賈彩虹,劉培賢,李小麗
(1.山西醫科大學第二醫院,山西 太原 030001;2.陽曲縣人民醫院,山西 太原 030100)
對擬輸血或備血患者進行鹽水介質加抗人球蛋白介質交叉配血,在交叉配血時經常會出現凝集,導致配血困難,對出現凝集的結果做出及時、正確的分析和處理,有利于臨床輸血安全。現對山西醫科大學第二醫院輸血科2012 年8 月至2012 年11 月交叉配血中出現凝集的67 例標本分析如下。
1.1.1 儀器 戴安娜專用離心機
1.1.2 試劑 微柱凝膠卡(戴安娜公司);抗體篩查細胞(上海血液生物醫藥有限責任公司);抗A、抗B血型定型試劑為單克隆試劑(北京金豪制藥股份有限公司);人紅細胞反定型試劑(上海血液生物醫藥有限責任公司);所有試劑均檢定合格且在有效期內使用。1.1.3 病例來源 資料均為山西醫科大學第二醫院輸血科2012 年8 月至2012 年11 月擬輸血或備血患者中交叉配血出現凝集的病例。
抗人球蛋白介質采用微柱凝膠法(MGT)。MGT交叉配血試驗和抗體篩查試驗嚴格按照試劑說明書操作。
1.2.1 交叉配血凝集標本的處理 主側凝集的標本首先復查血型,做不規則抗體篩查;次側凝集的標本做紅細胞直接抗球蛋白試驗。將所配獻血員血清進行抗體篩查和鑒定等。
1.2.2 復查血型采用試管法 正反定型,至少包括6支試管(抗A、抗B、Ac、Bc、Oc、自身對照),對有凝集者鏡下觀察凝集狀態,呈緡錢狀凝集的為蛋白凝集,為非抗原抗體特異性凝集。
1.2.3 直接抗球蛋白試驗和血型鑒定 按照《免疫血液學》[1]中制定的方法進行。
1.2.4 乙醚放散試驗 取經洗滌3 次的受檢者壓積紅細胞1 份加生理鹽水1 份、乙醚2 份,劇烈振蕩1 ~2 min,然后以3 400 轉/min 1 000 g離心2 min。離心后分成3 層,上層是乙醚,中層是紅細胞基質,下層是具有抗體的釋放液,呈深紅色。用吸管吸出底層釋放液,置37 ℃水浴10 min(或56 ℃1 min),除盡乙醚,再3 400 轉/min 1 000 g 離心1 min,取上清液即為釋放液。用相應細胞和抗人球方法檢測放散液中的抗體。
交叉配血主側凝集的標本11 例,其中檢出不規則抗體7 例(抗M 2 例,抗E 1 例,抗Ec 1 例,未確定特異性2 例,紅細胞亞型產生不規則抗體導致凝集1例),自身免疫性疾病導致的自身抗體1 例,蛋白凝集3 例。
交叉配血次側凝集的標本57 例,其中直接抗球蛋白試驗陽性56 例(其中1 例為自身免疫性溶血性貧血導致主側凝集,直接抗人球蛋白試驗也呈陽性),獻血員檢出不規則抗體1 例。直接抗球蛋白試驗陽性致交叉配血次側凝集的56 例標本,其中血液科35 例,腎內科4 例,腫瘤生物科4 例,骨科2 例,普外科2 例,風濕科2 例,消化科1 例,呼吸科2 例,泌尿外科1 例,心內科1 例,血管乳腺科2 例。
67 例在輸血時經過配合性輸注所需紅細胞制品均未出現輸血不良反應。
引起交叉配血主側凝集的主要原因是患者血清中存在不規則抗體。不規則抗體是人們在臨床實踐中發現除抗A 和抗B 之外,其他紅細胞血型抗體的存在與否沒有規則可循,因此稱為不規則抗體。而ABO 系統中的亞型、變異型中的抗A1或某種抗B 等抗體,也稱為不規則抗體。在臨床輸血時如確定了抗體的特異性,選擇相對應抗原特異性相同的供者做交叉配血試驗;如無特異性則選擇ABO 和Rh 抗原同型的供者做交叉配血試驗;蛋白凝集常見于多發性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、霍奇金病等,如為蛋白凝集,配血時則在患者血清中加等量的生理鹽水即可去除干擾;對ABO 血型系統存在不規則抗體或進行骨髓移植后輸血,要避開相應抗體進行輸血或輸注O 型洗滌紅細胞。
引起交叉配血次側凝集的主要原因是直接抗球蛋白試驗陽性。直接抗球蛋白試驗(DAT)是一種鑒定紅細胞是否在體內被免疫球蛋白及補體致敏的簡便方法。造成DAT 試驗陽性的原因有很多,包括自身抗體與固有的紅細胞抗原反應、溶血性輸血反應、胎兒和新生兒溶血、藥物誘發的抗體、供者血漿和免疫球蛋白被動獲得的抗體、非特定吸附的蛋白、細菌感染及自身或同種抗體導致的補體活化等。對于直接抗球蛋白試驗(DAT)≥1 +的患者標本應該做乙醚放散試驗確定紅細胞表面致敏抗體或補體的種類,包括自身抗體、同種抗體、類抗體或藥物抗體等。研究統計顯示,次側凝集主要發生在血液病和腫瘤、免疫性疾病、腎臟疾病、肝膽疾病等,這可能與原發病引起機體免疫功能改變,進而激發機體產生自身抗體有關。
在臨床輸血時,如為自身抗體引起的自身免疫性溶血性貧血,不建議輸血,在Hb <40 g/L時,可輸少量的洗滌紅細胞;如確定了同種抗體或類抗體的特異性,選擇相對應抗原特異性相同的供者做交叉配血試驗;如無特異性則選擇ABO 和CcDEe 抗原以及MN 抗原匹配的紅細胞輸注,以省略復雜的自身吸收等操作,節省時間,使患者得到及時有效的治療[2];獻血員一般都會經過問詢篩選,但在出現次側凝集找不到原因的情況下也要考慮獻血者的抗體情況。本組病例就出現了1 例因獻血員抗C 引起的凝集。
另外因IgG 或補體水平上升而導致的DAT 試驗陽性的情況,與貧血無關,通常會發生在患有鐮狀細胞疾病、地中海貧血、腎臟疾病、多發性骨髓瘤、自身免疫紊亂以及其他伴有血清球蛋白或血尿素氮水平升高疾病患者的紅細胞上等。
因此,對于交叉配血不合的標本,要從患者和獻血員兩方面考慮。對于DAT 陽性的解釋還應考慮到患者的病史,臨床數據以及其他實驗室檢驗結果。遇到直抗陽性的標本,不能簡單的認為是自身抗體導致,要結合患者既往病史、輸血史、妊娠史認真分析,尤其是近期有輸血史的患者,可能存在輸血反應,避免輸入不相合的血液,從而保證輸血安全。
[1] 劉達莊. 主編. 免疫血液學[M]. 上海:上海科技技術出版社,2002.
[2] 向 東,劉 曦,王健蓮,等. 紅細胞溫自身抗體的血清學特點分析及配血對策[J].中國輸血雜志,2008,21(12):924-926.