不同濃度的磷酸鹽緩沖液 (pH7.4)對血塞通注射液穩定性的影響

2013-03-02 10:09:58趙嵩月張要武

中國民族民間醫藥 2013年5期

趙嵩月陳彤* 趙洪張要武郭燕

1.昆明醫科大學藥學院，云南昆明 650500;2.云南云科藥業有限公司，云南昆明 650033

血塞通注射液是以三七提取物——三七總皂苷為藥效成分的中藥注射液，用于中風偏癱、瘀血阻絡證;動脈粥狀硬化性腦梗塞、腦栓塞、視網膜中央靜脈阻塞屬瘀血阻絡證者，療效顯著，廣泛用于心腦血管疾病的治療，但臨床不良反應時有報道［1－5］。三七總皂苷在酸性和強堿性條件下，易發生水解脫糖基，生成極性小的甙元［6］。前期研究發現血塞通注射液的最適宜pH為6－8［7］，加入磷酸鹽緩沖液 (pH7.4)能提高血塞通注射液的穩定性，本實驗將進一步考察磷酸鹽緩沖液 (pH7.4)的濃度對血塞通注射液穩定性的影響。

1 材料

1.1 儀器 2010AHT高效液相色譜儀 (日本島津);天精STY－1滲透壓測定儀 (天津天大天發科技有限公司); CP225D電子天平 (北京塞多利斯儀器有限公司);101A－2E型電熱鼓風干燥箱 (上海實驗儀器廠有限公司); SK3300HP型超聲波清洗儀 (上?？茖С晝x器有限公司);PHS－25型PH計(上海雷磁儀器廠);0.22μm針前濾器(天津津騰公司)。

1.2 試藥色譜純甲醇 (德國默克公司);色譜純乙腈(德國默克公司);分析純鹽酸 (重慶川東化工集團有限公司化學試劑廠);分析純氫氧化鈉 (天津市化學試劑三廠);磷酸二氫鈉(國藥集團化學試劑有限公司);三七皂苷R1對照品 (中國藥品生物制品檢定所，批號:101021 );人參皂苷Rg1對照品 (中國藥品生物制品檢定所，批號:101021);人參皂苷Rb1.對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:101021);三七總皂苷 (云南云科藥業有限公司提供，批號:101003)。

2 方法

2.1 血塞通注射液中三個有效成分的含量測定方法按照血塞通注射液質量標準中［8］含量測定項下的方法測定注射液中R1、Rg1以及Rb1的含量。

2.1.1 色譜條件色譜柱:日本島津 VP－ODS C18柱(150mm×4.6mm);流動相:A:乙腈，B:水 (0－20min A;20，B:80;21－26min A:40，B:60;26－30min A:20，B:80);流速:1.0ml·min－1;檢測波長: 203nm;進樣量:10μl。

2.1.2 對照品溶液的制備分別取在60℃減壓干燥2小時的R1對照品、Rg1對照品和Rb1對照品適量，分別精密稱定，置10ml量瓶中，加90%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得 (制成每 1ml約含 R1 0.4mg、Rg1 1.5 mg、Rb1 1.5 mg)。于HPLC儀上，進樣10μl。

2.2 磷酸鹽緩沖液的配制 (pH7.4) 精密稱取磷酸二氫鈉1.36 g，加入0.1 mol/L的氫氧化鈉溶液79ml溶解后加新沸過的冷水定容至200ml即得。

2.3 不同濃度磷酸鹽緩沖液 (pH7.4)的配制分別精密吸取2.2項下的磷酸鹽緩沖液2ml、4ml、6ml、8ml、10ml、20ml、30ml、40ml、50ml，置200ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，得到濃度為 1%、2%、3%、4%、5%、10%、15%、20%、25%的磷酸鹽緩沖液，分別用0.1mol/L的NaOH溶液調節pH值為7.4。

2.4 含不同濃度磷酸鹽緩沖液 (pH7.4)的血塞通注射液配制分別稱取三七總皂苷約7.5g，共9份，精密稱定，稱取氯化鈉1.2g置燒杯中，分別精密量取上述不同濃度的磷酸鹽緩沖液150ml，加熱溶解，放冷至室溫，調節pH至7.4，分別用0.22μm的針前濾器過濾后注入10ml安瓿中，將安瓿熔封。

2.5 高溫試驗取上述2.4項下的血塞通注射液，置于溫度為80℃ 的干燥箱中，于第0天、第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第6天、第7天、第8天、第9天、第10天、第11天、第12天取樣，放置至室溫，搖勻，精密吸取1ml溶液至10ml的量瓶，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，于HPLC儀上，進樣10μl。測定R1、Rg 1和Rb1的含量。