薛 云 宋水燕 姚春濤 孫麗萍 商玉萍 周華偉*
(吉林亞泰生物藥業股份有限公司,吉林 長春 130033)
UF-1000i尿儀和ACT-2000超高倍顯微鏡在血尿定位中的聯合應用
薛 云 宋水燕 姚春濤 孫麗萍 商玉萍 周華偉*
(吉林亞泰生物藥業股份有限公司,吉林 長春 130033)
目的 探討量化參數和顯微鏡聯合進行尿沉渣紅細胞形態檢測。方法 采用 UF-1000i尿儀及 ACT-2000 超高倍顯微鏡聯合對 212例血尿患者進行尿紅細胞形態相關量化指標測定和形態分析。結果 腎性血尿 RBC-P70FSC (ch)為(69.8±15.3);RBC-FSC-DW (ch)為(44.75±17.2),診斷敏感度達 98.7%,特異度 83%。結論 采用 UF-1000i量化參數與傳統顯微鏡法聯合進行血尿定位優勢互補,效果良好。
尿沉渣;腎小球性血尿;非腎小球性血尿;量化參數
1.1 實驗對象
210例血尿患者均為本院的住院或門診患者,81例通過病史、生化、免疫學檢測、腎活檢等臨床明確診斷腎小球疾病患者;130例通過病史、影像學檢查、病理活檢等明確診斷為非腎小球疾病患者(泌尿系結石、膀胱炎、腎盂腎炎、結核等)。
1.2 實驗儀器
日本西斯美康UF-1000i型全自動尿沉渣分析儀;ACT-2000型上海產超高倍顯微鏡;(儀器實驗前均用質控液進行監控)。
1.3 實驗方法
1.3.1 收集新鮮清潔晨尿10mL,1500轉/min,離心5min,取沉渣1mL混均滴入血細胞計數池計數每毫升紅、白細胞總數、管型數并測定滲透壓、比重、電導率、pH、細菌濃度等物理指標,排查影響因素;同時用上海ACT-2000超高倍顯微鏡目測紅細胞形態及比率并分析,判定均一性、非均一性、混合性血尿。
1.3.2 收集新鮮清潔晨尿充分混勻,在UF-1000i分析儀進行檢測
RBC-P70FSC(紅細胞前向散射光強度)、RBC-FSC-DW(散射光分布寬度)、Large-RBC(非腎小球性紅細胞數目)、Small-RBC(腎小球性紅細胞數目)、Non-Lysed-RBC(非溶血紅細胞數目)、Non-Lysed-RBC(%)(非溶血紅細胞數目占總數百分比);RBC體積分布直方圖。
2.1 利用UF-1000i對210例血尿進行分析,其量化指標與血尿類型分析結果顯示:兩種類型的血尿參數差異顯著。結果詳見表1。

表1 UF-1000i進行血尿定位參數及比較(χ—±s)
2.2 量化參數與傳統顯微鏡法血尿定位的對應結果,見表2。

表2 UF-1000i參數與顯微鏡判定血尿類型對應關系
2.3 應用UF-1000i鑒別血尿類型評價,見表3。

表3 血尿類型評價
紅細胞經腎小球進入尿中叫腎小球性血尿,其他原因所致血尿叫非腎小球性血尿[1];血尿來源判定對腎病的診斷有著極重要意義和實用價值。而綜合手段判斷血尿來源是科技發展的必然要求,紅細胞的激光反射和電場中電阻抗形成了現代物理學應用于紅細胞測量的前沿技術,UF-1000i結合流式細胞分析技術與電阻抗和激光檢測原理對被測物給予的各種信號進行綜合分析、識別和計算,得到細胞的長度、大小和染色質強度等參數,方法規范、自動化程度高、參數多、正常細胞報告準確、重復性好;但對形態異常細胞(如棘形紅細胞)辨認差,多以報警提示,另外對大量細菌、結晶等誤判為紅細胞概率大;目前,臨床使用的全自動分析儀還屬于篩選儀器不能夠完全替代顯微鏡鏡檢[2]。
本試驗表1表明,UF-1000i在腎性和非腎性兩種血尿的診斷參數比較均為P<0.05,有顯著差異,敏感度分別是98.7%和83%,說明UF-1000i在血尿定位中具有極高鮮明性和強大功能性。腎小球性紅細胞在體內久存并經基底膜擠壓體積變小,表2、表3以量化數據建立與傳統目測的互容計算;例如Small/Lysed ≥70%即≥2.3時,表示腎小球性紅細胞數≥70%,為非均一型血尿;同理,該比值<0.429時為均一型;比值介于二者之間為混合型血尿;在實際工作中直觀簡捷便于操作。
本試驗在細胞數很少情況下(最低可達幾個)或多量溶血情況下,仍能詳細提供紅細胞形態參數,表現了很高敏感性,諸如下述情況:單一顯微鏡目測時(往往細胞數過少極易放棄診斷)、初次檢查、恢復期、反復期、特殊病例(如IgA腎病特殊階段)、許多溶血性疾病(紫癜、溶血性尿毒癥、狼瘡)等,盡管完整細胞很少,確能提供細微腎小球性血尿數據特征,挽回了大量極易被忽略的信息,降低了漏診率,這是UF-1000i值得發揮的極大優勢。對于均一性皺縮紅細胞病例予以普通水侵潤沉渣試驗,無變化者確定排除滲透壓對細胞形態的影響,彌補儀器無法區分滲透壓影響弱點。對RBC-P70FSC≤1的病例,或因超出儀器測定線性,或特殊溶血,此時必須以直接目測加以補償診斷,尤以目測棘型RBC≥5%判斷腎小球性血尿最為重要;凡是pH、比重超過正常值者都必然直接影響紅細胞形態,一律加以物理校正和顯微鏡形態校正;電導率>40者說明高濃度鹽類,則必須放棄參數價值,直接綜合其他數據以顯微鏡目測診斷;試驗對RBCP70FSC>100ch(理論111.09為界)的病例全部予以顯微鏡目測校正,以排除大量鹽類和高濃度菌尿對前散射光影響,提高了陰性特異性,彌補了UF-1000i的假陽性過高的弱點,顯微鏡目測尤以檢出棘型紅細胞作為必須的決定性指標,形成診斷上的優勢互補;關于混合性血尿:非腎性血尿130例測定中,12例呈現非均一性和呈混合性表現,后經腎穿證實,其中兩例為IgA腎病(文獻記載IgA腎病10.8%比例可表現為混合型[3])的特殊表現;余者多有鹽類和菌尿及其他物化因素導致均一性紅細胞形態變異所致,證明:必須嚴格注意IgA腎病等的特殊性及上述影響因素;綜上,聯合利用UF-1000i量化數據準確迅捷、重復性好的優點,多角度的印證、校正傳統的顯微鏡測試,彌補了人工目測主觀隨意度大、重復性差、影響因素多(包括經驗)等諸多弊端;而人工顯微鏡目測互補了儀器敏感性過高、特異性過低、物理和生物干擾多等瑕疵,優勢互補使診斷更接近客觀事實。
[1]戴自英.實用內科學[M].9版.北京:人民出版社,1993:1512.
[2]從玉隆.幾種檢驗尿紅細胞方法的價值與互補關系[M].中華檢驗醫學雜志,2003,25(4):263-264.
[3]黃鋒先.普通光鏡對血尿定位診斷的評價[J].中華腎臟病雜志, 1996,12(2):104.
R692.6
:B
:1671-8194(2013)02-0068-02
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