Survivin抗體及其基因表達在肺癌診斷中的應用價值

蔡祖勛

Survivin抗體及其基因表達在肺癌診斷中的應用價值

蔡祖勛

目的 探討survivin抗體及其基因表達在肺癌診斷中的應用價值。方法 2013年1月至2013年5月期間, 本院診治的24例肺癌患者(觀察組), 以及24例健康者(對照組), 作為研究對象, 采集外周血液標本, 通過ELISA法、RT-PCR法, 檢測兩組血清中survivin抗體及survivin mRNA表達水平。結果 與對照組相比, 觀察組血清中survivin抗體及survivin mRNA表達水平均明顯升高, P＜0.05, 差異有統計學意義, 并且血清survivin抗體表達與survivin mRNA表達呈正相關。結論 survivin抗體及其基因表達檢測有利于肺癌的臨床診斷, 值得臨床推廣。

Survivin抗體；基因表達；肺癌；診斷

肺癌作為臨床上比較常見的惡性腫瘤, 近年來, 其發病率呈逐年增高趨勢, 嚴重影響著患者的生活質量, 甚至危及生命。所以, 對于肺癌患者, 早期診斷、早期治療, 具有非常重要的臨床意義。本研究中, 2013年1月至2013年5月期間, 河南省胸科醫院胸外一科診治的24例肺癌患者(觀察組), 以及24例健康者(對照組), 通過ELISA法、RT-PCR法,檢測兩組血清中survivin抗體及survivin mRNA表達水平, 現將結果報告如下, 以供臨床參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2013年1月至2013年5月期間, 本院診治的24例肺癌患者(觀察組), 以及24例健康者(對照組), 作為研究對象。24例肺癌患者中, 10例小細胞肺癌、5例鱗癌、4例腺癌, 以及5例大細胞癌。24例對照組中, 男15例、女9例, 年齡49.0~70.0, 平均(57.0±6.0)歲；24例觀察組中,男16例、女8例, 年齡48.0~69.0歲, 平均(56.0±6.5)歲。兩組性別、年齡比較, 差異沒有統計學意義, P＞0.05, 具有可比性。

1.2 標本檢測方法

1.2.1 血清survivin抗體檢測方法 采集兩組外周血液標本約2ml, 促凝膠促凝。通過ELISA法, survivin抗體試劑盒購自Assay Design公司, 嚴格按照試劑盒說明書操作, 應用特異性單克隆抗體包被反應板, 加入標準品、待測標本, 進行孵育, 隨后計入兔多克隆抗體及辣根過氧化物酶的羊抗兔IgG抗體, 檢測血清survivin抗體。

1.2.2 survivin mRNA表達水平檢測方法 采集兩組靜脈血約2ml, 枸櫞酸鈉抗凝處理, 淋巴細胞分離液處理有核細胞, 應用生理鹽水洗滌3次, -80℃冰箱保存, 待檢。通過RT-PCR法, 檢測survivin mRNA表達水平。應用Trizol試劑提取細胞總RNA, 通過分光光度法, 檢測RNA濃度和純度, 通過1%瓊脂糖電泳法, 鑒定RNA完整性。以2ug總RNA作為逆轉錄模板, 以Oligo(dT)12作為引物,在MMLV逆轉錄酶作用下, 合成單鏈cDNA。反應條件為94℃作用下, 預變性4min, 循環30個后, 在72℃作用下,終延伸7min。

1.3 統計學方法 采用SPSS18.0統計學軟件, 進行分析和處理, 計數資料率的比較, 采用卡方檢驗, 采用Pearson's相關性分析法, 進行相關性分析, P＜0.05, 差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組survivin抗體及survivin mRNA表達檢測結果比較 與對照組相比, 觀察組survivin抗體、survivin mRNA表達陽性率均明顯升高, P＜0.05, 差異有統計學意義, 詳細結果見表1。

表1 兩組survivin抗體及survivin mRNA表達檢測結果比較［例(%)］

2.2 survivin抗體與survivin mRNA表達的相關性分析 肺癌患者血清survivin抗體與survivin mRNA表達呈正相關性,相對系數為0.371, P＜0.05。

3 討論

惡性腫瘤的發生、發展過程中, 必然存在細胞增殖、細胞凋亡的平衡紊亂狀況。survivin作為細胞凋亡抑制因子家族中的一員, 在細胞凋亡和細胞周期的基因調控方面,發揮著重要的臨床作用［1］。正常情況下, survivin在胚胎及胎兒組織, 分化的睪丸、胸腺及胎盤組織中, 以及多數腫瘤組織中表達。有報道稱, 肺腺癌患者的腫瘤病灶組織中, survivin蛋白表達陽性率為53.6%, 并且survivin蛋白表達與TNM病理分期、淋巴結轉移、p53蛋白過表達呈正相關性,所以, survivin蛋白表達證實腫瘤病灶的侵襲性較強, 預后相對較差［2］。

在非小細胞肺癌患者中, survivin mRNA表達陽性率越高, 其細胞分化程度相對較低, 抑制細胞凋亡的作用較強,患者的預后效果相對較差。在小細胞肺癌患者中, survivin蛋白表達明顯升高, 這可能與淋巴結轉移、TNM分期有關［3］。所以, survivin表達說明正常組織存在癌變的可能, 所以, 對于肺癌患者, 應選擇survivin抗體及其基因表達的檢測方法,進行早期診斷、早期治療。

目前, 腫瘤檢測標志物包括腫瘤特異性標志物、組織特異性標志物, 本研究中, 與對照組相比, 觀察組血清中survivin抗體及survivin mRNA表達水平均明顯升高, 并且血清survivin抗體表達與survivin mRNA表達呈正相關?？偠灾? survivin抗體及其基因表達作為目前肺癌診斷的理想檢測方法, 有利于提高肺癌的臨床診斷率, 值得臨床廣泛推廣。

［1］ 吳偉杰, 王良旭. Survivin基因與肺癌臨床關系的研究進展. 現代實用醫學, 2012,24(4):475.

［2］ 王紀敏, 血清survivin抗體及基因表達檢測對肺癌的診斷價值.山東醫藥, 2009,49(45):39.

［3］ 丁衛民, 支氣管灌洗液survivin基因檢測在肺癌診斷中的價值.結核病與胸部腫瘤, 2012,4(2):99.

450000 河南省胸科醫院胸外一科