Rh血型弱D表型致新生兒溶血病及換血治療一例

李世祥等

【關鍵詞】 Rh血型；溶血病；弱D

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2013.06.148 文章編號：1004-7484（2013）-06-2992-02

Rh血型系統是目前已知的32個人類紅細胞血型系統中最復雜的一個。Rh血型由于其D抗原的強免疫原性而使RhD血型最具有臨床意義。RhD血型具有多態性，除RhD陽性和RhD陰性外，還存在多種變異體，包括弱D、部分D及DEL型。現已有弱D、部分D及DEL型獻血者所獻血液使RhD陰性受血者產生抗-D報道[1-3]。筆者在1例新生兒溶血病換血治療交叉配血實驗中，發現產婦為Rh弱D表型，產生抗-D抗體，引起新生兒溶血病，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 對象 產婦張某，36歲，漢族。孕3產1，既往人流2次；現第3胎足月剖宮產。張某之子出生后皮膚鞏膜黃疸。總膽紅素為530umol/L，臨床診斷為新生兒溶血病，急需換血治療，因配血困難送檢。

1.2 主要試劑和儀器 四批抗-D單克隆抗體，譜細胞（上海血液生物醫藥有限責任公司）；Rh基因分型試劑（美國G&T公司）；DNA提取試劑盒（北京天為時代生物技術有限公司）。日本久保田KUBOTAKA-2200細胞洗滌離心機，美國ABI公司PE-9700擴增儀，美國UVP公司UVPGDS-8000凝膠成像系統和DYY-6B型穩壓電泳儀。

1.3 方法

1.3.1 血清學方法 ABO血型鑒定采用試管法；RhD血型鑒定選用4批不同廠家，不同批號的抗D試劑進行抗人球蛋白方法檢測；抗體篩選及鑒定采用抗人球蛋白方法用10個O型譜細胞和2附加的特殊表型細胞做抗體鑒定。具體方法參見文獻[4]。

1.3.2 Rh系統基因分型方法 采用PCR-SSP方法，操作嚴格按照說明書操作。150V電泳15-20min，在紫外光下拍照記錄。

2 結 果

2.1 ABO血型 產婦張某血型為B型，患兒為B型。

2.2 Rh血型 產婦RhD血型在四批試劑鹽水介質均為陰性，抗球蛋白介質中，兩批陽性，兩批陰性。Rh因子為ce；患兒RhD血型為正常陽性，Rh因子為ce。基因分型結果同血清學結果，產婦張某含有RHD基因。結果見圖1。

2.3 血型抗體檢測 產婦和患兒血清存在游離抗體。產婦血清和患兒血清與1-10號譜細胞反應，鹽水介質中無凝集，抗人球蛋白介質中7號和9號不凝，其余都凝集。自身細胞均無凝集。增加11號Ce表型和12號cE表型細胞，確定抗體類型為抗-D抗體，見表1。采用間接抗人球蛋白方法，抗-D抗體效價為8。

2.4 交叉配血試驗 與5例B型RhD陰性，表型為ce獻血員進行交叉配血主次測均相合。采用B型Rh（D）陰性血400ml進行臍靜脈或外周靜脈同步換血技術換血治療。

3 討 論

Rh血型是輸血醫學重要的血型系統，主要包括D、c、c、E和e等5種抗原，其中D抗原具有很強的免疫原性，是引起新生兒溶血病的主要血型抗原，是最具臨床意義的Rh因子。弱D個體無論作為供者或是受者均具有臨床意義。對于弱D孕婦妊娠Rh陽性胎兒或Rh陰性孕婦妊娠弱D型胎兒時必須實施Rh同種免疫監護[5]。

本次報道先證者為弱D孕婦，但是由于多次妊娠產生抗-D抗體。IgG抗D所致新生兒溶血，病情重，黃疸進展很快，如治療不及時可致核黃疸甚至死亡。Rh系統新生兒溶血病換血治療原則是ABO血型同孩子，Rh血型同母親。本例患者是B型，母親是弱D表型。本例采用B型RhD陰性血進行的換血治療。換入血液可換出大量血清中非結合膽紅素，降低血清膽紅素濃度，防止核黃疸發生。同時糾正貧血，防止心力衰竭。

由于Rh血型系統具有豐富而復雜的多態性和人種、民族等的差異，所以建立正確、準確的檢測D變異體的基因分型策略、指導臨床輸血工作和新生兒溶血病等疾病的預防研究都有著重要的意義。

參考文獻

[1] Wagner FF，Gassner C，Muller，et al.Molecular basis of weak D phenotypes.Blood，1999，93：385-393.

[2] Legler TJ，Mass JH，Blaschke V，et al.RHD genotyping in weak D phenotypes by multiple polymerase chain reations.Transfusion，1998，8（5）：434-440.

[3] Kyenog-Hee，Kim，Kyung-Eum Kim：Primary anti-D immunization by DEL red blood cells.Korean J Lab Med，2009，29：361-365.

[4] 葉應嫵，王毓三.全國臨床檢測操作規程[M].南京：東南大學出社，1991：1052-1053.

[5] 熊文，秦建江，劉艷，等.一個弱D15型家系研究.中華醫學遺傳學雜志，2007，2（24）：35-37.