MiR143和C—Myc在直腸腺癌中的表達及意義

錢小華

【摘要】 目的 研究觀察MiR143和C-Myc在直腸腺癌中的表達意義，以供直腸腺癌病理診斷給予參考。方法 選擇2010年9月——2012年12月我院收治的直腸腺癌30例、直腸良性病變患者30例為臨床研究對象，對所有患者均取病理組織，檢測MiR143和C-Myc。觀察比較檢測結果。結果 直腸腺癌MiR143表達明顯低于直腸良性病變組，P<0.05，差異有統計學意義。直腸腺瘤組C-Myc陽性率表達高于直腸良性病變患者，組間比較，P<0.05，差異有統計學意義。結論 直腸腺癌患者有MiR143的低表達和C-Myc的高表達，有助于對直腸腺癌患者給予早期輔助診斷。

【關鍵詞】 MiR143；C-Myc；直腸腺癌；病理診斷

直腸癌是臨床常見的一種消化系統惡性腫瘤，隨著我國人們生活水平的逐年提高，患者飲食結構的改變，導致直腸癌在我國發病率呈現了逐年上升的趨勢，嚴重地威脅人類健康。而直腸癌患者早期多無明顯的臨床癥狀，因此臨床診斷多被延誤，一旦出現有臨床癥狀時多已經到了癌癥的中晚期。我院本次實驗研究分析MiR143和C-Myc在直腸腺癌中的表達意義，報告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 擇2010年9月——2012年12月我院收治的直腸腺癌30例、直腸良性病變患者30例為臨床研究對象。直腸腺癌患者30例中排出有遠處轉移，腫瘤管飯浸潤鄰近器官的患者。

直腸腺癌30例中，男16例，女14例，患者年齡在47-76歲之間，平均年齡為70.93±7.84歲。直腸良性病變患者30例中，男17例，女13例，患者年齡在48-77歲之間，平均年齡為70.41±7.04歲。兩組患者的一般資料差異不明顯，P>0.05，差異無統計學意義，具有可比性。

1.2 方法 在石蠟標本中提取總RNA，首先加入純二甲苯，混勻后溶解標本的石蠟，在室溫下進行高速離心，沉淀組織后棄去二甲苯，加入無水乙醇混勻，室溫下進行高度離線，棄去乙醇后加入無水乙醇，重復操作2次以上[1]。隨后加入緩沖液和蛋白酶，混勻后孵育，加入無水乙醇混勻后棄去管內液體，重復操作到所有液體都可以通過FilterCartridge。加入Wash Buffer等，進行核酸蛋白檢測儀檢測，采用實時熒光定量PCR方法。

首先對石蠟切片進行脫蠟，進行抗原修復，加入血清封閉液，吸干組織周圍多余的血清，擦干PBS，使用DW清晰，在鏡下控制顯色的程度，使用蘇木素對細胞核復染，烤干并封片。其中細胞漿為深棕色或棕褐色為陽性細胞[2]，每張切片陽性細胞的陽性程度包括：無色0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分，根據著色的面積：無色為0分，著色在1/3以下為2分，1/3-2/3為2分，3分為2/3以上，將兩項之和作為判斷結果，其中3分以上為陽性[3]。

1.3 數據處理 本次實驗的所有數據處理均采用SPSS19.0軟件包進行處理，檢驗水準α為0.05，以95%為可信區間，計算結果中P<0.05時，為樣本差異明顯且有統計學意義。

其中MiR143的檢測結果為計量資料，組間對比方法為t檢驗；C-Myc陽性率為計數資料，組間比較使用χ2檢驗。

2 結 果

直腸癌標本MiR143Ct值高于直腸良性病變標本，說明直腸腺癌MiR143表達明顯低于直腸良性病變組，P<0.05，差異有統計學意義。直腸腺瘤組C-Myc陽性率表達高于直腸良性病變患者，組間比較，P<0.05，差異有統計學意義，見表1。

3 討 論

直腸癌是臨床較為常見的一種惡性腫瘤，在1974年有學者提出直腸腺瘤—直腸腺癌的序貫學說，認為多數直腸癌起源于直腸腺瘤。直腸癌為多基因且多步驟的致癌過程，包括癌基因的激活及癌基因的抑制失活。

MiRNA為非小編碼的RNA分子，包括18-25個核苷酸組成，在轉錄后水平調控基因的表達，在動物的生長發育、分化、細胞增殖及凋亡等均有租用。MiR143是定位在人類染色體5q32的基因，成熟序列為5′—UGAGAUGAAGCACUGUAGCUC-3′.我院本次實驗使用實時定量檢測技術PCR對直腸腺癌、直腸良性病變組的患者組織檢測了MiR143，結果顯示，直腸腺癌組低于直腸良性病變組，組間比較，P<0.05，差異有統計學意義，說明MiR143在直腸癌患者中有較為明確的表達，可以促進細胞的增殖，誘發癌變，對癌癥起到了明顯的促進作用。且大量研究還發現，MiR143為一種抑癌基因，充分地發揮了抑癌基因的作用。

C-Myc為原癌基因，為多功能基因，可以在細胞周期發生變化，并參與到細胞生長代謝，可以刺激血管的生成和細胞惡性轉化，對細胞凋亡和分化均有重要的作用[4]。C-Myc編碼出的蛋白可以結合靶基因的啟動子，進而刺激細胞的增生，促進細胞凋亡。在直腸腺癌中C-Myc蛋白的高表達，說明C-Myc在直腸腺癌中的激活明顯，對細胞凋亡產生了一定的抑制作用，并會延長腫瘤細胞的生存，增加其基因突變的機會[5]，進而對直腸腺癌的發生和發展起到了重要的作用。在癌變的過程中，C-Myc的大量表達，也會促進有癌變傾向的細胞發生明確的凋亡，且細胞增殖速度明顯高于細胞凋亡速度。

綜上所述，直腸癌MiRNA的發生和發展有非常重要的作用，且直腸腺癌患者有MiR143的低表達和C-Myc的高表達，有助于對直腸腺癌患者給予早期輔助診斷。

參考文獻

[1] 陳少鍇.研究miR-1256和miR143基因對人腎透明細胞癌的調控作用[J].中國醫藥指南，2012，10（21）：105-106

[2] 謝希暉，王榮，賈正平等.毛細管電泳法檢測癌基因C-myc胃癌中基因點突變[J].分析化學，2011，39（11）：1695-1700.

[3] 周炳娟，張金庫，趙文明等.基底細胞樣乳腺癌中CIP2A及c-myc蛋白表達及意義[J].臨床與實驗病理學雜志，2012，28（9）：966-969.

[4] 劉香娟，李福年，姜丹丹等.非p53依賴通路c-myc基因對p14ARF基因的調控及細胞凋亡的誘導[J].中華醫學雜志，2012，92（30）：2140-2143.

[5] 趙云霞，龔曉萌，崔芳芹等.乳腺癌中PTEN、Rb、C-myc的異常表達及其臨床意義[J].中國老年學雜志，2012，32（12）：2531-2533.