草莓紅頰的組培快繁與扶苗移栽技術

賴小芳，項玉英，王伯誠，陳銀龍

(浙江省臺州市農業科學研究院，浙江 臨海 317000)

近年來，隨著臺州市草莓種植面積的不斷擴大、銷量不斷遞增，莓農迫切希望通過對草莓品種的更新換代來尋求該產業的利益最大化。紅頰草莓具有長勢旺、產量高、果型大、食味佳、外觀美觀、耐貯運和商品性好等優點，是很有發展前途的優良新品種［1］。自引進以來，面積逐年提升，種苗供不應求，深受莓農歡迎，目前已成為臺州市的當家品種。草莓繁殖主要通過匍匐莖分株繁殖提供種苗，繁殖系數低，易感染病毒，產量和品質下降，影響其經濟價值，成為阻礙草莓生產的主要問題。應用離體快繁技術不僅可以解決大量優質草莓種苗的供應，有利于品種提純和更新，而且還可用于脫毒和無病毒種苗繁殖，加快新品種推廣。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗選用仙居縣田市鎮提供的草莓新品種紅頰，取其長勢好、無病蟲健壯母株的匍匐莖尖作為外植體。

1.2 試驗方法

草莓莖尖誘導培養基為MS+6-BA 0.50mg·L-1+NAA 0.01mg· L-1［2］;增殖培養基為MS+NAA 0.02mg· L-1+6-BA(0.05，0.10，0.20，0.50，1.00，1.50mg·L-1)，共 6個;生根培養基分別為1/2MS+0.1%AC，1/2MS+NAA 0.02 ～ 0.05mg·L-1+0.1%AC、1/2MS+IBA 0.02 ～ 0.05mg·L-1+0.1%AC［3］，共 5 個上述培養基中添加白砂糖30 g·L-1、瓊脂粉5 g·L-1，pH值5.8;培養室培養溫度為 (23±2)℃，光照強度為1500 lx，光照時間為10 h·d-1。然后觀察記載采用不同組培技術的培養效果，最后將長根苗移栽到事先準備好的3種不同基質配比的穴盤里，觀察其移栽成活率。

移栽方法采用杭州錦海農業科技有限公司提供的金色3號育苗基質，草莓長根苗移栽到金色3號與珍珠巖按體積不同配比的基質中，移栽前將2種基質澆水拌均，移栽后再用灑水壺灑水定根，適當遮蔭，保持基質濕潤。

2 結果與分析

2.1 無菌苗的獲得與不定芽誘導

將選取的材料用自來水沖洗1 h，然后置于無菌操作臺上，用75%酒精振蕩消毒20 s，再用0.1%升汞加Twin-80消毒8min，最后用無菌水沖洗5～6次，然后在無菌條件下切取0.5 cm左右長的莖尖，分別接到事先配制好的誘導培養基上。15 d后基部即有愈傷組織形成，以后愈傷組織塊上慢慢分化出密密的綠色小芽，但這些小芽細弱且生長緩慢。

2.2 叢生芽的壯苗增殖培養

將叢生芽分割開來，分別接到不同的增殖培養基中，觀察在各培養基中的生長情況 (表1)。處理1與2在20 d后其基部就有多個增殖芽出現，生長較快、植株健壯。如將基部的幼芽切成單芽繼續繼代培養，以此方法反復繼代可獲取大量的增殖芽，增殖系數為4～5，且叢芽生長健壯濃綠，繼代周期適宜，一般為30～35 d;處理3與4上部零星葉片有玻璃化，生長較快;而6-BA濃度大于1.00mg·L-1的處理5與6形成的叢芽生長緩慢，莖葉變脆硬，易碎，繼代困難，盡至無法接種繼代，有效苗很少;隨著6-BA濃度的增加，玻璃化程度有加重趨勢，因此最適增殖培養基配方為MS+6-BA 0.10mg·L-1+NAA 0.02mg·L-1。此外，室內光照強度與培養溫度對試管苗生長影響也較大，如溫度超過25℃，玻璃苗現象嚴重，試管苗最適培養溫度為22 ～25℃，最適光照強度為1500 lx。

2.3 生根培養

把增殖培養基中的叢生植株取出，將叢芽分切成單芽轉接到各個生根培養基中，觀察它們的生長情況。從表2可以看出，紅頰草莓的增殖芽在添加激素IBA的處理4與處理5中生長快、長勢旺盛，25 d可長成高4～5 cm、具有5～6根左右新根的健壯植株，生根率達100%。而添加NAA則誘導了根部愈傷組織發生，方能生根，但根毛細弱，清洗麻煩且易傷害根系，移栽成活率較低，不適合作為生根培養基添加的激素。可見在1/2MS培養基中添加IBA可以促進生根［4］，提高平均根數，所以最適生根培養基為1/2MS+IBA 0.05mg·L-1+0.10%AC。

表1 不同激素濃度對試管苗增殖與株高的影響

表2 不同激素與濃度對誘導生根與長勢的影響

2.4 試管苗的移栽技術

將長根苗移至常溫條件下室內煉苗，接受窗外散射光照射，經過1周左右的鍛煉后，可見幼苗莖稈顏色變深，最好轉為紫紅色，表明幼苗已經具備適應外界環境的生理條件，此時即可選擇晴天進行移栽［5］。移栽時將培養瓶內的小苗輕輕取出，用清水將根部附著的瓊脂清洗干凈，盡量不傷及根系。

經試驗，紅頰草莓長根苗適宜移栽到金色3號與珍珠巖按體積比1∶2混合基質中，移栽前將2種基質澆水拌均，移栽后再用灑水壺灑水定根，適當遮蔭，保持基質濕潤，長根苗移栽成活率達100%，無根苗成活率也比較高 (表3)。

表3 不同種類基質配比對移栽成活率的影響

另據試驗經驗，放置穴盤苗的環境不容忽視，若直接放置在悶熱的連棟大棚或普通的塑料大棚里，即使蓋上遮陽網成活率也會很低。穴盤苗宜放置在尼龍薄膜小拱棚內，小拱棚兩頭揭開，一直保持空氣流暢，在小拱棚外面再搭置一層遮陽網，遮陽網高度適宜，以便于工作人員管理操作。放置穴盤的地面移栽的前1 d灌熱開水殺蟲消毒1次;移栽后若高溫天氣，每天揭膜噴水1次，若天氣比較陰涼，3～5 d噴1次水。

3 小結與討論

試驗結果表明，草莓紅頰莖尖誘導培養基為MS+6-BA 0.50mg·L-1+NAA 0.01mg·L-1，最適增殖培養基為 MS+6-BA 0.10mg·L-1+NAA 0.02mg·L-1，增殖系數可達4～5，生根培養基為1/2MS+IBA 0.05mg·L-1+0.1%AC。在此過程中，要防止試管苗玻璃化現象，措施是降低激素6-BA濃度，同時可結合降低室內培養溫度與光照強度;生根誘導階段，在1/2MS培養基中添加IBA可以促進生根，提高平均根數，而添加NAA則誘導了根部愈傷組織發生，雖大部分能生根，但根毛細弱，清洗麻煩且易傷害根系，移栽成活率較低，不適宜作為生根培養基添加的激素。

試驗中長根苗適宜移栽到金色3號與珍珠巖按體積比1∶2混合基質中，移栽成活率達到100%，甚至有些無根苗成活率也比較高。另外穴盤苗的放置環境與地面消毒也是不容忽視的一個重要環節。

［1］陳懷勐，高麗，路河，等.紅顏草莓莖尖組培脫毒苗技術研究 ［J］.生物技術，2011(1):6-8.

［2］郭月玲，解振強，王永平，等.我國草莓組織培養生產研究現狀及前景 ［J］.浙江農業科學，2010(6):12-13.

［3］譚文澄.觀賞植物組織培養技術 ［M］.北京:中國林業出版社，1997:143.

［4］孫永平，高年春，張瓊，等.紅頰草莓組培快繁技術研究［J］.江蘇農業科學，2011(5):63-64.

［5］狄文偉.草莓組織培養苗的馴化技術 ［J］.蔬菜，2010(7):11-12.