補腎調經湯對PCOS大鼠血清激素水平影響的實驗研究

胡曉華趙莉娜

1.河南省中醫院婦產科，河南 鄭州 450008；2.河南中醫學院2011級研究生，河南 鄭州 450008

補腎調經湯對PCOS大鼠血清激素水平影響的實驗研究

胡曉華1趙莉娜2

1.河南省中醫院婦產科，河南 鄭州 450008；2.河南中醫學院2011級研究生，河南 鄭州 450008

觀察補腎調經湯對多囊卵巢綜合癥（PCOS）大鼠卵巢分泌激素LH、FSH、T值的影響。總結其臨床療效，探索其作用機理，為其臨床應用提供科學依據。方法：規律發情周期SD雌性大鼠50只，應用人絨毛膜促性腺激素 （HCG）聯合胰島素 （INS）造模法制作為動物模型，隨機分為正常對照組、模型對照組、二甲雙胍組、補腎調經湯低劑量組、補腎調經湯高劑量組。運用放射免疫法測定血清性激素水平的變化。結果：補腎調經湯高劑量組通過調整內分泌，降低血清T、LH水平，以及降低LH/FSH比值，此可能是臨床治療多囊卵巢綜合癥高雄激素血癥和高LH方法之一。

多囊卵巢綜合征；PCOS大鼠模型；高雄激素血癥；補腎調經湯

多囊卵巢綜合癥（polycystic ovary syndrome，PCOS）是育齡婦女常見的一種發病多因性，臨床表現呈多態的異質性內分泌紊亂疾病，以高雄激素血癥及長期無排卵為特征。發病率在育齡婦女中占6%～10%［1］，集合了一組多樣的、多系統的慢性內分泌紊亂，如月經不規律、多毛、肥胖、高雄激素化的各種表現，由于其生化特征、臨床表現及發病機理的異質性成為內分泌領域最復雜的研究特點。中醫學中無 “多囊卵巢綜合癥”病名，根據臨床表現當屬于祖國醫學中 “閉經”、 “不孕”、“月經后期”等范疇。現在中醫治療多囊卵巢綜合征多采用辨病與辨證相結合，本實驗所采用方藥以補腎調經為主，采用Poresky法進行造模［2］，分別以中藥、西藥 （二甲雙胍）、中藥補腎調經湯高低劑量組治療，研究其對血清性激素T、FSH、LH的影響，進而評價補腎調經湯對PCOS模型大鼠內分泌系統的影響，為補腎調經湯的臨床應用提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 動物 清潔級雌性SD大鼠50只，體重約（180～200）g，由河南省實驗動物中心提供。飼養于河南省中醫研究院實驗室，實驗前置于室內適應環境1周，室溫18℃～22℃。

1.2 試劑與藥品

1.2.1 試劑T、FSH、LH放射免疫分析藥盒購自深圳拉爾文生物工程技術有限公司。

1.2.2 藥品 中藥復方湯劑：紫石英、仙靈脾、熟地、山萸肉、當歸、肉蓯蓉、三棱、莪術、香附、地龍、穿山甲、丹參、甘草等組成，生藥由河南中醫學院第二附屬醫院門診部藥房提供，并由制劑室協助煎煮，過濾，濃縮而成（每1m l相當于生藥1g），分裝、滅菌，4℃儲存備用。人絨毛膜促性腺激素（HCG）：注射用絨促性素1000IU/瓶，麗珠集團麗珠制藥廠；二甲雙胍：0.25g/片，貴州天安藥業。

1.3 試驗方法

1.3.1 造模方法 SD大鼠，雌性，體重200～230g，進行陰道圖片確定規律發情周期；兩周后，選擇規律發情周期大鼠50只，體重260～280g，隨機分為正常對照組（n＝10）和病理模型組（n＝40）。正常對照組第1～10天皮下注射生理鹽水0.2ml，每日一次；第11～22天皮下注射生理鹽水0.2m l，每日兩次。病理模型組第1～10天股骨內側皮下注射中性胰島素注射液（溶于生理鹽水共0.2ml），每日一次，由0.5IU遞增至6.0IU；第11～22天持續6.0IU劑量；同時第11～22天皮下注射HCG3IU（溶于生理鹽水共0.2ml），每日兩次，實驗周期為22天。所有動物給予自然光照及自由飲食飲水 （處理前為普通飲用水，處理期間為5%葡萄糖水），并繼續每日進行陰道涂片以檢測發情周期。

1.3.2 給藥方法 造模完成后將上述病理模型組（n＝40）又隨機分為模型組、二甲雙胍組、補腎調經湯低劑量組、補腎調經湯高劑量組，每組10只，第23天開始分別灌胃給予相應劑量，在給藥劑量上按人鼠體重比換算后乘以人與大鼠體重換算系數6.25，換算后大鼠給藥量為：二甲雙胍組0.16g/（kg·d）；補腎調經湯低組藥液12.5g/（kg· d）；補腎調經湯高組藥液25g/（kg·d）；正常對照組和模型對照組給予生理鹽水10ml/（kg·d），連續灌胃14天后處死。

1.4 檢測項目及方法 大鼠處死后心臟取血，3000r/min離心10分鐘，收集血清樣品，－20℃保存，采用放射免疫法（RIA）測定血清中卵泡雌激素 （FSH）、黃體生成素（LH）、睪酮（T）的含量。

1.5 統計分析 數據資料采用SPSS13.0統計軟件分析處理，計量資料采用±s表示，分析方差齊性后，采用單因素方差分析。

2 結果

2.1 各治療組對大鼠血清睪酮水平的影響

表1 各組大鼠血清睪酮水平的影響 （±s）

表1 各組大鼠血清睪酮水平的影響 （±s）

注：與模型組相比△P＜0.01，與模型組相比*P＜0.05。

組別 數量 （只） 睪酮 （ng/dl ）正常組 10 4.89±1.46△模型組 10 12.57±3.33二甲雙胍組 10 8.25±2.23*中藥低劑量組 10 7.07±2.09*中藥高劑量組 10 4.75±0.95△

經過分析檢測大鼠血清T水平，顯示模型組大鼠血清T水平顯著增高，符合多囊卵巢綜合征的血清睪酮升高的情況，正常組大鼠血清T水平最低。通過藥物治療后，各個治療組血清T水平都有不同程度降低，以中藥高劑量組最為明顯。從表1中可以看出，正常組和模型組比較，P＜0.01，各治療組與模型組對比，均P＜0.05，但中藥低劑量組與二甲雙胍組對比，P＞0.05，差異無顯著性，中藥高劑量組與二甲雙胍組相比，P＜0.05，差異有顯著性，對比發現，治療組中，以高劑量組降低血清睪酮的效果最好，且優于二甲雙胍組。

2.2 各組大鼠血清LH、FSH的影響 見表2。

表2 各組大鼠血清LH、FSH的影響（±s）

表2 各組大鼠血清LH、FSH的影響（±s）

注：與模型組相比△P＜0.01，與模型組相比*P＜0.05。

LH/FSH正常組 10 8.70±0.23△ 4.38±0.48△ 2.01±0.19組別 數量（只）LH（m Iu/m l） FSH（m Iu/m l）*模型組 10 61.44±15.03 16.33±3.71 3.75±0.20二甲雙胍組 10 26.08±8.88* 10.77±3.66* 2.42±0.20*中藥低劑量組10 28.34±3.14* 10.33±0.82* 2.74±0.20*中藥高劑量組10 15.39±0.89△ 9.23±0.71* 1.67±0.04△

從表2可以看出，就LH水平而言，模型組最高，其余各組明顯較低，模型組與正常組對比P＜0.01，存在顯著性差異，模型組大鼠血清LH水平明顯升高，符合多囊卵巢綜合征血清LH升高的情況，說明PCOS大鼠模型是成功的。治療組與模型組對比，均有顯著性差異，而二甲雙胍組和中藥低劑量組對比，P＞0.05，差異無統計學意義，中藥高劑量組與正常組對比，也存在無顯著性差異，P＞0.05；說明治療組均有效，而中藥高劑量組效果最佳。

就FSH水平而言，以模型組最高，其中正常組與模型組相比，P＜0.01，而各治療組間對比，P＞0.05，說明二甲雙胍組、中藥低劑量組、中藥高劑量組之間無顯著性差異。

就LH/FSH比值而言，以模型組最高，正常組與模型組相比，P＜0.05，存在顯著性差異，各治療組與模型組對比，有顯著性差異，P＜0.05，治療組各組間對比，均P＜0.05，具有統計學意義。故而認為中藥高劑量組在改善LH/FSH比值中最優。

3 討論

多囊卵巢綜合征 （PCOS）是由于下丘腦－垂體－卵巢功能失調而產生的一種婦科內分泌失調綜合征，高雄激素、高LH是PCOS的基本病理特點，也是患者生殖功能障礙的根本原因，PCOS時LH水平升高，直接激活卵巢細胞色素P450C170a的活性，促進雄激素的生物合成。高性激素血癥，下丘腦促性腺激素釋放激素 （GnRH）脈沖分泌頻率加速，導致垂體的黃體生成素 （LH）、卵泡刺激素 （FSH）分泌不協調；LH水平升高，刺激卵巢泡膜細胞功能亢進，引起高雄激素血癥及卵巢多囊性改變［3］。

本病在中醫學中歸屬 “閉經”、“不孕”、“癥瘕”等范疇。傳統醫學認為，腎主藏精，主生長發育與生殖，元氣與腎精參與經血的組成，與月經關系密切。故而腎氣虧虛，沖任不調是本病病因，因此治療中宜采用補腎填精，調沖任為主，而補腎調經湯以補腎調經，調整臟腑間功能來實現對本病的治療作用。通過現代醫學對中醫藥的研究發現［4］，補腎填精類中藥如熟地、山茱萸等具有類激素樣作用，能使下丘腦－垂體－卵巢軸分泌功能趨于正常，恢復排卵。余瑾等［5］認為補腎促排卵機制可能作用于下丘腦，促排卵作用于繼LH/FSH比值下降后的IgT/IgE2比值下降直接有關，提示補腎治療在下丘腦垂體卵巢各個環節有一定作用。實驗表明［6］補腎中藥能增強下丘腦－垂體－卵巢軸功能，提高卵巢HCG/LH受體功能，從而改善神經內分泌調節功能。

本實驗中，PCOS大鼠模型血清中T和LH水平、FSH水平及LH/FSH比值明顯升高，符合多囊卵巢綜合征性激素變化的基本特征，通過實驗研究結果證實，二甲雙胍組、中藥低劑量組、中藥高劑量組均能降低血清睪酮水平、LH水平、FSH水平及LH/FSH比值，而三者之中以中藥高劑量組效果最佳，從而證實了補腎調經湯高劑量組在治療多囊卵巢的良好的臨床治療價值。

［1］王穎，李美芝，趙一鳴.多囊卵巢綜合征促排卵失敗的相關因素探討［J］.生殖與避孕，2000，20（6）：342－347.

［2］Poretsky L，Piper B，Insulin resistance，hypersecretion of LH，and a dualdefect hypothesis for the pathogenesis of polycystic ovary syndrome，Obstet Gynecol，1994，84（4）：613－621.

［3］張以文，多囊卵巢綜合征的現代概念［J］.中華婦產科雜志，2004，39（9）：577－578.

［4］蔡麗慧，張秀蘭，劉云蓮.中西醫結合治療多囊卵巢綜合征的臨床研究［J］.中醫函授通訊，1997，16（3）：38.

［5］余瑾，孫月麗，邵公權，等.補腎化痰治療多囊卵巢綜合征中對下丘腦－垂體－卵巢功能的調節［J］.中西醫結合雜志，1986，6（4）：218.

［6］羅元愷.實用中醫婦科學 ［M］.上海：上海科學技術出版社，1996，290.

R285.5

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1007－8517（2013）08－0015－02

2013.03.01）