附子與人參不同比例配伍對急性心衰大鼠神經—體液因子的影響

李玉梅,張 超,王楚盈,劉 佳,趙慶峰,張大方

(長春中醫藥大學,長春 130117)

心力衰竭是一種嚴重的心臟疾病,神經內分泌因素如兒茶酚胺、血管緊張素Ⅱ、內皮素、細胞因子水平等增高是加重血液動力學紊亂,毒害心肌細胞的重要因素之一。本研究將探討不同比例附子與人參配伍對急性心衰大鼠血漿N 終端腦鈉素前體(NT-proBNP)、心鈉素(ANP)及血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)的影響。

1 實驗材料

1.1 實驗動物 Wister 大鼠,體質量240～260 g,吉林大學基礎醫學院實驗動物中心提供,合格證號:SCXK(吉)-2011-0004;飼養條件:室溫(22±2)℃,濕度40%～60%,動物自由進食及飲水,自然晝夜節律。

1.2 實驗儀器 16 道生理記錄儀MP-150 系統(美國Biopac 公司);MP-2003 注射泵(上海雷恩醫療器械有限公司);小動物呼吸機HX-300S(成都泰盟科技有限公司)。

1.3 實驗藥物與試劑 附子(黑順片)、人參藥材購于長春宏檢藥業;參附注射液(陽性對照藥),雅安三九藥業有限公司,專利號:ZL96117458.7,批號:100513,規格:10 mL/支;戊巴比妥鈉,上海愛紫特生物科技有限公司批號: 100808;烏拉坦,國藥集團化學試劑有限公司,批號:T20 090811;NT-proBNP、ANP、AngⅡ試試盒:北京伊普瑞斯科技有限公司。

2 實驗方法

2.1 造模及給藥分組 取健康Wister 大鼠64 只,雌雄各半,體質量240～260 g,隨機分成空白對照組(KB)、模型對照組(MX)、參附注射液陽性對照組(YX)、附子組(FZ)、人參組(RS)、附子∶人參=1∶0.5組(FR1∶0.5)、附子∶人參=1∶1組(FR1∶1)、附子∶人參=1∶2組(FR1∶2),每組各8 只。參照文獻[1]方法,進行左心室插管,記錄各組LVSP、左室最大上升速率(+dp/dtmax)、左室最大下降速率(-dp/dtmax)的正常指標后,開胸并連接呼吸機,穩定后股靜脈恒速注射1.5%戊巴比妥納(6 mL/h)當+dp/dtmax 降到正常值的20%～40%穩定后,以0.5%戊巴比妥鈉4.5 mL/h 保證模型穩定,模型穩定5 min 以上即視為心衰模型成功。經十二指腸給予受試藥物,陽性對照藥舌下靜脈注射給藥,模型組給予等量的蒸餾水,空白組不給任何藥物,給藥后60 min 于腹主動脈取血,分離血漿,按試劑盒方法,測定血漿NT-proBNP、ANP、Ang Ⅱ的含量。

2.2 統計學處理方法 采用SPSS 統計學軟件處理,均采用方差分析方法,數據用均數±標準差()表示。

3 實驗結果

3.1 血漿NT-proBNP 測定結果 造模后,NT-proBNP含量明顯升高,與空白組比較有統計學意義(P ＜0.05)。給藥治療后各組大鼠血漿NT-proBNP 含量與模型組比均有所降低,尤以附子人參1∶0.5組和附子人參1∶1組作用更強(P ＜0.05)。

3.2 心房肽(ANP)檢測結果 模型組與空白組比較,ANP 含量明顯增高。給藥后,ANP 含量有所下降。且附子人參配伍后,對ANP 的調節作用有所增強,尤以附子人參1∶0.5組作用更為明顯,與模型組比較有統計學意義(P ＜0.01)。

3.3 Ang Ⅱ測定結果 造模后模型大鼠血漿中Ang Ⅱ顯著上升,給藥治療后與模型組比較,其含量均有所下降。實驗結果見表1。

表1 血漿NT-proBNP、ANP、Ang Ⅱ含量測定結果(,n=8)

表1 血漿NT-proBNP、ANP、Ang Ⅱ含量測定結果(,n=8)

注:與KB組比較,#P ＜0.05,###P ＜0.001;與MX組比較,△P ＜0.05,△△P ＜0.01。

4 討論

附子為臨床常用有毒中藥,具有強心、抑制心室顫動,改善學流動力學指標,緩解心衰的治療作用[2-4],而在心衰的發展變化中,神經—體液因子的釋放也起著重要作用,探討其與心衰的相關性,有利于更進一步分析附子抗心衰用作的機制。

BNP 和NT-proBNP 為利鈉肽家族中的成員,BNP主要由心室分泌,當心肌受到牽張或室壁壓力增大時,心肌BNP 前體原(PreProBNP)裂解為BNP、NTproBNP,二者與心功能有良好的相關性,NT-ProBNP較BNP 體外穩定性高,且具有個體差異較小、濃度較高等優點,利于測定,NT-ProBNP 與BNP 相比是更敏感的發現早期心臟功能不全的標志物,是較理想的檢測指標[5]。研究結果表明附子人參1∶0.5組降低血中NT-proBNP 作用最強。分析原因,可能是附子人參均有一定的強心作用,其相互配伍后,對急性心衰有更好的改善作用,進而調節NT-proBNP 的釋放作用。

心房肽(ANP)是心房合成和分泌的一種具有生物活性的多肽激素,ANP 主要在心功能不全時最大程度激活。血漿ANP 升高,這對判斷有無心力衰竭及心力衰竭程度有幫助[6]。本研究表明:附子人參配伍后,對ANP 的調節作用尤以附子人參1∶0.5組作用最為明顯。表明附子與人參的強心作用,可能與調節ANP 的釋放有關。

心衰與腎素—血管緊張素—醛固酮系統(RAAS)的激活密切相關[7]。Ang Ⅱ是RAAS 中最為重要的活性激素,在病理情況下,Ang Ⅱ是心室重構的重要因素,Ang Ⅱ可誘導小動脈收縮,增加醛固酮分泌,增強交感神經活性,引起心臟和血管重塑,最終導致高血壓、心肌肥厚、心力衰竭等病理變化[8]。本結果表明:各給藥組血液中Ang Ⅱ含量降低,尤以附子人參1∶0.5組作用明顯(P ＜0.05),Ang Ⅱ含量的降低,提示治療藥對心衰有緩解作用。

綜上所述,實驗結果提示附子與人參按適當比例配伍后可能通過提高心肌功能,反饋調節急性心衰大鼠血漿Nt-proBNP、ANP、Ang Ⅱ的含量,從而更好的達到回陽救逆,改善、緩解心功能的作用。

[1]徐淑云,卞如濂,陳修.藥理實驗方法學[M].3 版.北京:人民衛生出版社,2002:976.

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[4]劉智,張大方,曲曉波,等.炮制對附子減毒變化及氯仿致顫作用的比較研究[J].吉林中醫藥,2011,31(5):469-470,474.

[5]付新,黃振文,張菲斐,等.N 端前體腦鈉肽與穩定型心絞痛合并糖尿病患者冠脈病變的關系[J].中華高血壓雜志,2009,17(1):67-70.

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[7]Bhalla V,Maisel A S.B-type natriuretic peptide in the neuronh ormonal hierarchy in heart failure[J].Cardiovasc Rev Rep,2004,25:100-104.

[8]肖駿,余強.血管緊張素Ⅱ受體阻滯劑在充血性心力衰竭中的作用機制和應用進展[J].醫學綜述,2005,11(4):312-313.