子宮腺肌病患者CD147蛋白、MMP-9的表達

李靜瑜 (鄭州大學第二附屬醫院婦產科，河南 鄭州 450002)

子宮腺肌病(AM)是一種良性病變，近年來發病率逐漸升高，并且其發病年齡越來越年輕化〔1〕。目前AM還沒有理想的治療方法，因為其發病機制還沒有完全闡明。近年來發現的細胞表面黏附分子CD147蛋白是一個重要的MMPs誘導物，在惡性腫瘤的浸潤和轉移中均具有非常重要的意義〔2〕。本文探討在AM患者中CD147蛋白及其MMP-9的表達情況。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2010年6月至2011年6月來我院進行治療的AM患者51例，取其在位內膜與異位內膜，年齡37～55歲，平均(41.69±6.25)歲，其中35例為增生期的在位內膜，16例屬于分泌期;選取30例同期來我院進行治療的子宮肌瘤患者作為對照組 A，取其子宮內膜，年齡 31～52歲，平均(42.06±7.13)歲，其中有16例為增生期的子宮內膜，14例為分泌期;選取30例同期來我院進行健康體檢的健康女性作為對照組B，年齡35～53歲，平均(43.97±7.50)歲。三組患者的一般資料差異不顯著(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 標本采集

1.2.1 組織標本 全子宮切除術后無菌采集數塊在位、異位內膜組織，采集均在術后5 min內進行，大小約為1.0×1.0×1.0 cm，鈣化區和出血點在采集時要盡量避開，采集后用生理鹽水進行反復的漂洗，水分使用無菌紗布塊吸凈，組織使用多聚甲醛溶液固定，濃度4%，時間24 h，常規脫水，石蠟包埋，4 μm連續切片，染色方法使用HE染色，測定方法為免疫組織化學方法。

1.2.2 血清標本 空腹抽取所有研究對象的靜脈血，約3 ml，抽取完后靜置0.5 h，3 000 r/min離心10 min，取上層血清，保存于－80℃備用。

1.3 試劑 北京中杉金橋生物制品有限公司提供的CD147、MMP-9兔抗人多克隆抗體;北京博奧森公司提供的免疫組化試劑盒;武漢柏士德生物科技有限公司提供的DAB顯色試劑盒、CD147 ELISA試劑盒。

1.4 免疫組織化學染色及檢測方法 使用SP法對免疫組織進行化學染色，檢測方法采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法，嚴格按照試劑盒的說明書進行操作。

1.5 統計學方法 采用SPSS13.0軟件進行處理，計量資料以±s表示，多組間計量資料行方差分析，兩組間計量資料行t檢驗，兩因素行Pearson直線相關t檢驗。

2 結果

2.1 CD147蛋白的表達情況 與對照組A比較，CD147蛋白表達量在觀察組異位內膜、在位內膜及間質細胞中均有較高的表達(P＜0.05);與在位內膜比較，異位內膜腺上皮細胞中有明顯較高的表達(P＜0.05);異位內膜間質細胞的CD147蛋白表達差別較小(t=0.62，P＞0.05);與在位內膜分泌期比較，增殖期具有較高的CD147蛋白表達量(t=3.58，P＜0.05);與對照組A的子宮內膜分泌期比較，其增殖期的差異較小(t=0.75，P＞0.05)。見表1。

表1 CD147在觀察組與對照組A中的表達(±s)

表1 CD147在觀察組與對照組A中的表達(±s)

與對照組A比較:1)P＜0.05;與在位內膜比較:2)P＜0.05;與間質細胞比較:3)P＜0.05;與分泌期比較:4)P＜0.05;下表同

組別 n 腺上皮細胞 間質細胞觀察組異位內膜 51 0.206±0.0111)2)3) 0.106±0.0051)觀察組在位內膜 51 0.172±0.0081)3) 0.103±0.0101)增殖期 35 0.180±0.0414) 0.106±0.007分泌期 16 0.153±0.039 0.092±0.013對照組A 30 0.092±0.005 0.048±0.014增殖期 16 0.093±0.004 0.049±0.012分泌期14 0.091±0.007 0.047±0.009

2.2 兩組MMP-9的表達情況 與對照組A比較，MMP-9在觀察組異位內膜、在位內膜的子宮內膜腺上皮細胞及間質細胞中有明顯較高的表達量(P＜0.05)，與在位內膜比較，MMP-9在異位內膜腺上皮細胞及間質細胞中具有明顯較高的表達(P＜0.05)。與觀察組在位內膜的分泌期比較，MMP-9在增殖期的表達差別較小(t=1.14，P＞0.05);與對照組A的子宮內膜分泌期比較，增殖期具有明顯較高的表達(t=3.25，P＜0.05)。見表2。

表2 MMP-9在觀察組與對照組A中的表達(±s)

表2 MMP-9在觀察組與對照組A中的表達(±s)

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2.3 相關性分析 CD147蛋白與MMP-9的表達在觀察組的異位內膜腺上皮細胞、在位內膜的腺上皮細胞中呈明顯正相關(r=0.895，0.817，P＜0.05);CD147蛋白在對照組A子宮內膜中的表達與MMP-9無相關性(r=0.386，P＞0.05)。

2.4 血清sCD147水平 與對照組A比較，sCD147在觀察組中具有較高的水平，無顯著性差異(t=0.86，P＞0.05);與對照組B比較，sCD147在觀察組和對照組A中具有較高的表達水平(t=2.97，P ＜0.05)。

3 討論

CD147是一類單次跨膜糖蛋白，屬于免疫球蛋白超家族，它在各種上皮細胞中均有正常的表達，許多學者發現多種惡性腫瘤中CD147均具有較高的表達，并且與腫瘤的類型有密切的關系，對疾病的預后有一定的影響〔3〕。MMP-9是一種蛋白水解酶，其在正常組織中和腫瘤細胞中有完全不同的表達情況，前者具有較少的表達，在后者中有相對較高的表達，Ⅳ型膠原與明膠是細胞外基質和基底膜中的主要成分，MMP-9能夠對以上的各種成分起到降解的作用，在細胞的浸潤和轉移中有非常重要的意義〔4〕。

研究結果與相關報道相一致，提示在AM患者的發病過程中CD147蛋白與MMP-9所發揮的作用非常重要;并且其子宮內膜的蛋白表達或者是功能在在位內膜發生異位前就已經發生了變化，這也可能是AM發生的一個重要原因;結果提示與在位內膜比較，異位內膜的侵襲能力更強。研究結果提示MMP-9的合成和分泌可以由CD147蛋白誘導產生，其途徑可能為對子宮內膜成纖維細胞進行刺激實現的，使子宮內膜細胞外基質和基底膜發生降解，對子宮內膜腺體和間質侵入子宮肌層起到促進作用〔2～5〕;此外，還有報道表明 MMP-9還可以對毛細血管的增生等起到明顯的促進作用，在AM的發生和發展過程中CD147蛋白和MMP-9均具有非常重要的作用。

試驗中對AM患者在位內膜的不同時期進行研究，結果發現，與分泌期比較，增殖期具有較高的CD147蛋白表達量，而與分泌期比較，MMP-9在增殖期中的表達量相差較小，孕激素在月經周期分泌期顯著地增高，在AM患者中能夠對CD147蛋白的表達和糖基化起到一定的抑制作用，而對MMP-9在子宮內膜的表達沒有明顯的影響。研究結果提示，在對照組A患者的月經周期中MMP-9的表達可能會受到分泌期增高的孕激素的抑制。另外AM發生和發展中sCD147發揮了重要的作用。有報道表明，sCD147對于MMPs的表達和分泌能夠起到促進作用，主要由于膜型CD147位于腫瘤細胞膜表面，其結合sCD147將信號傳入細胞內，從而實現以上的作用。另外，還有學者發現，sCD147還可以對膜型CD147的表達起到正反饋調節作用，說明sCD147在腫瘤的遠處轉移中所起的作用非常的重要。可能是由于本次試驗所選取的樣本較小，也可能是因為sCD147在子宮肌瘤患者中的高表達較為輕微。

總之，CD147蛋白和MMP-9、血清sCD147蛋白在子宮腺肌病患者的異位與在位內膜組織中具有較高的表達水平可能與子宮腺肌病有關，對MMP-9的合成與分泌起到促進作用可能是CD147蛋白發揮作用的途徑。

1 張銀萍，黃月麗.中西醫結合治療子宮腺肌病的臨床觀察〔J〕，中醫臨床研究，2011;3(9):38-9.

2 郭 哲.子宮內膜腺癌組織中CD147、MMP-2的表達變化及意義〔J〕，山東醫藥，2011;51(50):111-2.

3 劉鵬飛，任 強，李澤福，等.CD147及MMP-2在膠質細胞瘤中的表達及意義〔J〕.濱州醫學院學報，2011;34(4):264-6.

4 孫淑文，王玉亭，王道奎，等.MMP-2，MMP-9，TIMP-1和TIMP-2在膠質瘤中的表達及臨床意義〔J〕.濰坊醫學院學報，2011;33(1):16-8.

5 宋 揚.子宮腺肌病98例臨床分析〔J〕，河北醫學，2012;18(2):209-11.