燙傷合劑的抗炎抑菌鎮痛實驗研究

黃 瑩 李明艷

廣西醫科大學第四附屬醫院藥劑科，廣西 柳州 545005

燙傷合劑的抗炎抑菌鎮痛實驗研究

黃 瑩 李明艷

廣西醫科大學第四附屬醫院藥劑科，廣西 柳州 545005

目的：探討本院制劑燙傷合劑的抗炎抑菌鎮痛活性作用。方法：采用二甲苯誘導小鼠耳廓腫脹試驗模型觀察抗炎作用，采用小鼠熱板試驗觀察鎮痛作用，采用紙片法測定體外抑菌試驗。結果：燙傷合劑對二甲苯誘導小鼠耳廓腫脹有明顯抑制作用 （P＜0.05），提高熱板致痛小鼠的痛閾值 （P＜0.05），采用紙片擴散法測定，燙傷合劑對金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌均具有抑菌作用，抑菌圈＞7 mm。結論：燙傷合劑具有抗炎抑菌鎮痛作用

燙傷合劑；抗炎；抑菌；鎮痛

1 材料

1.1 材料LRH－150R－生化培養箱（廣東省醫療廠），SW－CJ－2FD型雙人單面凈化工作臺。燙傷合劑 （廣西醫科大學第四附屬醫院本院制劑室，批號：20111023，紫花燒傷膏（山東華潤制藥有限公司，批號20110506）昆明種小鼠 （柳州醫學專科學校試驗動物中心），體重 （20±2）g。

1.2 實驗用菌株和培養基：金黃色葡萄球菌［CMCC（B）26003］，銅綠假單胞菌［CMCC（B）10104］，大腸埃希菌［CMCC（B）25921］，營養瓊脂培養基（北京奧康生物技術有限公司）。

2 方法和結果

2.1 抗炎作用［2］小鼠耳廓腫脹試驗：取小鼠30只，♀♂各半，分為模型組 （生理鹽水）、燙傷合劑組和紫花燒傷膏對照組。分別將受試物均勻涂于小鼠右耳正反面，燙傷合劑給藥量為每次2m l，給藥面積約2cm2，左耳作為對照，給藥5次，每次間隔1h。模型組與紫花燒傷膏（0.032g／cm2）對照組也給藥5次。末次給藥后1.5h，各小組的右耳以溫水洗去殘余藥物，用干棉球擦凈，然后將0.05mL二甲苯涂于小鼠右耳廓前后兩面致炎，左耳不涂為對照，致炎30min處死小鼠，用直徑為6mm的打孔器在兩耳相同的部位取下左、右圓耳片，稱重，計算左、右耳片質量差為腫脹度。腫脹抑制率 （%）＝（模型組腫脹度－給藥組腫脹度）／模型組腫脹度×100%。結果燙傷合劑組腫脹度較模型組明顯減少（P＜0.05），見表1

表1 燙傷合劑對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響 （±s，n＝10）

表1 燙傷合劑對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響 （±s，n＝10）

注：與模型組比較，aP＜0.05；與對照組比較，bP＜0.05。

10ml 12.4±1.1 5.2±0.6 7.2±0.8 －燙傷合劑組 10ml 9.0±1.2 5.3±0.8 3.7±1.2a 48.61紫花燒傷膏組 0.32g 9.2±1.1 5.1±0.7 4.1±1.5b／%模型組組別 劑量 右耳／mg 左耳／mg 腫脹度／mg 抑制率43.06

2.2 鎮痛作用［2］小鼠熱板法致痛試驗：調恒溫水浴溫度至55～56℃，將鐵板置于恒溫水浴上預熱10min。對小鼠進行痛閾值篩選 （以5－30S內舔后足者為及格，跳躍者棄之不用），挑選表現合格的30只雌性小鼠，隨機均分成模型組（生理鹽水），燙傷合劑組和紫花燒傷膏組。分別將受試物涂于四足掌，模型組、燙傷合劑組給藥量為每次2ml，紫花燒傷膏組給藥量為每次0.032g*cm－2，給藥面積約1cm2，涂藥5次，每次間隔均為30min。各組動物末次給藥后30、75、120min分別測定一次痛閾值，如痛閾值超過60s，則按60s計。結果表明，燙傷合劑組動物的痛閾高于模型組，尤其是用藥75min時兩組差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2

表2 燙傷合劑對小鼠熱板試驗的影響 （±s，n＝10）

表2 燙傷合劑對小鼠熱板試驗的影響 （±s，n＝10）

注：與模型組比較，aP＜0.05。

10ml 16.2±1.3 16.8±1.1 16.3±1.7 17.1±1.9燙傷合劑組 10ml 17.3±1.4 27.5±1.5 33.8±3.8a 31.8±4.8紫花燒傷膏組30min 75min 120min模型組組別 劑量 給藥前痛閾值0.16g 14.1±1.4 21.5±2.4 25.9±3.7 23.8±3.5

2.3 抑菌作用確定［3－4］濾紙片的制備：取無菌并干燥的濾紙片，制成6mm的小圓紙片，投入燙傷合劑浸泡2小時，然后將濾紙片平放于清潔的無菌平皿內，開蓋置恒溫箱（37℃）中烤干。每4片 （塊）一組。陰性對照樣片的制備：取無菌干燥濾紙片，每片滴加無菌蒸餾水20μl，干燥后備用。金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌三種試驗菌的接種：用無菌棉拭子蘸取濃度為5×105cfu／m l～5×106cfu／ml試驗菌懸液，在營養瓊脂培養基平板表面均勻涂抹3次。每涂抹1次，平板應轉動60°，最后將棉拭子繞平板邊緣涂抹一周。蓋好平皿，置室溫干燥5min。燙傷合劑樣片貼放：每次試驗貼放1個染菌平板，每個平板貼放4片試驗樣片，1片陰性對照樣片，共5片。用無菌鑷子取樣片貼放于平板表面。各樣片中心之間相距25mm以上，與平板的周緣相距15mm以上。貼放好后，用無菌鑷子輕壓樣片，使其緊貼于平板表面。蓋好平皿，置37℃溫箱，培養16h～18h觀察結果。用游標卡尺測量抑菌環的直徑 （包括貼片）并記錄。試驗重復3次。結果金黃色葡萄球菌抑菌圈分別為（12.58±0.35）、 （11.99±0.23）、（12.10±0.31）mm；銅綠假單胞菌抑菌圈分別為為（7.52 ±0.31）、（7.66±0.21）、（7.75±0.22）mm；大腸埃希菌抑菌圈分別為（10.10±0.22）、（10.22±0.12）、（10.56± 0.24）mm。

觀察標準：抑菌圈＞7mm，表示有抑菌作用，可見燙傷合劑具有抑菌或殺菌作用。

2.4 數據統計處理采用SPSS10.0統計軟件進行分析，兩兩比較用t檢驗。

3 討論

燙傷合劑經過多次HPLC法檢測出多種有效成分［5－7］。虎杖主要成分為白黎蘆醇苷具有抗菌作用，金銀花主要成分是綠原酸具有抗炎抑菌作用。兩面針成分為氯化兩面針堿具有抗炎和止痛作用地榆含多種鞣質成分具有涼血止血收斂的功效。十大功勞含小檗堿具有抑菌松弛立毛肌的痙攣而產生止痛作用。經過實驗證明，以上幾味中藥經制劑后，有明顯的抗炎止痛，活血化瘀，防止創面感染的功效，為臨床應用提供實驗依據。用于臨床Ⅰ度、Ⅱ度燒燙傷取得較好的療效［8］。

［1］肖萍.燙傷合劑的制備及療效觀察［J］.時珍國醫國藥，2007.18（3）：655－656.

［2］盛國榮.復方利多卡因乳膏的抗炎鎮痛和抗過敏止癢的實驗觀察 ［J］.中國醫院藥學雜志2010.30（3）：217－220.

［3］歐陽溫漢，范巧等.黃柏體外抑菌作用研究 ［J］.時珍國醫國藥，2006.17（5）：759－760.

［4］倪語星.抗微生物藥物敏感性試驗規范 ［M］.上海，上海科學技術出版社，2009.

［5］李錦燊，劉曉宇.高效液相色譜法測定燙傷合劑中白黎蘆醇苷的含量［J］.現代中醫藥，2006，26（1）：67－68.

［6］王亞洲.HPLC法同時測定燙傷合劑中綠原酸、虎杖苷、小檗堿的含量［J］.中國藥師，2012，15（7）：993－995.

［7］王亞洲.燙傷合劑中沒食子酸和綠原酸的測定 ［J］.中國民族民間醫藥2012，21（9）：45－46.

［8］王亞洲.燙傷合劑治療燒燙傷58例臨床療效觀察 ［J］.中國現代醫藥雜志2012.14（8）：77－78.

R285.5

A

1007－8517（2013）17－0016－02燙傷合劑是廣西醫科大學第四附屬醫院根據中醫藥理論自擬的處方，由該制劑室生產［1］，由虎杖、兩面針、地榆、金銀花、十大功勞中藥組成，用于治療燒燙傷治療。現對燙傷合劑抗炎抑菌鎮痛活性作用進行藥理實驗研究，為臨床應用提供資料。

2013.07.07）