?；撬釋Υ笫笮募∪毖俟嘧⒑蟾螕p傷的保護(hù)作用

嵇月娥施文艷楊 儉

（1 江蘇建康職業(yè)學(xué)院實驗中心，江蘇 南京 211800；2 南京醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，江蘇 南京 211800）

牛磺酸對大鼠心肌缺血再灌注后肝損傷的保護(hù)作用

嵇月娥1施文艷1楊 儉2

（1 江蘇建康職業(yè)學(xué)院實驗中心，江蘇 南京 211800；2 南京醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，江蘇 南京 211800）

目的 觀察?；撬釋Υ笫笮募∪毖俟嘧⒏螕p傷時超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）含量和磷脂酶A2（PLA2）的影響。方法 大鼠隨機分4組（n=10），對照組、?；撬岬?、中、高劑量組，采用大鼠冠狀動脈結(jié)扎再通的方法，觀察牛磺酸對大鼠心肌缺血再灌注后血清和肝組織勻漿SOD、NO和PLA2的影響。結(jié)果 牛磺酸各劑量組與對照組相比，血清和肝組織勻漿SOD含量明顯提高，NO含量和血清PLA2濃度明顯降低。結(jié)論 ?；撬崮軌蛲ㄟ^清除自由基，降低NO及自由基損傷，降低PLA2而減輕炎癥反應(yīng)和急性損傷，對心肌缺血再灌注肝損傷有一定的保護(hù)作用。

缺血再灌注；肝損傷；?；撬?/p>

心臟缺血/再灌注（I/R）在臨床較多見，不僅引起心肌損傷、壞死，還可引起全身炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致肺、肝、腎等器官的繼發(fā)性損傷，其中肝損傷是非常重要的臟器損傷。?；撬崾求w內(nèi)含量最豐富的氨基酸，已有實驗[1-3]表明：?；撬峋哂星宄踝杂苫⒖怪|(zhì)過氧化，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)和穩(wěn)定細(xì)胞膜等作用，是機體內(nèi)源性細(xì)胞保護(hù)和抗損傷物質(zhì)。本實驗是觀察?；撬釋Υ笫笮募∪毖俟嘧⒏螕p傷時超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）含量和磷脂酶A2（PLA2）的影響，進(jìn)一步探討?；撬釋Υ笫笮募∪毖俟嘧⒏螕p傷保護(hù)的機制。

1 材料與方法

1.1 材料

SD大鼠由南京醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供；SOD、NO含量測定試劑盒購于南京建成生物工程研究所；ELISA檢測試劑盒購買于上海西唐生物科技有限公司。

1.2 方法

大鼠40只，雌雄不限，體質(zhì)量180～250g，隨機分4組（n=10），對照組、牛磺酸低、中、高劑量組，分別腹腔注射生理鹽水、?；撬?00、200、400mg/kg，5mL，30min后腹腔注射20%烏拉坦5mL/kg麻醉，采用大鼠冠狀動脈結(jié)扎再通的方法，冠狀動脈結(jié)扎30min后剪開結(jié)扎線再灌注2h，取頸動脈血，分離血清，迅速摘取肝臟，生理鹽水沖洗，剪碎后進(jìn)行組織勻漿，配成10%勻漿液，4000r/min離心20min，取上清液檢測。

1.3 SOD、NO和PLA2測定

SOD測定：按試劑盒說明書操作步驟，制備空白管、測定管，550nm波長處蒸餾水調(diào)零進(jìn)行比色，計算SOD含量。NO測定：按試劑盒說明書步驟操作，制備標(biāo)準(zhǔn)管、測定管和空白管，540nm波長處空白管調(diào)零進(jìn)行比色，計算NO含量。PLA2測定：按試劑盒說明書，稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。450nm波長處空白孔調(diào)零測各孔的吸光度（OD值），計算樣品濃度（μg·L）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié) 果

2.1 ?；撬釋Υ笫笮募∪毖俟嘧⒑笱錝OD、NO和PLA2的影響：與對照組相比，?；撬岣鲃┝拷MSOD含量明顯升高（P＜0.01），NO含量明顯降低（P＜0.05，P＜0.01），PLA2濃度有明顯降低（P＜0.01），見表1。

表1 各組大鼠血清SOD、NO和PLA2含量

2.2 ?；撬釋Υ笫笮募∪毖俟嘧⒑蟾谓M織勻漿SOD、NO和PLA2的影響：與對照組相比，?；撬岣鲃┝拷MSOD含量明顯升高（P＜0.01），NO含量在牛磺酸中、高劑量組明顯降低（P＜0.01），PLA2濃度較對照組有明顯降低（P＜0.01），見表2。

表2 各組大鼠肝組織勻漿SOD、NO和PLA2含量

3 討 論

心肌缺血再灌注可引起肺、腎、肝、腦等多組織器官的繼發(fā)性損傷，研究認(rèn)為在其發(fā)生機制中起重要作用的包括氧自由基的生成、鈣超載、白細(xì)胞和細(xì)胞因子等[2-4]。組織在缺血再灌注時釋放大量氧自由基，引起脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，以及細(xì)胞鈣超載和細(xì)胞因子大量釋放入血至各組織器官，引起白細(xì)胞浸潤，炎癥介質(zhì)釋放等，引起各組織器官細(xì)胞膜、線粒體、溶酶體等生物膜通透性增加，最終造成組織損傷。超氧化物歧化酶（SOD）是體內(nèi)重要的抗氧化酶，當(dāng)體內(nèi)自由基生成增多時，它與超氧陰離子反應(yīng)生成過氧化氫，再由過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化酶轉(zhuǎn)變成為水， 清除自由基，可對抗因氧自由基對細(xì)胞造成的損傷，它是體內(nèi)清除自由基的首要物質(zhì)。本實驗中牛磺酸各劑量組均可明顯提高大鼠心肌缺血再灌注后血清和肝組織中SOD活性，減少過量NO的產(chǎn)生，從而減輕缺血再灌注引發(fā)的自由基對肝組織的損傷。

磷脂酶A2（PLA2）是一種水解酶，亦是花生四烯酸、前列腺素及血小板活化因子等生物活性物質(zhì)生成的限速酶，所產(chǎn)生的脂質(zhì)介質(zhì)在炎癥和組織損傷時起關(guān)鍵性作用，參與炎癥及急性損傷的致病過程。PLA2在缺血再灌注的肝損傷過程中發(fā)揮了重要的作用[4-5]。本實驗中牛磺酸可以降低大鼠心肌缺血再灌注血清和肝組織中PLA2濃度，減輕肝損傷。

本實驗發(fā)現(xiàn)牛磺酸在心肌缺血再灌注損傷中的運用，可以提高血清和肝組織SOD含量，降低NO含量和PLA2濃度，提示?；撬峥梢詼p輕大鼠心肌缺血再灌注對肝組織的損傷。其作用機制可能是通過清除自由基、防止脂質(zhì)過氧化、提高機體抗氧化能力、改善細(xì)胞內(nèi)鈣超載、抑制過量NO生成、抑制PLA2相關(guān)的炎癥反應(yīng)，減少組織的急性損傷，從而對大鼠心肌缺血再灌注肝損傷起到保護(hù)作用。

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R542.2+2

B

1671-8194（2013）34-0069-02