癢有積極作用。

《本草拾遺》中描述馬齒莧有“諸腫揍疣目，搗揩之;破壬癇，止消渴。”之功效，即清熱解毒，散血消腫。陸霄鶴［5］等人也曾報道，灌胃給予10，20g/kg馬齒莧水提取物可明顯抑制二甲苯所致小鼠耳廓腫脹，20g/kg馬齒莧水提取物可抑制巴豆油所致小鼠耳廓腫脹，提示馬齒莧水提取物可有效抑制二甲苯及巴豆油所致小鼠耳廓腫脹，具有消炎作用。現代藥理分析，馬齒莧含有去甲腎上腺素，與血管內皮α受體結合，使血管收縮，血流量減少，從而減少動脈性充血，靜脈血管顯著收縮可使血管外周阻力增加，亦可減輕瘀血，抑制毛細血管通透性，從而抑制炎性腫脹［6］。這些報道部分證明了馬齒莧提取物可以有效治療急性濕疹的機理。

本實驗結果表明，馬齒莧提取液具有顯著的止癢作用。因此，我們推測其止癢作用機理可能就是通過抗炎、抗過敏作用而起到調節神經傳導通路的作用。目前大量急性濕疹的止癢作用研究是針對馬齒莧溶液的臨床試驗展開，我們的下一步實驗將會從細胞學角度來探討其止癢的機制，從藥理學角度出發，將其與抗過敏機制進行研究及論述。

［1］胡一梅.鮮馬齒莧治療急性濕疹40例［J］.中醫雜志，2012，53 (18):1592－1593.

［2］馮桂英，李子英.黃柏洗劑外用治療濕疹及護理［J］.中國民間療法，2007，15(12).

［3］王彥禮，包旭宏，王怡薇.青鵬膏劑對大鼠瘙癢及濕疹模型的影響［J］.中國實驗方劑學雜志，2011，17(14):233－236.

［4］尹斌，周光.華佗外敷麻藥神方加減方對磷酸組胺大鼠致癢閾的影響研究［J］.新疆中醫藥，2011，29(1):14－15.

［5］陸霄鶴等.馬齒莧及魚腥草水提取液體外抑菌實驗［J］.抗感染藥學，2010，7(1).

［6］范紅艷，關麗萍，張紅英.馬齒莧水提取物對小鼠急性炎癥的影響［J］.延邊大學醫學學報，2006，29(3).