鵝不食草醇提取物抑菌作用研究

李吉華

山東中醫藥大學實驗中心，山東 濟南 250355

鵝不食草醇提取物抑菌作用研究

李吉華

山東中醫藥大學實驗中心，山東 濟南 250355

目的：通過抑菌試驗了解中藥鵝不食草乙醇提取物的抗菌活性。方法：試驗采用紙片擴散法測定乙醇提取物對福氏志賀菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、枯草芽胞桿菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、藤黃微球菌、釀酒酵母的抗菌活性。采用試管比濁法測定其最小抑菌濃度。結果：鵝不食草提取物除福氏志賀菌、銅綠假單胞菌、釀酒酵母無抑菌活性外，對其余菌株均有抑菌作用，尤其對金黃色葡萄球菌的抑菌活性顯著。結論：鵝不食草有較好的抑菌效果，在臨床抗菌消炎方面有極大地優勢。

鵝不食草；醇提物；抑菌

1 概述

鵝不食草為菊科植物鵝不食草Epaltes aistralis Less.的干燥全草，收載于 《中國藥典》2005版Ⅰ部。又名石胡荽、食胡荽、雞腸草［1］。系一年生小草本，生于水邊濕地荒，野蔭濕地，公園溫室，花盆潮濕處等，分布于全國各省區，為常用藥材。在 《品匯精要》中就對鵝不食草有所描繪 “此草鵝皆不食，故名鵝不食草。”本品味苦，微辛，屬傳統解表類中藥，具有祛風散寒、通鼻利竅、明目去翳止咳化痰等功效，臨床主要用于治療風寒頭痛、咳嗽、跌打扭傷、百日咳、瘧疾、急慢性鼻炎、過敏性鼻炎等癥［2］。鵝不食草化學成分復雜，主要為揮發油、甾醇類、黃酮類、三萜類化合物等［3］。鵝不食草具有廣泛的藥理作用，包括抗過敏、抗炎、抗誘變、抗癌等［4］。資源豐富，應用廣泛，具有較高的藥用和研究價值。為了更深入的研究鵝不食草的抑菌活性，本文對鵝不食草的乙醇提取物的抗菌性進行試驗，旨在了解其抗菌活性，為其臨床使用和質量控制提供理論依據。

2 材料與方法

2.1 提取物的制備［5－7］稱取鵝不食草全草干粉300g，于燒杯中加60%乙醇4200m l，在超聲波中50℃處理30 m in，重復操作2次，抽濾后合并濾液，將濾液用RE－ 540旋轉蒸發儀在40℃下恒溫下蒸發至無乙醇，于真空冷凍干燥機內處理后置冰箱保存，待用。使用時取鵝不食草提取物，用60%乙醇溶解，配置不同濃度溶液即可。

實驗中所用福氏志賀菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、枯草芽胞桿菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、藤黃微球菌、釀酒酵母等由山東中醫藥大學基礎醫學院微生物學實驗室提供。

2.2 鵝不食草乙醇提取物的抗菌活性測定 用紙片擴散法進行試驗，藥敏紙片和培養基的制備按照參考文獻［8］的方法進行。把鵝不食草的乙醇提取物配成500 mg/ml的供試液，將提前制備好的紙片放入供試液中浸泡2h，取出紙片放入40℃的烘箱中烘干。將濃度為106ml－1的福氏志賀菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、枯草芽胞桿菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、藤黃微球菌、釀酒酵母分別均勻的涂抹在瓊脂培養基上。然后，將制備好的藥敏片均勻貼于培養基的3個位點，把培養基置于37℃恒溫箱中培養18小時。分別測定抑菌圈的直徑，最后取3個重復的平均值為最終結果。

用無菌水做對照，其中陽性對照為各菌株對應的抗生素 （表1）。

表1 不同菌株所用的抗生素

2.3 最低抑菌（MIC）濃度測定 采取試管比濁法［9，10］。簡言之，配制系列肉湯培養基，分別加入50μL細菌的懸濁液，最后一管補加50μL肉湯。對各管進行比濁后，將未見細菌生長的試管內肉湯轉移到干凈的培養基上繼續培養（37℃條件下培養18～24h）。培養基上未見細菌生長的最低藥物濃度為最低抑菌濃度。

3 結果與討論

鵝不食草乙醇提取物的抗菌活性進行試驗 （表2）。

表2 鵝不食草乙醇提取物對8種菌的抑菌環活性（mm）

鵝不食草醇提取物對福氏志賀菌、銅綠假單胞菌、釀酒酵母無抑菌活性，對另外5種菌均有抑菌活性，抑菌圈直徑：金黃色葡萄球菌＞藤黃微球菌＞大腸埃希菌＞枯草芽胞桿菌＞變形桿菌。最小抑菌濃度由小到大為：金黃色葡萄球菌＝藤黃微球菌＝枯草芽胞桿菌＜變形桿菌＝大腸埃希菌。有表可知鵝不食草提取物對福氏志賀菌、銅綠假單胞菌、釀酒酵母無抑菌活性。此外，鵝不食草醇提物的最低抑菌濃度為0.125mg/ml（表2）。綜合鵝不食草的抑菌直徑和最低抑菌濃度，我們認為鵝不食草對金黃色葡萄球菌抑菌活性顯著。

3.2 討論 鵝不食草廣泛用于治療治療過敏性鼻炎，有明顯的減輕鼻塞的功效［11］，臨床上把鵝不食草做成噴霧劑來治療鼻炎，使藥直接作用在病變部位［12］。試驗顯示，鵝不食草醇提物的MIC為0.125mg/ml，說明了鵝不食草有較好的抑菌效果，由于鵝不食草含有多種化學成分如三萜類成分、揮發油、黃酮類、氨基酸、豆甾醇、有機酸等［13］，據此推測鵝不食草在臨床抗菌消炎方面有極大地優勢。紙片擴散法測定醇提物抗菌活性試驗中，醇提物對福氏志賀菌、銅綠假單胞菌、釀酒酵母無抑菌活性，但對金黃色葡萄球菌、藤黃微球菌、大腸埃希菌、枯草芽胞桿菌、變形桿菌有明顯的抑菌圈，抑菌活性明顯，尤其是對臨床常見菌株金黃色葡萄球菌的活性表明，鵝不食草具有良好的抑菌效果，臨床藥用價值可待。

［1］覃仁安，梅璇，宛蕾，等.鵝不食草揮發油對角叉菜膠致大鼠急性胸膜炎的影響［J］.中國中藥雜志，2006：1192－1194.

［2］林遠燦，高明.鵝不食草的化學成分及藥理研究進展 ［N］.浙江中醫藥大學附屬第一醫院，2011，35（2）：303－304.

［3］吳林芬，劉巍，黃飛燕，等.鵝不食草揮發油的氣相色譜－質譜聯用分析［J］.云南化工，2012，39（2）：22－26.

［4］吳和珍，劉玉艷，楊艷芳，等.鵝不食草醋酸乙酯部位化學成分的研究［J］.時珍國醫國藥，2010，21（5）：1096－1098.

［5］蒲首丞，郭遠強，高文遠.鵝不食草化學成分的研究 ［J］.中草藥，2009，40（3）：363－365.

［6］曹俊嶺，李國輝.鵝不食草化學成分研究［J］.中國中藥雜志，2012，37（15）：2301－2303.

［7］于鑫，黃云霞，胡寧，等.紙片擴散法比較Biopure MTAD等沖洗液抑制根管內常見菌株性能的試驗研究［J］.國際口腔醫學雜志，2009，36（2）：127－129.

［8］李建強，李六金.獸醫微生物學試驗實習指導 ［M］.西安：陜西科學技術出版社，1998.

［9］吳國娟，張中文，李煥榮，等.中草藥對奶牛乳房炎6種致病菌的抑茵效果觀察［J］.北京農學院學報，2003，18（3）：195－198.

［10］童延清，李暉.紫花地丁、蒲公英體外抗菌作用 ［J］.中華微生物學和免疫學雜志，2003，23（9）：669.

［11］劉志剛，余洪猛，文三立，等.鵝不食草揮發油治療過敏性鼻炎作用機理的研究［J］.中國中藥雜志，2005，30（4）：292－294.

［12］易軍，溫火靈.鵝不食草鼻腔噴霧劑的制備 ［N］.廣東藥學院學報，2008，24（3）：205－207.

［13］張鑫.鵝不食草化學成分的初步研究 ［N］.第一軍醫大學分校學報，2004，27（1）：7－16.

Antibacterial activities of ethanol extract from Centipeda minima

Li Jihua
Experimental center of Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Jinan，250355

Objective：To explore the antimicrobial activity of traditional Chinese medicine（TCM）Centipeda using bacteriostatic test.Methods：The antimicrobial activity of Centipeda ethanol extraction to to Shigella bacteria，Staphylococcus aureus，Proteusbacillus vulgaris，Bacillus subtilis，Pseudomonas aeruginosa，Escherichia coli，Micrococcus luteus and Saccharomyces cerevisiae were studied by means of the disc diffusion.The minimum inhibitory concentration（MIC）was analyzed by tube nephelometry.Results：Centipeda ethanol extractions have bacteriostasis except to Shigella bacteria，Pseudomonas aeruginosa，Saccharomyces cerevisiae and have significant antibacterial activity to staphylococcus aureus.ConclusionCentipeda：minima has better bacteriostasis effect，and has great advantages in the clinical antibacterial anti－inflammatory.

Centipeda minima；Alcohol extract；antibacterial activity

R284.1

A

1007－8517（2013）14－0028－02

2013.05.23）

李吉華 （1965－），男，現任山東中醫藥大學實驗室管理處處長、實驗中心主任，副主任藥師。主要研究方向為中藥制劑和藥物成分分析。Email：ljh＿sdutcm＠126.com