糞便中產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶細(xì)菌的調(diào)查

焦榮紅，孫靜鳳，余 航，汪瑞忠

(上海市浦東新區(qū)人民醫(yī)院檢驗科，上海 201200)

超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)是絲氨酸蛋白酶的衍生物，能水解大多數(shù)青霉素、廣譜及超廣譜頭孢菌素和單環(huán) β-內(nèi)酰胺抗菌藥物[1]，在1983年由德國學(xué)者首次從肺炎克雷伯菌中發(fā)現(xiàn)[2]，是臨床上多重耐藥的重要機制之一，與醫(yī)院感染有關(guān)，產(chǎn)ESBLs細(xì)菌攜帶者的篩查對于醫(yī)院感染的預(yù)防和流行病學(xué)監(jiān)測都十分重要。

材料和方法

一、材料

1.菌株來源 健康人群101例糞便標(biāo)本來源于浦東新區(qū)人民醫(yī)院健康體檢人群，經(jīng)篩查沒有腸道及其他明顯感染性疾病;168例患者標(biāo)本來源于住院患者糞便常規(guī)檢驗后的標(biāo)本，且住院前無感染，沒有使用抗菌藥物，住院后48～72 h采集糞便標(biāo)本。

2.篩選平板 產(chǎn)ESBLs腸桿菌顯色鑒定培養(yǎng)基由法國生物梅里埃公司生產(chǎn)。

3.培養(yǎng)箱 Hpx-9162MBE數(shù)顯電熱培養(yǎng)箱由上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠生產(chǎn)。

二、檢測方法

健康人群101例糞便和168例患者糞便標(biāo)本用無菌棉簽接種于產(chǎn)ESBLs腸桿菌顯色鑒定培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱孵育18～24 h后觀察結(jié)果，粉紅到酒紅色菌落或粉紅到酒紅色為中心的半透明菌落為大腸埃希菌;綠、棕綠或藍(lán)色菌落為克雷伯群;暗褐色至淺褐色菌落為變形桿菌族。

三、統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 11.0軟件進(jìn)行分析，用χ2檢驗進(jìn)行統(tǒng)計，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

一、健康人群101例糞便標(biāo)本產(chǎn)ESBLs細(xì)菌11例(10.9%)，而住院患者168例糞便標(biāo)本中產(chǎn)ESBLs細(xì)菌129例(76.8%)，其中肺炎克雷伯菌16株，占陽性菌的12.4%(16/129);大腸埃希菌113株，占陽性菌的87.6%(113/129)，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=109.74，P ＜ 0.01)。對168例患者標(biāo)本根據(jù)年齡分組，分為＜20歲組(41例)、20～60歲組(58例)以及＞60歲組(70例)，3組間產(chǎn)ESBLs細(xì)菌分別為30例(73.2%)、41例(70.7%)和58 例(82.9%)，3 組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

表1 各病區(qū)糞便標(biāo)本產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的陽性率

討 論

自臨床上越來越多地應(yīng)用大劑量廣譜甚至是超廣譜抗菌藥物以來，細(xì)菌的耐藥甚至是多重耐藥、泛耐藥已成為臨床醫(yī)生抗感染治療不得不面臨的難題，而產(chǎn)ESBLs就是其中較為復(fù)雜的一種耐藥機制。ESBLs是指耐青霉素、頭孢菌素1～3代和氨曲南的β-內(nèi)酰胺酶，但對碳青霉烯類抗菌藥物敏感，能被酶抑制劑(如克拉維酸)抑制，屬于 Bush-Jacoby-Medieros 的 2 be 組 和 2 d 組[3]。ESBLs由腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)生，最常見的是由肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、奇異變形桿菌和產(chǎn)酸克雷伯菌產(chǎn)生，本研究129株患者糞便陽性菌中，有16株是肺炎克雷伯菌，113株是大腸埃希菌。ESBLs主要由質(zhì)粒介導(dǎo)，很容易在細(xì)菌間擴散，故準(zhǔn)確及時地檢測出產(chǎn)ESBLs細(xì)菌已成為目前細(xì)菌室的重要任務(wù)之一，可以減少醫(yī)院感染的發(fā)生。

產(chǎn)ESBLs細(xì)菌感染流行在許多國家均有報道，由于經(jīng)濟(jì)條件及抗菌藥物使用的不同，在不同國家和不同醫(yī)院中的產(chǎn)ESBLs細(xì)菌檢出率不同，但總的趨勢是不斷增加的[4]。這其中很多是由于醫(yī)生大量使用第3代頭孢菌素造成的細(xì)菌耐藥，還有很多可能是醫(yī)院感染造成的。醫(yī)院內(nèi)產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的傳播與下列因素有關(guān)，如超聲波檢查耦合乳膠的污染，支氣管鏡的污染，血壓計袖帶以及體溫計污染等[3]，更多是通過醫(yī)護(hù)人員的手傳播，及時準(zhǔn)確地檢測岀產(chǎn)ESBLs細(xì)菌，控制其傳播，可有效減少醫(yī)院感染。

消化道是產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的主要寄殖場所[5]，如果患者感染了產(chǎn)ESBLs細(xì)菌，能引起該患者及患者之間的交叉感染。如本研究健康體檢人群糞便中產(chǎn)ESBLs細(xì)菌陽性率只有10.9%，而患者糞便標(biāo)本的產(chǎn)ESBLs細(xì)菌陽性率卻高達(dá)76.8%，可能與過度使用頭孢類抗菌藥物有關(guān)，所以檢測糞便中的產(chǎn)ESBLs細(xì)菌可明確濫用廣譜、超廣譜抗菌藥物的危害，同時篩選岀產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的攜帶者，也為加強醫(yī)院感染控制，預(yù)防和降低耐藥菌引起醫(yī)院感染的擴大及流行提供依據(jù)。

臨床醫(yī)生應(yīng)合理應(yīng)用抗菌藥物;保護(hù)易感人群，對篩選陽性的人群要接觸隔離，也可以采取病房隔離的辦法，以篩選結(jié)果作為患者分病房的依據(jù);切斷傳播途徑，防止醫(yī)療器械的污染以及醫(yī)護(hù)人員的手污染，減少產(chǎn)ESBLs細(xì)菌，從而減少醫(yī)院感染的發(fā)生。醫(yī)院甚至可以把糞便中產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的陽性率作為醫(yī)院感染的指標(biāo)來考核醫(yī)院感染控制的成效。

[1]張陽根，張海艷，江先海，等.超廣譜內(nèi)酰胺酶研究進(jìn)展[J].江西醫(yī)學(xué)檢驗，2007，25(3):254-255.

[2]Knothe H，Shah P，Krcmery V，et al.Transferable resistance to cefotaxime，cefoxitin，cefamandole and cefuroxime in clinical isolates of Klebsiella pheumoniae and Serratia marcescens[J].Infection，1983，11(5):315-317.

[3]鐘運華，周克云，盧月梅.超廣譜β-內(nèi)酰胺酶研究進(jìn)展[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2008，29(3):252-254.

[4]王 苒，孫耕耘.超廣譜β-內(nèi)酰胺酶研究進(jìn)展[J].國際呼吸雜志，2007，27(6):430-433.

[5]王 影.檢測病人糞便標(biāo)本中大腸桿菌耐藥分析[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2008，29(3):303-304.