通脈降脂丸對(duì)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)糖尿病模型小鼠糖、脂代謝的影響

柳 堯何曉山劉學(xué)蘭孔德婭曾科學(xué)

1.云南省中醫(yī)醫(yī)院內(nèi)分泌科，云南 昆明 650021；2.云南中醫(yī)學(xué)院藥理教研室，云南 昆明 650011；3.云南中醫(yī)學(xué)院2009級(jí)藥學(xué)本科，云南 昆明 650021；4.廣東省第二中醫(yī)院康復(fù)科，廣東 廣州 510095

通脈降脂丸對(duì)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)糖尿病模型小鼠糖、脂代謝的影響

柳 堯1何曉山2劉學(xué)蘭1孔德婭3曾科學(xué)4

1.云南省中醫(yī)醫(yī)院內(nèi)分泌科，云南 昆明 650021；2.云南中醫(yī)學(xué)院藥理教研室，云南 昆明 650011；3.云南中醫(yī)學(xué)院2009級(jí)藥學(xué)本科，云南 昆明 650021；4.廣東省第二中醫(yī)院康復(fù)科，廣東 廣州 510095

目的：研究通脈降脂丸對(duì)糖尿病昆明小鼠空腹血糖及血脂的影響。方法：采用鏈脲佐菌素腹腔注射致大鼠糖尿病模型，觀察小鼠血脂的變化；采用灌胃方法給予通脈降脂丸，并觀察糖尿病小鼠模型分別給予生理鹽水、通脈降脂丸的空腹血糖及血脂的變化。結(jié)果：鏈脲佐菌素腹腔注射成功制成糖尿病模型；通脈降脂丸高、中、低劑量對(duì)糖尿病小鼠的空腹血糖均無(wú)明顯降低作用（P＞0.05），但高劑量組對(duì)糖尿病小鼠的空腹血糖有一定的降低趨勢(shì)；降通脈降脂丸高劑量組均能顯著降低血清TC與TG的含量（P＜0.05）；中劑量組能顯著降低血清中TC的含量（P＜0.05）；低劑量組作用不明顯。結(jié)論：通脈降脂丸有明顯的降脂作用，為防治糖尿病提供有效的藥理學(xué)依據(jù)。

通脈降脂丸；血脂；血糖；鏈脲佐菌素；糖尿病

復(fù)方制劑 “通脈降脂丸”是我科老專家?guī)资暝谂R床觀察中摸索、總結(jié)、并采用現(xiàn)代工藝制成的院內(nèi)純中藥制劑，已在臨床治療高脂血癥數(shù)千例，取得了較為滿意的臨床療效。隨著臨床上深入廣泛的應(yīng)用，觀察到其在治療糖尿病合并高脂血癥［1］的臨床研究中收到良好的臨床效果，具有一定降低血糖趨勢(shì)、有效的降低血脂，尤其是降低甘油三脂的作用，且具有一定的遠(yuǎn)期療效而且未見(jiàn)明顯不良反應(yīng)，但其對(duì)糖尿病糖脂代謝的具體影響尚未報(bào)道。本研究通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀察通脈降脂丸對(duì)鏈脲佐菌素誘導(dǎo)糖尿病大鼠空腹血糖、血清膽固醇、甘油三酯含量的影響，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雄性昆明小鼠，SPF級(jí)，體質(zhì)量20～25g，由成都達(dá)碩生物科技有限公司提供。動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（川）2008－24，合格證號(hào)：0012585。

1.2 藥品及試劑 受試藥物：通脈降脂丸，由云南省中醫(yī)醫(yī)院提供，批號(hào)：201111106，用生理鹽水制成混懸液置冰箱冷藏備用。陽(yáng)性對(duì)照藥物：鹽酸二甲雙胍片，上海衡山藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)為20111016；非諾貝特片，由德國(guó)拜耳公司生產(chǎn)，批號(hào)：1203159。鏈脲佐菌素（streptozocin，STZ）：由Sigma公司生產(chǎn)，批號(hào)：10122283，用pH值為4.4的0.1M的枸櫞酸鈉緩沖液配制成1%的溶液，置于4～8℃的冰箱備用。血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量測(cè)定試劑盒由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)，批號(hào)分別為：1201223、1109128。

1.3 儀器 One Touch Ultra血糖測(cè)定儀，購(gòu)于強(qiáng)生醫(yī)療器材有限公司；電子天平（型號(hào)：FA2204），購(gòu)于上海方瑞儀器有限公司。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 糖尿病模型的制備 80只小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3d后，隨機(jī)抽取10只小鼠作為正常對(duì)照組。其余小鼠用于復(fù)制糖尿病模型，禁食不禁水12h后，尾靜脈注射鏈脲佐菌素枸櫞酸磷酸緩沖液150mg/kg，于注射5d后小鼠尾靜脈取血測(cè)空腹血糖，小鼠血糖值不低于11.1 mmol/L者作為造模成功的標(biāo)準(zhǔn)。70只造模小鼠中有13只造模失敗，其余均成功。

2.2 分組和給藥 造模成功的小鼠共57只，抽取其中50只隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為生理鹽水組，二甲雙胍組（0.16g/kg/bw，灌胃給藥），通脈降脂丸低、中、高劑量組（0.835g/kg/bw，1.67g/kg/bw，3.34g/kg/bw，給藥容量均為10m l/kg，灌胃給藥）。正常對(duì)照組及糖尿病模型生理鹽水組均灌胃給予10ml/kg生理鹽水，連續(xù)給藥3周，實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物自由攝食。

2.3 檢測(cè)指標(biāo) 給藥至第7、14、21d時(shí)，禁食12h，取尾部靜脈血測(cè)量空腹血糖；給藥21d后，禁食12h，腹腔注射10%水合氯醛400m l/kg麻醉，心臟采血，分離血清，測(cè)定血清總膽固醇（TC）及甘油三酯（TG）。TC及TG的測(cè)定分別按測(cè)定盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，于自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 通脈降脂丸對(duì)糖尿病小鼠空腹血糖的影響 與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠空腹血糖明顯升高（P＜0.01）；與模型組比較，通脈降脂丸高、中、低劑量對(duì)糖尿病小鼠的空腹血糖均無(wú)明顯降低作用（P＞0.05），但高劑量組對(duì)糖尿病小鼠的空腹血糖有一定的降低趨勢(shì)，見(jiàn)表1。3.2 通脈降脂丸對(duì)糖尿病小鼠血清膽固醇、甘油三酯含量的影響 與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠血清中TC、TG含量均明顯升高（P＜0.05）；與模型組比較，通脈降脂丸高劑量組均能顯著降低血清TC與TG的含量（P＜0.05）；中劑量組能顯著降低血清中TC的含量（P＜0.05）；低劑量組作用不明顯，見(jiàn)表2。

表1 通脈降脂丸對(duì)糖尿病小鼠空腹血糖的影響（±s，10）

表1 通脈降脂丸對(duì)糖尿病小鼠空腹血糖的影響（±s，10）

注：與正常對(duì)照組比較，aP＜0.01；與生理鹽水組比較，bP＜0.05。

組別 劑量（g/kg）血糖濃度第0天 第7天 第14天 第21天－ 6.3±2.2 6.4±1.7 6.2±2.1 6.5±2.0生理鹽水 － 15.2±1.8a16.3±2.4a15.7±2.6a13.2±2.2a二甲雙胍 0.160 16.7±2.4 12.1±2.7b11.5±2.0b8.3±2.5b通脈降脂丸低 0.835 15.8±2.5 15.1±2.3 14.2±2.9 12.3±1.8通脈降脂丸中 1.670 15.3±2.5 15.2±1.9 13.8±2.1 12.1±2.2通脈降脂丸高正常3.340 16.5±1.5 15.8±2.2 13.2±2.6 11.3±2.8

表2 通脈降脂丸對(duì)糖尿病小鼠血清中TC及TG含量的影響（±s，10）

表2 通脈降脂丸對(duì)糖尿病小鼠血清中TC及TG含量的影響（±s，10）

注：與正常對(duì)照組比較，aP＜0.05；與生理鹽水組比較，bP＜0.05，cP＜0.01。

組別 劑量（g/kg）TC（mmol/L）TG（mmol/L）3.1±0.2 0.9±0.1生理鹽水 － 5.9±0.3a 2.7±0.2a非諾貝特 0.120 3.5±0.5c 1.2±0.4b通脈降脂丸低 0.835 5.5±0.7 2.2±0.6通脈降脂丸中 1.670 4.5±0.3b 1.9±0.3通脈降脂丸高 3.340 3.6±0.6b 1.1±0.1正常 －b

4 討論

糖尿病是由于遺傳或環(huán)境因素相互作用，胰島素相對(duì)或絕對(duì)缺乏以及靶組織對(duì)胰島素敏感性降低引起的代謝綜合征，是以高血糖為特征常伴有血脂異常的全身代謝性疾病，又有 “糖脂病”之稱，其發(fā)病近年來(lái)有增高的趨勢(shì)。在我國(guó)，糖尿病患者正以驚人的速度增加，嚴(yán)重者將發(fā)展為糖尿病合并冠心病。在大多數(shù)糖尿病并發(fā)癥中，大血管并發(fā)癥的危險(xiǎn)因素中血脂代謝異常起核心作用，所以關(guān)注糖尿病并發(fā)高脂血癥尤為重要。

在中醫(yī)理論中，消渴病（糖尿病）是中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的病名，是指以多飲、多尿、多食及消瘦、疲勞、尿甜為主要特征的綜合癥狀。若做化驗(yàn)檢查其主要特征為高血糖及糖尿。病位主要在肺、脾、腎，基本病機(jī)為陰津虧耗，燥熱偏盛。消渴日久，病情失控，則陰損及陽(yáng)，熱灼津虧血瘀，而致氣陰兩傷，陰陽(yáng)俱虛，經(jīng)脈瘀阻，經(jīng)脈失養(yǎng)，氣血逆亂，臟腑器官受損而出現(xiàn)癤、癰、眩暈、胸痹、耳聾、目盲、肢體麻木疼痛、下肢壞疽、腎衰水腫、中風(fēng)昏迷等兼癥［2］。目前西藥仍是治療糖尿病、高脂血癥的主要藥物，由于化學(xué)藥物的毒副作用和高昂的醫(yī)療費(fèi)用，從天然產(chǎn)物中篩選和發(fā)現(xiàn)降血糖活性成分已經(jīng)引起了國(guó)內(nèi)外醫(yī)藥工作者的廣泛關(guān)注［3］。

通脈降脂丸為云南省中醫(yī)醫(yī)院院內(nèi)制劑，藥物組成為：靈芝、黃芪、三七、益母草、山楂、水蛭、枸杞等。復(fù)方制劑集辨證與辨病于一身，體現(xiàn)中醫(yī)治療疾病的整體觀，將健脾補(bǔ)腎，化濁行滯，活血通脈多法聯(lián)用，適用于多種臨床證型的高脂血癥，臨床應(yīng)用十分方便。同時(shí)上方諸藥其調(diào)脂、抗凝、降糖等治療作用的途徑又是多環(huán)節(jié)，多靶點(diǎn)，多方面的，體現(xiàn)中醫(yī)藥獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。現(xiàn)代藥理研究證實(shí)，黃芪具有擴(kuò)張血管、降低區(qū)域血管阻力、保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞、改善微循環(huán)的作用；黃芪多糖（APS）對(duì)血糖具有雙向調(diào)節(jié)的作用，黃芪對(duì)2型糖尿病有促進(jìn)胰島β細(xì)胞分泌胰島素的作用；有抗腫瘤的作用［4］。靈芝能抑制血小板聚集而起到抗血凝作用；有降血糖作用，可減緩非胰島素依賴型糖尿病的發(fā)病程度；能降低老年鵪鶉血脂質(zhì)過(guò)氧化（LPO）水平，同時(shí)提高高密度脂蛋白（HDL）和降低極低密度脂蛋白（VLDL）水平，加快對(duì)膽固醇的清除，減輕脂肪肝，促進(jìn)肝細(xì)胞再生，加強(qiáng)肝臟的解毒功能；有抗腫瘤作用［5］；三七具有止血和活血化瘀雙重調(diào)節(jié)作用，降血脂，抗血栓、防止動(dòng)脈粥樣硬化，降血黏度，防止血栓形成，有保肝作用，抗肝纖維化、抗腫瘤作用［6］；水蛭中含有多種活性成分，具有抗凝、抗血栓、纖溶等作用［7］；山楂核乙醇提取物可降低鵪鶉血清高膽固醇、甘油三酯，低密度脂蛋白，提高高密度脂蛋白的水平，并明顯提高SOD活性；能治療肝硬化、抗癌，抑制畸形作用［8］。益母草能明顯抑制血栓形成［9］。枸杞有降血脂、能增加受損胰島細(xì)胞內(nèi)的SOD的活性、有抗腫瘤的作用［10］。表明通脈降脂丸各藥物本身除具有降脂的作用外，還有降血糖的作用。

在本研究中，通脈降脂丸高、中、低劑量對(duì)糖尿病小鼠的空腹血糖均無(wú)明顯降低作用（P＞0.05），但高劑量組對(duì)糖尿病小鼠的空腹血糖有一定的降低趨勢(shì)；通脈降脂丸高劑量組均能顯著降低血清TC與TG的含量（P＜0.05）；中劑量組能顯著降低血清中TC的含量（P＜0.05）；低劑量組作用不明顯。對(duì)于為何需較大劑量及作用機(jī)制，有待進(jìn)一步研究、評(píng)價(jià)。本實(shí)驗(yàn)證明通脈降脂丸對(duì)糖尿病小鼠高血脂有降低作用，并對(duì)其空腹血糖有一定的降低趨勢(shì)，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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R285.51

A

1007－8517（2013）05－0034－02

2013.01.08）

云南省中醫(yī)醫(yī)院院級(jí)科研項(xiàng)目《“通脈降脂丸”治療2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝的實(shí)驗(yàn)研究》，項(xiàng)目編號(hào)：2010J008。

柳堯（1978－），女，主治醫(yī)師，本科，研究方向：中西醫(yī)結(jié)合內(nèi)分泌、代謝專業(yè)。