IGF-Ⅱ、PCNA在子宮肌瘤患者診斷中的意義

葉 英

河南省商丘市第一人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南商丘 476100

子宮肌瘤又稱子宮平滑肌瘤，是女性生殖器最常見的一種良性腫瘤。大多數(shù)患者發(fā)病初期無明顯癥狀，子宮肌瘤的發(fā)病機制可能與體內(nèi)雌激素水平過高，長期受雌激素刺激有關(guān)[1]。子宮肌瘤發(fā)病率占女性生殖器官良性腫瘤的一半以上，子宮肌瘤的發(fā)生發(fā)展與年齡、遺傳、激素和免疫水平存在密切關(guān)系。2008年針對全國21個主要省份子宮肌瘤發(fā)病率的調(diào)查結(jié)果顯示我國25～30歲女性子宮肌瘤發(fā)病率已超過3%，我國成為子宮肌瘤發(fā)病率最高的國家。既往醫(yī)學認為子宮肌瘤屬于良性腫瘤，其發(fā)生與細胞遺傳無關(guān)，但隨著研究的進一步加深，子宮肌瘤與機體染色體異常、基因畸形存在緊密關(guān)聯(lián)。Vikhlyera EM[2]等研究表明子宮肌瘤的發(fā)生具有“家庭聚集現(xiàn)象”，子宮肌瘤患者的親代肌瘤發(fā)生率接近30%，是正常人群的2倍。越來越多研究表明，子宮肌瘤的發(fā)生發(fā)展與細胞有絲分裂有關(guān)，而IGF-Ⅱ、PCNA是促進細胞有絲分裂的重要因子，筆者為探討IGF-Ⅱ、PCNA在子宮肌瘤診斷中的臨床意義，通過對80例患者子宮平滑肌組織進行觀察，具體報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院2008年1月～2012年3月40例病理證實子宮肌瘤患者為觀察組，年齡 33～58 歲，平均（45±3.4）歲，取其子宮肌瘤組織、肌瘤旁平滑肌組織進行觀察，同期40例病理證實卵巢良性腫瘤患者設(shè)為對照組，年齡32～59歲，平均（46±2.8）歲，取其子宮平滑肌組織進行觀察。所有入組患者均排除惡性腫瘤史、類固醇使用史（3個月內(nèi)）。兩組患者一般情況比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 檢測方法

1.2.1 標本制作 將組織切取厚度約為0.2～0.3 cm，大小1.5 cm×1.5 cm×0.3 cm，用4%多聚甲醛溶液固定48 h。梯度酒精脫水，二甲苯透明，然后入熔解的石蠟浸透，每次30 min，共3次，備包埋。將包埋好組織蠟塊切成5 μm的切片，進行免疫組化（IHC）進行檢測，抗體使用兔抗人IGF-Ⅱ多克隆抗體（廈門鷺隆生物工程有限公司），鼠抗人增殖細胞核抗原單克隆抗體（武漢生工生物技術(shù)有限公司），操作按照說明書進行。

1.2.2 結(jié)果判定 IGF-Ⅱ陽性表達是細胞漿出現(xiàn)棕色顆粒；PCNA陽性表達是細胞核出現(xiàn)棕色顆粒；每張切片隨機選擇5個視野，統(tǒng)計著色細胞與為著色細胞的比值（陽性率）[3]。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 18.0對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，組間顯著性比較采用t檢驗；計數(shù)資料以百分率表示，組間顯著性比較采用卡方檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

觀察組IGF-Ⅱ、PCNA表達水平與對照組相比，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），觀察組高于對照組。具體見表1。IGF-Ⅱ與PCNA呈正相關(guān)關(guān)系，具體見表2。

表1 IGF-Ⅱ、PCNA在子宮肌瘤組織、肌瘤旁平滑肌組織以及正常平滑肌組織中表達[n（%）]

表2 子宮肌瘤組織中IGF-Ⅱ與PCNA的相關(guān)性

3 討論

胰島素樣生長因子（IGFs）含有IGFⅠ和IGF-Ⅱ兩個類別，均與細胞的增殖分化、凋亡轉(zhuǎn)化有密切聯(lián)系，IGF-Ⅱ是與胰島素具有相似結(jié)構(gòu)的氨基酸單鏈多肽，IGF-Ⅱ和受體IGF-ⅡR結(jié)合后介導細胞的有絲分裂，促進細胞的增殖，促進細胞中DNA、蛋白質(zhì)、多糖的合成，對胚胎的生長發(fā)育起到良性刺激作用。正常生理條件下，IGF-Ⅱ的結(jié)合受體只在胚胎具有活性，出生后IGF-Ⅱ受體將處于沉默狀態(tài)。腫瘤發(fā)生后，IGF-Ⅱ受體被激活，與IGF-Ⅱ重新結(jié)合后促使IGF-Ⅱ活性增強[4]。IGF-Ⅱ?qū)儆谀[瘤組織的自分泌生長因子，因此在腫瘤組織中有高表達。雌激素在子宮肌瘤的發(fā)生發(fā)展中具主要介導作用，子宮肌瘤屬于激素依賴型腫瘤，而生長激素、胎盤生乳素等內(nèi)分泌激素也是子宮肌瘤形成的催化劑，子宮肌瘤的異常分泌導致胰島素樣生長因子IGF濃度增多而進一步加速子宮肌瘤細胞的有絲分裂，故內(nèi)分泌失調(diào)是形成子宮肌瘤的重要危險因素。Li SR等[5]通過研究發(fā)現(xiàn)，IGF-Ⅱ的基因印記丟失導致其在消化道腫瘤中出現(xiàn)高表達；BYRNE等也通過細胞實驗驗證IGF-Ⅱ介導腫瘤發(fā)生發(fā)展的機制與血管新生有關(guān)。本研究結(jié)果顯示IGFⅡ在子宮肌瘤、肌瘤旁平滑肌、正常子宮平滑肌的表達水平有差異存在，IGFⅡ在子宮肌瘤組織中的表達較其他組織上調(diào)，筆者認為這種結(jié)果存在的原因有以下幾種：（1）機體通過自分泌系統(tǒng)產(chǎn)生IGFⅡ，細胞膜上的IGF受體與之相結(jié)合后激活體內(nèi)酪氨酸激酶（PTK），PTK能催化多種底物蛋白質(zhì)酪氨酸殘基磷酸化，作用于細胞信號轉(zhuǎn)導通路，促進細胞生長、增殖、分化。BYRNE AT等[6]發(fā)現(xiàn)敲除胎鼠IGFⅡ基因后胎鼠胚胎停止發(fā)育；將肝卵細胞株植入加有IGF-Ⅱ的培養(yǎng)基中，肝卵細胞株增生速度增快，在培養(yǎng)基中注入IGF-Ⅱ受體阻滯劑后，細胞增生減緩甚至停止。（2）凋亡系統(tǒng)是正常機體清除死亡細胞、異常細胞的途徑，避免腫瘤的發(fā)生發(fā)展，IGF-Ⅱ可協(xié)助突變細胞逃逸凋亡機制的清理而發(fā)展為腫瘤，IGF-Ⅱ作用于Fas基因，導致其表達下調(diào)而達到抗凋亡的目的。（3）IGF-ⅡR與Ras、c-fos等信號通路相關(guān)，子宮肌瘤發(fā)生時，癌基因的過度表達刺激了信號通路，使IGF-ⅡR的活性上調(diào)，導致了IGF-Ⅱ表達的增高[7-10]。本研究結(jié)果表明，40例子宮肌瘤標本中IGF-Ⅱ陽性表達率高達60%，遠遠高于肌瘤旁平滑肌、正常子宮平滑肌的陽性表達率，故本文認為IGF-Ⅱ可作為子宮肌瘤生長發(fā)展的一種指標。

PCNA于1978年由Miyachi首次從紅斑狼瘡患者血清中分離發(fā)現(xiàn)的，由于其屬于增殖性細胞而得名。PCNA是真核細胞DNA聚合酶的推動因子，能與多種蛋白質(zhì)相結(jié)合，對細胞核組織內(nèi)的DNA的復制起到輔助作用，細胞周期中蛋白cyclin、激酶CDK以及CKI的抑制蛋白CKI之間具有相互調(diào)節(jié)作用，可形成不同的復合體，相互協(xié)作調(diào)控細胞的周期，PCNA同時是一種功能轉(zhuǎn)換因子，像紐帶一樣將cyclin、CDK、CKI與相應(yīng)的底物連接起來，促進了其磷酸化的進程，通過對上述因子的調(diào)控實驗對細胞凋亡周期進行作用[11-14]。本研究結(jié)果顯示：PCNA在子宮肌瘤組織、肌瘤旁平滑肌組織以及正常子宮平滑肌組織中的陽性具有顯著差異，子宮肌瘤的陽性表達率遠高于其他組織。筆者通過本文證實IGF與PCNA存在正相關(guān)關(guān)系，筆者認為IGF通過促進PCNA的表達而使子宮肌瘤組織處于增殖狀態(tài)，PCNA的表達量直接影響細胞的活性。陳文雪等[15]在研究中指出，子宮肌瘤組織PCNA陽性指數(shù)為（0.27±0.04），遠遠高于正常子宮平滑肌的PCNA陽性指數(shù)。這一數(shù)據(jù)與本研究的研究結(jié)果相符。本研究進一步發(fā)現(xiàn)子宮肌瘤的PCNA與肌瘤旁平滑肌的表達量亦存在差異。故筆者認為PCNA可作為評價細胞增殖狀態(tài)的指標。PCNA與腫瘤發(fā)生發(fā)展、分級、分期、預后、復發(fā)和轉(zhuǎn)移等各個方面具有密切相關(guān)性

總之，通過對IGF-Ⅱ、PCNA的測定，了解子宮肌瘤的發(fā)展程度，對腫瘤的預防及治療亦有重要意義，降低IGF-Ⅱ、PCNA的表達水平可能可以成為治療腫瘤的新靶向方案。

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