金屬蛋白酶3、抗環瓜氨酸肽和類風濕因子分型對類風濕關節炎臨床檢測的應用

楊秉潛

廣東省梅州市人民醫院，廣東 梅州 514000

金屬蛋白酶3、抗環瓜氨酸肽和類風濕因子分型對類風濕關節炎臨床檢測的應用

楊秉潛

廣東省梅州市人民醫院，廣東 梅州 514000

目的：基質金屬蛋白酶－3（MPP－3）、抗環瓜氨酸肽（CCP）抗體、類風濕因子分型 （RF）檢測對于類風濕關節炎（RA）患者疾病進程的臨床預測價值。方法：采用ELISA檢測法，測定血清MMP－3、抗CCP抗體、RF lgM、RF lgG、RF lgA的含量。結果：（1）MMP－3、抗CCP抗體及RF lgM、RF lgG、RF lgA在健康對照組均有顯著性意義（P＜0.01），抗CCP、RF在RA各組血清水平均高于非RA及對照組（P＜0.01）；MMP－3在RA組具有較高含量，顯著高于非RA組、健康對照（P＜0.01）；在RA1組與RA2組中水平比較差別明顯（P＜0.01），在RA2組與RA3組中水平比較差別明顯（P＜0.01）。（2）RA組中MPP－3、抗CCP抗體、RF lgM＋RF lgG＋RF lgA的敏感度分別為65.3%，68.7%，71.8%。（3）MMP－3、抗CCP與RF lgM＋RF lgG＋RF lgA在RA組中特異性分別為70.2%，95.1%，83.1%。（4）五項指標的聯合檢測敏感度為32.8%，聯合特異度為100%。結論：聯合檢測五項指標可降低RA的漏診率。動態聯合測定抗CCP抗體、RF lgM、RF lgG、RF lgA、MMP－3能更有效地及時監測RA的疾病進展，對指導臨床診治及干預有積極意義。

類風濕關節炎；基質金屬蛋白酶－3；抗環瓜氨酸肽抗體；類風濕因子分型

類風濕關節炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種以對稱性、多關節炎癥為主要表現的慢性、全身性自身免疫性疾病。RA的靶器官主要是關節滑膜，病理改變是慢性滑膜炎，出現滑膜炎癥、增厚、血管翳形成、軟骨及軟骨下骨質破壞，終導致關節畸形及強直而致殘。其中，軟骨和骨的進行性、不可逆性破壞是一個不可忽視的特點，造成RA關節破壞的發病機制目前尚未完全闡明［1］。所以，對于RA早期診斷和RA治療過程有效監測尤為重要。

試驗通過檢測80例確診RA患者不同時期血液中抗環瓜氨酸肽（anticycfic citrullinated peptide，anti－CCP）抗體、類風濕因子分型（Rheumatoid factor lgM、lgG、lgA）以及導致軟骨降解的最重要蛋白酶［2］基質金屬蛋白酶3（matrix metalloproteinasis－3，MMP－3）等指標的含量變化，綜合分析它們在RA不同時期臨床應用的作用和關系。

1 資料與方法

1.1 標本來源 RA病例均來自本院免疫風濕科門診及住院病人，其中男性23例、女性57例，年齡在17～79歲、平均年齡49±11歲，其診斷均符合ACR/EULAR2010年RA的診斷標準［3］，并按病程時期分RA1組 （初次診斷）、RA2組（用藥治療3個月）、RA3組（用藥治療6個月）。同時選擇41例非RA的其他免疫系統疾病，其中男17例，女24例，年齡15～67歲，平均年齡42±9歲；疾病包括骨關節炎11例、系統性紅斑狼瘡7例、原發性干燥綜合癥12例、多發性肌炎3例、系統性硬化癥8例，且所有患者均符合相應的臨床診斷標準。正常對照組40例，均來自健康體檢者的血清，其中男性17例、女性23例，年齡與RA組結構相配，均無肝、腎功能損害、自身免疫性疾病、傳染病感染及腫瘤。

1.2 方法 空腹采血，3000r/min離心分離血清，采用ELSIA法定量檢測MMP－3、抗CCP、RF lgM、RF lgG、RF lgA。

1.3 儀器與試劑 雷勃MK3酶標儀，MMP－3、CCP、RF lgM、RF lgG、RF lgA檢測試劑由德國AESKU公司提供。MMP－3正常女性濃度范圍為：18 ng/ml－60 ng/ml；正常男性濃度范圍為：24 ng/m l－120 ng/ml；CCP、RF lgM、RF lgG、RF lgA結果判斷均是＞18U/m l為陽性，以上試劑均配有標準品與質控品。

1.4 統計學處理 數據均用SPSS 11.0統計軟件進行統計，組間率比較采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 RA組與各對照組血清MMP－3、抗CCP、RF分型濃度比較 由表1可知，抗CCP、RF在RA各組血清水平均高于非RA及對照組（P＜0.01），MMP－3、RF在非RA組中水平與正常組比較，（P＜0.01）差別有統計學意義，抗CCP在非RA

組與正常組差別無有統計學意義（P＞0.05）；MMP－3在RA組具有較高含量，顯著高于非RA組、健康對照（P＜0.01）；在RA1組與RA2組中水平比較差別明顯（P＜0.01），在RA2組與RA3組中水平比較差別明顯（P＜0.01）。

表1 RA組和對照組血清MMP－3、抗CCP、RF lgM、RF lgG、RF lgA的含量

2.2 四種血清標準物對檢測RA的影響 由表2可知，RA組中MPP－3、抗CCP抗體、RF lgM＋RF lgG＋RF lgA的敏感度分別為65.3%，68.7%，71.8%；MMP－3、抗CCP與RF lgM＋RF lgG＋RF lgA在RA組中特異性分別為70.2%，95.1%，83.1%。

表2 血清MMP－3、抗CCP、RF對檢測RA的影響（%）

2.3 五種血清標準物聯合對檢測RA的影響 由表3可見，CCP＋MMP－3二聯、RF分型三聯、CCP＋RF分型四聯、CCP＋MMP－3＋RF隨著類風濕因子分型物質種類的增多，敏感性由58.9%降低到32.8%，但特異性則相反，表現為有所提高。

表3 RA患者MMP－3、抗－CCP與RF聯合檢測結果（%）

3 討論

RA患者早期臨床表現復雜多變，若不及時診治，可導致軟骨和骨破壞，造成不可逆的骨關節破壞。RA病情發展最快階段是在發病的第一年，此期存在一個短暫的治療窗口，這期間RA的炎性是可逆的。因此，只有早期診斷和早期治療才能減少致殘。Fiedomzyk［4］發現早期RA患者治療前血清MMP－3水平較骨性關節炎及正常人明顯增高；Hisashi Yamanaka［5］發現MMP－3增高的早期RA患者，在6～12個月內可出現骨關節破壞。Green［6］發現未接受治療的早期RA患者，MMP－3水平不僅和疾病活動性相關，還參與RA的發病機制，與RA關節破壞密切相關。Ribbens發現［7］關節液中MMP－3的水平在具有明顯破壞病變的RA患者與無關節破壞的RA及ReA患者之間無顯著差別，但是關節液中MMP－3的水平與其它的RA活動期的炎癥標志物如TNF－α、IL－6、ESR、CRP具有顯著相關性。梁柳琴［8］采用敏感的酶聯免疫吸附方法檢測RA患者血清MMP－3水平，發現RA患者血清MMP－3水平顯著升高，它可作為疾病活動性指標之一。本實驗表明RA治療前MMP－3水平高于非RA組及健康對照組（P＜0.01），并隨著對RA患者治療，血清中MMP－3水平降低（P＜0.01）。抗CCP抗體是人工合成的環化瓜氨酸肽，在RA診斷中的應用價值已得到國內外專家的肯定［9－10］。本實驗抗CCP抗體對早期RA的診斷敏感性為68.7%，與相關文獻報道基本一致。

本實驗結果顯示，MMP－3、抗CCP抗體、RF lgM、RF lgG、RF lgA可出現在RA的病程各各個時期，且均高于正常對照組，有顯著性差異（P＜0.01），RA中晚期的血清水平較早期及對照組均高，有統計學意義 （P＜0.01），提示三者可能與RA的病程有一定相關性，動態檢測可預示RA疾病的發展。

綜上所述，聯合檢測抗CCP抗體和RF分型，能提高RA診斷的準確性，減少漏診，動態聯合檢測，可有效監測RA病情進展及評價臨床療效。監測血液中的MMP－3的含量，有可能做到早期診斷、及時治療，對類風濕關節炎的治療及預后具有較高的評估意義，防止MMP－3等對關節造成的不可逆破壞。說明MMP－3、抗CCP抗體、RF分型聯合檢測可作為RA臨床檢驗的指標。

［1］Peake NJ，Khawaja K，Myers A，et a1.Levels of matrix meta Uoproteinuse（MMP）－1 in paired ser－8 and synovial fuids of juvenile idiopathic arthritis patients：relationship to inflammatory activity，MMP－3 and tissueinhibitor of metalloproteinases－l in a longitudinal study［J］.Rheumatology，2005，44（11）：1383－1389.

［2］Markku H，Leila R，Jorm aM，et al.Increased type I collagen degradation correlates with disease severity in rheumatoid arthritis［J］.Ann Rheum Dis，1993，52（4）：866－869.

［3］Aletaha D，Neogi T，Silman AJ，etal.2010 rheumatoid arthritis classification criteria：all American College of Rheumatology/European League Against Rheumatism collaborative initiative［J］.Ann Rheum Dis，2010，69（9）：1580－1583.

［4］Fiedorczyk M，Klimiuk PA，Sierakowski S，et al.Serum matrixmetalloproteinases and tissue inhibitors ofmatalloproteinases in patientswith early rheumatoid arthritis［J］.Rheumatol，2006，33（8）：1523－1529.

［5］Hisashi Y，Yuko M，Michi T，et al.Serum matrix metalloproteina－3 as a predictor of the degree of joint destruction during the six months after measurement in patients with early rheumatoid arthritis［J］.Arthritis Rheum，2000，52（4）：852－858.

［6］Green MJ，Gough AK，Devlin J，et al.Serum MMP－3 and MMP－1 and progression of joint damage in early rheumatoid arthritis［J］.Rheumatology，2003，42（1）：83－88.

［7］Ribbens C，Andre B，Kaye O，et a1.Synovial fluid matrix metaIloprotei-Base－3 levels are increased in inflantraatory arthritides whether erosiveor not［J］. Rheumatology（Oxford），2000，39（12）：1357－1365.

［8］梁柳琴，許韓師，楊岫巖，等.類風濕關節炎血清基質金屬蛋白酶3檢測及其臨床意義［J］.中山大學學報，2004，25（3）：128－13.

［9］Schellekens GA，Visser H，de Jong BA，et al.The diagnostic properties of rheumatoid arthritis antibodies recognizing a cyclic citrullinated peptide［J］.Arthritis Rheum，2000，43（1）：155－163.

［10］趙金霞，王志敏，栗占國.以抗環瓜氨酸肽抗體改進對1987年美國風濕病學會關于類風濕關節炎分類標準的探討 ［J］.中華風濕病學雜志，2009，13（4）：236－239.

Objective：Matrix metalloproteinase－3（MPP－3），anti－cyclic citrullinated peptide（CCP）antibodies，rheumatoid factor scores（RF）detection of clinical predictive value for rheumatoid arthritis（RA）patients with disease progression.Method：Using quantitative ELISA serum MMP－3、anti－CCP antibody RF lgM RF lgG、RF lgA.Results（1）MMP－3，anti－CCP antibodies and RF lgM RF lgG，RF lgA in the healthy control group were significantly significance（P＜0.01），resistance to the CCP and RF in RA serum water were higher than those in non－RA and the control group（P＜0.01）；MMP－3 has a higher content in the RA group was significantly higher than the non－RA group and healthy controls（P＜0.01）；RA1 RA2 group level comparison was significantly different（P＜0.01），in comparison with the level of RA3 group RA2 group was significantly different（P＜0.01）.（2）RA group MPP－3，anti－CCP antibodies，RF lgM＋RF lgG＋RF lgA sensitivity of65.3%，68.7%and 71.8%，respectively.（3）MMP－3，anti－CCP and RF lgM＋RF lgG＋RF lgA in the RA group specificity were 70.2%，95.1%，83.1%.（4）The five indicators of joint detection sensitivity of32.8%，joint specificity of100%.Conclusion：Combined detection of five indicators to reduce the rate of misdiagnosis of RA.Dynamic joint determination of anti－CCP antibodies，RF lgM，RF lgG RF lgA of MMP－3 can be more effective timely monitoring of disease progression in RA guiding clinical treatment and intervention.

rheumatoid arthritis；matrix metalloproteinase－3；anti－cyclic citrullinated peptide antibody；rheumatoid factor typing

R593.22

A

1007－8517（2013）12－0029－02

2013.04.13）