胸腔積液中 CEA、CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag水平變化及意義

陳 新，李寶重，何 明，朱 輝，徐新建，李 飛，崔 興

(河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院，石家莊050011)

不明原因的胸腔積液的預(yù)后主要與原發(fā)疾病有關(guān)，常見病因有結(jié)核性、炎癥性和惡性腫瘤等，其中以肺癌等惡性腫瘤所致癌性胸腔積液者預(yù)后最差［1］。胸腔積液的診斷方法有很多種，如細(xì)胞免疫組化、染色體分析、組織培養(yǎng)技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)等，但這些方法技術(shù)復(fù)雜，對診斷的幫助有限。近年來出現(xiàn)的胸腔鏡技術(shù)可提高診斷率，但由于其有創(chuàng)性及需要全身麻醉，很難在臨床廣泛開展［2］。因此，目前胸腔積液的鑒別診斷仍存在一定困難，過多依賴細(xì)胞學(xué)檢查。但細(xì)胞學(xué)檢查敏感性低，常需要反復(fù)多次檢查，很多情況下延誤治療［3］。利用腫瘤標(biāo)志物鑒別胸腔積液為臨床上提供了一種簡便的診斷方法，尤其是多種標(biāo)志物的聯(lián)合應(yīng)用，大大提高了對癌性胸腔積液診斷的敏感性，縮短診斷前患者的等待時間，為盡早實施針對性治療創(chuàng)造了條件［4］。本研究觀察了觀察胸腔積液中癌胚抗原(CEA)、細(xì)胞角蛋白19的可溶性片段(CYFRA21-1)、神經(jīng)元特異性烯純化酶(NSE)、鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(SCC-Ag)水平變化，探討其聯(lián)合檢測對鑒別癌性和非癌性胸腔積液的敏感性、特異性及準(zhǔn)確性。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 2011年3月～2003年1月河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院收治的胸腔積液患者113例，男73例，女40例;年齡32～83歲，中位年齡61歲;均經(jīng)支氣管鏡活檢、針吸細(xì)胞學(xué)檢查、結(jié)核菌素試驗或胸腔積液細(xì)胞學(xué)及抗酸染色等手段明確診斷。其中癌性胸腔積液78例(肺癌75例，惡性胸膜間皮瘤2例，惡性黑色素瘤1例)，非癌性胸腔積液35例(結(jié)核17例，膿胸10例，肺炎8例)。

1．2 方法

1．2．1 標(biāo)本收集 患者取半坐位或騎跨位，根據(jù)胸片、胸部CT、B超引導(dǎo)下定位及體格檢查等方法確定穿刺點(diǎn)，多選擇腋后線7、8肋間或B超引導(dǎo)定位的穿刺點(diǎn)。常規(guī)消毒、鋪孔巾、利多卡因局麻;穿刺針負(fù)壓進(jìn)入胸腔，回抽出胸腔積液并確認(rèn)通暢，可見液體流出;抽出第1管胸腔積液棄去，再抽出胸腔積液20 mL送檢;胸膜穿刺抽取的胸腔積液標(biāo)本，均在1 h內(nèi)離心，取上清于－40℃保存。術(shù)后穿刺點(diǎn)稍加壓包扎，并注意觀察局部疼痛和滲出情況，必要時做對癥處理。

1．2．2 檢測方法 采用免疫微粒電化學(xué)發(fā)光法檢測胸腔積液中的 CEA、CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag。儀器為美國羅氏公司Cobas e601型全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)，檢測試劑為羅氏公司試劑盒，操作嚴(yán)格按照儀器和試劑盒操作說明書進(jìn)行。胸腔積液中4種標(biāo)志物的臨界值分別為CEA＜5 ng/mL、CYFRA21-1 ＜3．3 ng/mL、NSE ＜ 6．3 ng/mL、SCCAg＜1．5 ng/mL。

1．2．3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS17．0統(tǒng)計軟件。敏感性=癌性胸腔積液患者中陽性例數(shù)/癌癥胸腔積液患者總數(shù);特異性=非癌性胸腔積液患者中陰性例數(shù)/非癌性胸腔積液患者總數(shù);準(zhǔn)確性=(癌性胸腔積液患者中陽性例數(shù)+非癌性胸腔積液患者中陰性例數(shù))/患者總數(shù)。組間數(shù)據(jù)比較采用Wilcoxon秩和檢驗，所得數(shù)據(jù)以中位數(shù)表示，準(zhǔn)確率的比較采用χ2檢驗。P≤0．05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2．1 癌性與非癌性胸腔積液中CEA、CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag水平比較 癌性胸腔積液中CEA、CYFRA21-1、NSE、SCC-Ag 分別為 19．60、12．60、13．20、3．07 ng/mL，非癌性胸腔積液中分別為 2．20、3．37、4．10、3．50 ng/mL;癌性胸腔積液組中 CEA、CYFRA21-1水平顯著高于非癌性胸腔積液，P均＜0．05;NSE、SCC-Ag水平高于非癌性胸腔積液，但P均 ＞0．05。

2．2 胸腔積液中CEA、CYFRA21-1、NSE和 SCC-Ag的診斷價值 CEA聯(lián)合CYFRA21-1診斷惡性胸腔積液的敏感性、特異性、準(zhǔn)確性分別為 86．2%、63．1%、81．9%，CEA 分別為 68．6%、65．4%、58．1%，NSE 分別為 22．7%、25．9%、19．3%，CYFRA21-1 分別為78．1%、73．1%、77．0%，SCC-Ag 分別為 34．0%、29．4%、33．6%;CEA、CYFRA21-1 聯(lián)合檢測診斷惡性胸腔積液的準(zhǔn)確性高于單個指標(biāo)(P 均 ＜0．05)。

3 討論

胸腔積液一般可以分為癌性與非癌性胸腔積液兩大類，其治療方法迥然不同，預(yù)后也差別很大。癌性與非癌性胸腔積液的鑒別診斷有一定困難，目前診斷上多依賴細(xì)胞學(xué)檢查，但敏感性不高。以往的研究多通過化驗患者血液中的標(biāo)志物，對胸腔積液的性質(zhì)進(jìn)行鑒別。而腫瘤發(fā)生、發(fā)展是一個多階段的過程，在腫瘤早期分泌的標(biāo)志物濃度很低，檢測陽性率較低。而胸腔積液往往是與腫瘤細(xì)胞直接接觸，腫瘤細(xì)胞分泌的蛋白或者糖類抗原可直接檢測得到。

免疫微粒電化學(xué)發(fā)光法運(yùn)用經(jīng)典的免疫學(xué)原理進(jìn)行檢測，以磁性微粒子為載體，最大限度擴(kuò)大包被面積，以堿性磷酸酶標(biāo)記抗原、抗體，采用最靈敏的發(fā)光底物AMPP，具有高度特異性，且不受黃疸、脂血、溶血等因素影響。該技術(shù)應(yīng)用磁性微粒子包被技術(shù)大大提高檢測的靈敏度，使檢測結(jié)果更穩(wěn)定可靠。

因此，免疫微粒電化學(xué)發(fā)光檢測胸腔積液中的腫瘤標(biāo)志物為臨床上鑒別胸腔積液提供了一種方法，有望提高患者的診治效率。細(xì)胞角蛋白是形成上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)蛋白之一中間絲的亞單位，根據(jù)其分子量和雙向電泳中等電點(diǎn)的不同，可分為20種不同類型，對肺癌的診斷有較大意義，尤其在肺鱗癌中高表達(dá)［5］。本研究結(jié)果表明，癌性胸腔積液中CYFRA21-1水平顯著高于非癌性胸腔積液。CEA是一種富含多糖的蛋白復(fù)合物，在某些惡性腫瘤患者中其含量可異常升高，對腫瘤的診斷及預(yù)后、復(fù)發(fā)判斷有意義。CEA明顯增高見于70%的肺癌［6］。本研究結(jié)果顯示，癌性胸腔積液中CEA水平顯著高于非癌性胸腔積液。NSE是神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞所特有的一種酸性蛋白酶，大約70%的小細(xì)胞肺癌患者中其含量升高［7］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，兩組胸腔積液NSE水平差別不大，可能與樣本小細(xì)胞肺癌的比例較低有關(guān)。SCC-Ag是一種最早用于診斷鱗癌的腫瘤標(biāo)志物，且特異性很好。它最初從宮頸癌組織中分離獲得，屬于絲氨酸蛋白酶抑制劑家族，廣泛存在于不同器官的正常組織中(含量極微)和惡性病變的上皮細(xì)胞中［8］。本研究發(fā)現(xiàn)，兩組胸腔積液的NSE水平?jīng)]有顯著性差異。

胸腔積液標(biāo)志物單項檢查在鑒別胸腔積液性質(zhì)方面存在一定的局限性，多種標(biāo)志物聯(lián)合應(yīng)用會大大提高診斷的敏感性和特異性［9］，尤其是細(xì)胞學(xué)及細(xì)菌檢查陰性結(jié)果時。本研究發(fā)現(xiàn)，CEA、CYFRA21-1聯(lián)合指標(biāo)鑒別診斷惡性胸腔積液的敏感性和特異性高于、NSE和SCC-Ag，而準(zhǔn)確性顯著高于上述單個指標(biāo)。因此，胸腔積液中CYFRA21-1和CEA聯(lián)合檢測提高了診斷的準(zhǔn)確性，對良、惡性胸腔積液的鑒別有較大的實用價值。

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