脂餐負荷前后ET-1、IL-6變化及其與動脈硬化關系的研究

楊淑玲，靳春榮，王 健，白 淘，呂吉元，梁建芳

動脈粥樣硬化（AS）是始終貫穿內皮功能損傷的慢性炎癥反應。其發病機制復雜，有多種細胞因子及炎性因子參與。內皮源性血管活性因子內皮素-1（endothelin-1，ET-1）和促炎因子白介素-6（interleukin-6，IL-6）是調節C反應蛋白（C-reactive protein，CRP）促 AS進展的強效物質［1］。眾所周知高脂血癥是AS的重要危險因素，餐后階段是致AS的關鍵時期，目前國內外有關脂餐負荷對動脈粥樣硬化過程中內皮功能及炎性因子影響的研究鮮有報道。本研究在AS進展的不同階段，給予脂餐負荷，分析負荷前后ET-1、IL-6變化，探討脂餐負荷對動脈硬化的影響。

1 材料與方法

1.1 動脈粥樣硬化模型建立 健康雄性新西蘭大白兔10只（3月齡，體重2.5 kg～3 kg，購于山西省畜牧研究所），高脂喂養（含1%膽固醇，16%蛋黃，83%基礎飼料）12周，且于初始及第4周、8周、12周給予脂餐負荷（含2%膽固醇，16%蛋黃，82%基礎飼料）。

1.2 ET-1、IL-6檢測 初始及第4周、8周、12周，分別于禁食后12 h及脂餐負荷后第2 h、4 h、6 h、8 h，經耳緣靜脈取血2 m L（EDTA抗凝管），離心15 min，取上清凍存（置于-80℃冰箱）。全部實驗結束時，采用酶聯免疫吸附法（ELISA）測定血漿ET-1及IL-6水平。

1.3 超聲檢查 初始及第4周、8周、12周，采用高頻血管探頭（7 MHz～10 MHz）檢測實驗動物腹主動脈，觀察管腔有無狹窄、管壁內膜有無增厚及斑塊形成。

1.4 病理檢查 實驗結束（第12周）時，處死實驗動物，分離腹主動脈，常規HE染色，光鏡觀察血管橫切面硬化情況。

1.5 統計學處理 應用SPSS13.0軟件，計量資料以均數±標準差±s）表示，采用雙時間因素重復測量法分析。P＜0.05為有統計學意義。

2 結 果

實驗結束時，10只動物腹主動脈出現粥樣硬化。動脈硬化過程中，脂餐負荷前后ET-1、IL-6情況詳見表1、表2。

表1 動脈硬化過程中脂餐負荷前后ET-1變化±s） ng／L

表1 動脈硬化過程中脂餐負荷前后ET-1變化±s） ng／L

時間 n 空腹 餐后2 h 餐后4 h 餐后6 h 餐后8 h初始 10 102.86±5.91 114.29±18.151） 128.89±12.551） 122.82±18.791） 121.67±16.791）第4周 10 134.89±11.742） 142.82±6.271） 136.65±5.381） 137.59±3.621） 130.05±15.071）第8周 10 129.19±2.062） 135.54±15.271） 134.95±9.561） 128.83±9.231） 119.84±6.911）第12周 10 128.21±1.612） 146.20±7.921） 128.41±11.56 120.55±7.53 126.42±8.21同一周不同時間餐后與空腹相比，1）P＜0.05；不同周同一時點與初始相比，2）P＜0.05

表2 動脈硬化過程中脂餐負荷前后IL-6變化±s） ng／L

表2 動脈硬化過程中脂餐負荷前后IL-6變化±s） ng／L

時間 n 空腹 餐后2 h 餐后4 h 餐后6 h 餐后8 h初始 10 96.84±18.97 85.05±12.58 98.95±9.42 87.67±25.19 94.61±28.05第4周 10 97.14±20.85 93.96±7.64 104.35±8.17 107.73±26.41 103.80±27.41第8周 10 89.22±23.17 85.24±23.61 71.59±24.081） 87.91±23.43 90.20±10.25第12周 10 85.89±23.91 67.43±14.03 58.29±11.731） 71.01±23.97 76.20±27.23同一周不同時間餐后與空腹相比，1）P＜0.05

3 討 論

餐后血脂與動脈硬化的關系已引起了人們普遍關注，已有學者從流行病病學、臨床及動物實驗等多方面證實：餐后代謝紊亂與動脈硬化密切相關。眾所周知，內皮損傷是動脈粥樣硬化的始動因素，同時動脈硬化又是一種炎癥反應。

內皮損傷時，舒血管物質減少，縮血管物質增加（ET-1等）。早期內皮功能缺損的機制是炎癥反應、血栓形成及細胞增殖，而ET-1可干擾此過程。現已證實，內皮功能可能與動脈硬化的損傷有關。Ceriello等［2］證實，糖尿病患者脂餐可影響內皮功能損傷和炎癥。Giannattasio等［3］證實一次高脂飲食引起急性高三酰甘油血癥，明顯損害內皮功能，此損害對在有血脂紊亂者比基礎血脂正常者更明顯。但關于脂餐負荷對于無AS者、AS者內皮功能的影響以及AS不同階段脂餐負荷后對內皮功能影響鮮有研究。本研究發現，隨著持續高脂喂養及AS進展，ET-1水平逐漸升高，脂餐負荷后血漿中ET-1水平明顯增加，這與上述既往研究結果相符。此外，本研究發現，初始時（無動脈硬化階段）脂餐負荷后4 h ET-1增加最明顯，且隨著AS進展脂餐負荷后2 h ET-1增加最明顯，隨著AS進展，餐后內皮功能損傷出現時間提前，提示AS者的內皮功能更易于受脂餐負荷損傷，此類臨床患者應避免高脂負荷飲食。

炎癥是AS的驅動力，餐后低水平炎癥即可促進內皮功能損傷，促炎因子（如IL-6）在此過程中起著主要作用［4，5］。IL-6為一種多效性促炎因子，AS早期可促進脂質條紋形成，加速有AS傾向的脂質損害進展［6］。Christian等［7］證實，血脂紊亂者其血管炎癥水平與冠狀動脈的嚴重程度有關，而與內皮功能無關。Manning等［8］發現，腹型肥胖女性脂餐后4 h～6 h IL-6水平明顯增加，而體型瘦者餐后4 h增加明顯。此外，Blackburn等［9］發現，腹腹型肥胖者脂餐負荷后IL-6升高。Magné等［10］證實，給予健康鼠一次飽和脂肪酸飲食，餐后2 h IL-6顯著增加。Poppitt等［11］發現，健康男性脂餐負荷后6 h IL-6增加。目前關于脂餐負荷對AS過程中炎癥反應的影響還未見報道。本研究發現，實驗初始（無動脈硬化時）脂餐負荷后2 h，IL-6略降低，4 h、8 h略增加（4 h最明顯）；4周時脂餐負荷后4 h、6 h、8 h IL-6略增加（6 h明顯）；12周時脂餐負荷后4 h IL-6明顯減少，這提示脂餐負荷對AS早期的炎癥反應影響較大。

此外，由于本研究受樣本量和時間所限，關于脂餐負荷對血管內皮功能和AS早期炎癥反應的影響，尚需進一步深入研究。

［1］ Verma S，Li SH，Badiwala MV，et al.Endothelin antagonism and interleukin-6 inhibition attenuate the proathergenic effects of C-reactive protein［J］.Circulation，2002，105（16）：1890-1896.

［2］ Ceriello A，Assaloni R，Da Ros R，et al.Effect of atorvastatin and irbesartan，alone and in combination，on postprandial endothelial dysfunction，oxidative stress，and inflammation in type 2 diabetic patients［J］.Circulation，2005，111（19）：2518-2524.

［3］ Giannattasio C，Zoppo A，Gentile G，et al.Acute effect of high-fat meal on endothelial function in moderately dyslipidemic subjects［J］.Epub Arterioscler Thromb Vasc Biol，2005，25（2）：406-410.

［4］ Ross R.Atherosclerosis—an inflammatory disease［J］.New England Journal of Medicine，1999，340（2）：115-126.

［5］ Hansson GK.Inflammation，atherosclerosis，and coronary artery disease［J］.N Engl J Med，2005，352（16）：1685-1695.

［6］ Han SN，Leka LS，Lichtenstein AH，et al.Effect of hydrogenated and saturated，relative to polyunsaturated，fat on immuneand inflammatory responses of adults with moderate hypercholesterolemia［J］.J Lipid Res，2002，43（3）：445-452.

［7］ Christian F.Inflammation but not endothelial dysfunction is associated with the severity of coronary artery disease in dyslipidemic subjects［M］.Hindawi Publishing Corporation Mediators of Inflammation Volume，2009：469.

［8］ Manning PJ，Sutherland WH，McGrath MM，et al.Postprandial cytokine concentrations and meal composition in obese and lean women［J］.2008，16（9）：2046-2052.

［9］ Blackburn P，Després JP，Lamarche B.Postprandial variations of plasma inflammatory markers in abdominally obese men［J］.Obesity（Silver Spring），2006，14（10）：1747-1754.

［10］ MagnéJ，Mariotti F，Fischer R，et al.Early postprandial lowgrade inflammation after high-fat meal in healthy rats：Possible involvement of visceral adipose tissue［J］.J Nutr Biochem，2010，21（6）：550-555.

［11］ Poppitt SD，Keogh GF，Lithander FE，et al.Postprandial response of adiponectin，interleukin-6，tumor necrosis factor-alpha，and C-reactive protein to a high-fat dietary load［J］.Nutrition，2008，24（4）：322-329.