黔產山茱萸揮發性成分研究

曾富佳 張 玨 高玉瓊 劉建華 丁麗娜*

1.遵義醫藥高等專科學校，貴州 遵義 563002;2.貴州省生物基地，貴州 貴陽 550002

山茱萸系山茱萸科植物Cornus of ficinalis Sieb.et Zucc.的干燥成熟果實，始載于《神農本草經》，本品酸、澀，微溫，歸肝、腎經，具有補肝益腎，澀精固脫之功效。生長于山坡灌叢中。分布于陜西、山西、山東、安微、浙江、四川等省。山茱萸含有生理活性較強的山茱萸甙、酒石酸、沒食子酸、蘋果酸、樹酯、鞣質和多種維生素等有效成分，具有增強免疫、抗炎、抗菌等藥理作用，是中醫臨床中常用的一味藥［1-4］。本文首次對貴州地道藥材山茱萸進行采水蒸氣蒸餾法，從山茱萸植物果實中提取了揮發油，并用氣相色譜-質譜-計算機聯用系統對山茱萸揮發油化學組成進行了定性定量研究，分析鑒定了57個化學成分。

1 實驗部分

1.1 材料

1.1.1 實驗材料 山茱萸藥材產自貴州地道藥材，由貴州大學生物與科學學院生物系關平教授鑒定為Cornus of ficinalis Sieb.et Zucc.的干燥成熟果實。

1.1.2 試劑 所用試劑均為國產分析純試劑。

1.1.3 儀器 美國惠普公司 (Hcwlctt Packard)HP-6890/HP5973 GC-MS氣質聯用儀。

HP-INnowax Polyethylene Glycol彈性石英毛細管柱(30.0m ×320μm ×0.25μm)

1.2 方法

1.2.1 樣品供試液的制備 取山茱萸藥材250g，粉碎，加入水2000ml，正己烷4ml，充分搖勻，進行水蒸氣蒸餾，得油狀物0.5ml(含正己烷)，用無水硫酸鈉干燥，作為供試品。

1.2.2 山茱萸揮發油定性定量分析 取山茱萸有機溶劑萃取物1μl，進樣，用GC-MS進行測定。

氣相色譜條件 ：色譜柱為HP-INnowax Polyethylene Glycol彈性石英毛細管柱 (30.0μm × 320μm × 0.25μm)。柱溫50℃，保持2min，然后以4℃·min-1升溫至230℃，保持20min;氣化室溫度250℃;載氣為高純度氦氣(99.999%); 柱前壓 15.08psi，載氣流量 2.0mL·min-1;進樣量1μL(揮發油與乙醚混合溶液);分流比40∶1。

質譜條件：離子源：EI源;離子源溫度230℃;四極桿溫度150℃;電子能量70 eV;發射電流34.6 μA;倍增器電壓1936V;接口溫度280℃;質量范圍10～550amu。

定性分析：通過HP MSD化學工作站檢索Nist98標準質譜圖庫和WILEY275質譜圖庫，同時結合有關質譜圖文獻解析，以確認山茱萸揮發性物質的化學成分。

定量分析：并通過HP MSD化學工作站數據處理系統，按峰面積歸一化法進行計算求出各化學成分的峰面積相對百分含量。

2 結果

山茱萸化學成分圖譜及各化學成分的峰面積相對百分含量見圖1，表1。

表1 山茱萸揮發性物質的化學成分和相對百分含量

序號 出峰時間 化合物名稱 分子量 分子式 相對含量50 27.025 .beta.-Maaliene 204 C15H240.62%51 27.421(-)-.DELTA.-SELINENE 204 C15H24 1.64%52 27.666 .alpha.-Copaene 204 C15H24 2.44%53 27.977 2-Propenoic acid，3-(4-methoxyphenyl)-，ethyl ester 206 C12H14O3 2.56%54 28.165 1，4-dimethyl-7-(1-methylethyl)azulene 198 C15H18 1.81%55 30.286 Anthracene(CAS)178 C14H10 1.14%56 30.842 Butyl phthalate 278 C16H22O4 3.63%57 34.442 Hexadecanoic acid，1-methylethyl ester(CAS)298 C19H38O21.47%

3 討論

在黔產山茱萸揮發性成分研究中，共分離提取74個成分，檢測出57個。占揮發油總量的93.74%。大于2%的成分有12個，其中相對百分含量較高的為肉桂酸乙酯 (Ethyl cinnamate)21.9%，1，2-亞甲二氧基-4-甲氧基-5-(-2烯丙基)-苯8.53%，苯二甲酸丁酯 (Butyl phthalate)3.63%，冰 片 (BorneolL)3.37%，茴 香 腦 (Anethole)3.33%，α-古巴烯 (Alpha-Copaene)2.86%，α-松油醇(Alpha.-Terpinene)2.63%。對黔產山茱萸進行揮發性成分的分析可以看出，酯類揮發油成分最高。其它［5-6］文獻認為山茱萸揮發性成分中最高酯類揮發油多為鄰苯二甲酯類揮發性成分較高，而黔產山茱萸則肉桂酸酯類含量最高。本研究通過對山茱萸揮發油進行分析鑒定及相對含量測定，為綜合利用黔產山茱萸植物資源等提供科學依據。

［1］李平，王艷輝，馬潤宇.水提山茱萸多糖的理化性質及抗氧化活性研究［J］.食品科學，2003，24(7)：133-137.

［2］李平，王艷輝，馬潤宇.山茱萸多糖PFCA m的理化性質及生物活性研究［J］.中國藥學雜志，2003，38(8)：583-586.

［3］苗明三，方曉燕，楊云山.山茱萸多糖對小鼠免疫功能的影響［J］.河南中醫，2002，22(2)：12—13.

［4］江蘇新醫學院《中藥大辭典》編寫組.中藥大辭典［M］.上海：上海科學技術出版社，2003，189-190.

［5］韓志慧，曹文豪，李心寶，等.GC-MS分析山茱萸揮發油的化學成分［J］.精細化工，2006，23(2)：130-132.

［6］王學斌，何娟，楊柳，等.用GC-MS法觀察3個不同產地山茱萸的揮發油成分［J］.分析測試技術與儀器，2006，12(2)：116-120.