香菇多糖提取工藝的研究

金貞姬王 菁

（1 吉林省琿春市中醫醫院，吉林 延邊 133300；2 廣州中醫藥大學2011級七年制中醫臨床，廣東 廣州 510006）

香菇多糖提取工藝的研究

金貞姬1王 菁2

（1 吉林省琿春市中醫醫院，吉林 延邊 133300；2 廣州中醫藥大學2011級七年制中醫臨床，廣東 廣州 510006）

目的研究香菇多糖的最佳提取工藝。方法以多糖含量為考察指標，采用水煎煮法提取多糖。以加水量、提取次數、煎煮時間為考察因素，采用正交試驗法優選提取總多糖的最佳工藝。結果最佳工藝為：因此確定北香菇總多糖的提取條件為A1B1C3，即：加6倍水，回流提取3次，每次提取1h。結論本工藝簡單可行，適用于工業大生產。

香菇；多糖；苯酚-硫酸法

香菇（Lentinus edodes （Berk） Song），又稱為有香蕈、冬菇、花菇、香草、香信等。為擔子菌亞門，擔子菌綱，傘菌目，口蘑科，香菇屬真菌，因其口味鮮美，營養豐富，香味濃郁，有著顯著的藥用及滋補作用，而被譽為“抗癌新兵”。現代研究證明，香菇有防止血管硬化、降低膽固醇、增強人體免疫功能的作用[1,4]。香菇多糖是香菇中的活性成分，具有抗腫瘤、抗感染和調節免疫力等作用。本文以香菇多糖的含量為指標，系統的研究了香菇中總多糖的提取方法，為進一步開發和利用香菇打下基礎。

1 儀器與試藥

DU800紫外可見分光光度計（美國Beckman公司）；電子天平BS124S （北京賽多利斯儀器系統有限公司）；D-無水葡萄糖標準品（編號：110833；中國食品藥品檢定研究院）；苯酚、硫酸乙醇等試劑均為分析純（北京化工廠）；蒸餾水，蒸餾水機自制。香菇樣品共3批，經長春中醫藥大學鑒定教研室鑒定。

2 方法與結果

2.1 標準品溶液的制備

精密稱取無水葡萄糖對照品適量，加水溶解制成每1mL含無水葡萄糖0.1mg的對照品溶液。

2.2 標準曲線的制備

分別精密量取葡萄糖標準溶液0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL置于試管中，分別加蒸餾水至1.0mL，再分別加入5%苯酚水溶液1.0mL，然后加入濃硫酸溶液5.0mL，充分振搖使其充分反應，放置，至室溫，以0管為空白，照分光光度法[2]（附錄VA），在其最大吸收波長490nm處測定其吸收度，以葡萄糖的含量為橫坐標，吸收度為縱坐標，進行線性回歸，回歸方程為A=6.8689C+0.0224，r=0.9995。濃度在0.0195～ 0.098 mg/mL范圍內，與吸光度呈線性關系。標準曲線線性良好。

2.3 樣品的測定

取待測樣品，精確稱取約1.0g，置10mL量瓶中，加水溶解。精密吸取樣品溶液0.4mL，0.6mL，置于試管中，加水至1mL，再按照2.2標準曲線的制備項下自“再加入5%苯酚溶液1.0mL”起，依法進行操作，在490nm處測定其吸收度，計算總多糖含量[3]。

2.4 正交實驗優選香菇總多糖提取工藝

多糖的提取方法有水提醇沉法、酶法、稀堿浸提法、稀酸浸提法等，水提醇沉法為最經典的提取香菇多糖的方法，本文研究采用水提醇沉法提取香菇中的總多糖。影響香菇總多糖含量的主要因素有A：提取溶劑；B：提取時間；C：提取次數，每個因素取3個水平，因素水平見表1。

表1 正交實驗因素水平表

根據以上因素水平，確定按照L9（3）4正交表進行試驗，稱取香菇干燥品，共9份，每份10 g，按照表2條件進行試驗，采用水煎煮法提取，濾過，合并濾液，濾液干燥，測定其中總多糖的含量，實驗結果及方差分析見表2，表3。

表2 正交實驗表

表3 方差分析表

由方差分析結果可知，A、B二個因素對香菇多糖提取沒有顯著影響，C對實驗結果有顯著影響，因此確定北香菇總多糖的提取條件為A1B1C3，即：加6倍水，回流提取3次，每次提取1h。

3 討 論

多糖的含量測定方法有很多種，有蒽酮-硫酸法，苯酚-硫酸法，本實驗采用葡萄糖為對照品，苯酚硫酸法測定香菇提取物中的總多糖，在490 nm處用紫外可見分光光度計測定吸收度，該方法簡單易行，是測定多糖的常用方法。

參考文獻

[1] 于淑池,林澤平.香菇的營養保健及免疫調節作用[J] .承德民族師專學報,2003,23(2)∶82-83.

[2] 國家藥典委員會.中國藥典(一部)[S].北京∶化學工業出版社,2005.

[3] 孫磊,喬善義,趙毅民.黑骨藤多糖含量測定方法研究[J].中國中藥雜志,2009,34(10)∶1241-1244.

[4] 程迪,于潔,董麗.河南產牡丹皮中多糖含量的測定[J].安徽農業學,2008,36(2)∶518.

R284.1

B

1671-8194（2013）13-0071-02