骨橋蛋白在胸腺瘤組織中的表達及臨床病理意義

林春華，黃 明

（1.贛州衛生學校護理系外科護理教研室；2.贛南醫學院第三附屬醫院泌尿外科，江西 贛州 341000）

骨橋蛋白（osteopontin，OPN）是在惡性轉化的上皮細胞株中發現的一種與腫瘤的發生發展密切相關的磷酸蛋白，表達于多種腫瘤組織中［1-2］。 關于OPN 在胸腺瘤組織中的表達情況的報道尚少。 筆者采用免疫組織化學SP 法檢測OPN 在胸腺瘤組織及正常胸腺組織中的表達情況，分析其與胸腺瘤臨床病理特征及預后的關系。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

收集2003 年1 月至2011 年6 月胸腺瘤切除標本的完整病例60 例（資料來源于贛州市人民醫院、贛南醫學院第一附屬醫院、贛州市腫瘤醫院）。 其中男37 例，女23 例，年齡21～70 歲，平均50.2歲。60例病例術前行胸部高分辨率CT 檢查均診斷為前上縱隔腫瘤，均未行放療和（或）化療。 術后按Masaoka分期標準［3］分為：Ⅰ期35 例、Ⅱ期14 例、Ⅲ期8 例、Ⅳ期3 例。 根據WHO 胸腺瘤組織分型標準［4］分型：A 型14 例、AB 型23 例、B 型21 例、C 型2 例。取同期18 例正常胸腺組織 （取自心臟病患者手術時）作為對照，其中男10 例，女8 例，年齡35～65歲，平均48.7 歲。

1.2 試劑

一抗兔抗人OPN 單克隆抗體、二抗生物素標記羊抗兔IgG 試劑盒、DAB 顯色試劑盒等試劑均購自武漢谷歌生物科技有限公司。

1.3 實驗方法

全部標本經10%中性甲醛溶液固定，常規石蠟包埋。制成4 μm 厚的連續切片2 張，一張供免疫組織化學染色，一張供HE 染色復核診斷。免疫組織化學采用SP 法，依據試劑盒說明書步驟進行；HE 染色按常規進行操作。

1.4 免疫組織化學結果判斷方法

采用雙盲法，由2 位病理科高年資醫師在光學顯微鏡下觀察免疫復合物沉積部位及免疫反應強度，當細胞膜和（或）細胞質出現棕黃色沉積視作陽性反應。 在400 倍視野下每張玻片選取5 個視野，采用武漢同濟千屏病理科圖文綜合信息管理系統HMIAS-2000 高清晰度彩色醫學圖文分析系統免疫組織化學測量程序測定陽性顆粒的平均灰度和陽性單位值。

1.5 統計學方法

2 結果

2.1 病理學結果

免疫組織化學SP 法檢測顯示OPN 主要表達在胸腺瘤腫瘤細胞的細胞膜上和細胞質中，少量彌散表達在炎癥細胞、腫瘤周圍基質及血管內皮細胞胞質中，見封四圖1。

2.2 OPN 在胸腺瘤組織不同分期及不同分型的表達

OPN 在胸腺瘤組織不同分期及不同分型中的陽性表達的差異均有統計學意義（均P＜0.01），見表1—2。

表1 OPN 在胸腺瘤組織不同分期中的表達情況

表2 OPN 在胸腺瘤不同分型中的表達情況

3 討論

胸腺瘤是成人最常見的前上縱隔腫瘤，約占50%［5］。目前臨床主要采用Masaoka 分期法［3］。Ⅰ期：包膜完整，鏡下無包膜浸潤；Ⅱ期：侵犯周圍胸膜或脂肪組織，或鏡下包膜浸潤；Ⅲ期：侵犯鄰近器官(心包、大血管、肺等)；Ⅳa 期：胸膜或心包播散；臨床Ⅳb期：淋巴道或血道轉移。 其中Ⅰ期為非侵襲性胸腺瘤，Ⅱ—Ⅳ期為侵襲性胸腺瘤。 而組織學分型主要根據2004 年正式的WHO 的胸腺腫瘤組織學分型標準［4］。 A 型：髓質型；AB 型：兼具A 型和B 型胸腺瘤樣成分；B 型：混合型（B1 型：皮質為主型，器官樣；B2 型：皮質型；B3 型：鱗狀上皮樣、分化好的胸腺癌）；C 型：胸腺癌。 其中A、AB 型為低度惡性，B、C 型為高度惡性。由于胸腺組織學結構復雜，細胞多樣化，單純從細胞學形態上很難在“腺瘤”和“腺癌”之間劃一條涇渭分明的界線。 病理科醫生往往需要借助特殊標記物染色的表達情況作為診斷的參考依據。

OPN 是一種相對分子質量約為44 ku 的具有多種生物學功能的分泌性、糖基化的磷酸蛋白。 它有一個N 端信號序列及Gly-Arg-Gly-Asp-Ser 細胞黏附序列，并含有28 個功能結合區，包括鈣結合域、凝血酶裂解位點等，這使得其具有多種功能，在細胞的黏附遷移、信號傳導及組織修復中發揮著重要作用［6］。OPN 在腫瘤發生、發展和轉移過程中有重要的作用，其具體機制可能有以下幾個方面：1）通過與其受體-整合素和CD44 結合后發揮作用［7］；2）與血管通透性因子（VPF）/血管內皮生長因子（VEGF）發揮協同作用［8］；3）通過自分泌及旁分泌途徑發揮作用［9］；4）通過抑制一氧化氮（NO）的產生，使轉移的腫瘤細胞易于存活［10］。

本研究通過免疫組織化學SP 法檢測發現OPN主要表達在胸腺瘤腫瘤細胞的細胞膜上和細胞質中，少量彌散表達在炎癥細胞、腫瘤周圍基質及血管內皮細胞胞質中。 據此筆者推斷胸腺瘤腫瘤細胞本身能夠產生和分泌OPN［10］，并通過分泌的OPN來改變周圍的微環境，促進腫瘤迅速生長和浸潤轉移；OPN 也可能通過旁分泌方式，作用于血管內皮細胞和周圍的基質細胞［11］，促進腫瘤的生長。 本研究結果顯示，胸腺瘤組織OPN 的陽性表達高于正常胸腺組織，提示OPN 參與了胸腺瘤的發生；OPN 在不同Masaoka 分期胸腺瘤中的陽性表達的差異有統計學意義，且在分期越高（侵襲性越高）的胸腺瘤組織中表達越多，提示胸腺瘤中OPN 的表達與腫瘤的侵襲性相關；OPN 在不同WHO 分型的胸腺瘤組織中的陽性表達的差異有統計學意義，且在惡性程度越高的胸腺瘤組織中表達越多，提示OPN 的表達與胸腺瘤的惡性程度相關。

綜上所述，OPN 可能在胸腺瘤的發生和發展中起重要作用，OPN 可能參與了胸腺瘤的發生、發展。

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