中風(fēng)芪紅利水膠囊對(duì)急性腦缺血大鼠凝血與纖溶系統(tǒng)的影響*

關(guān)運(yùn)祥

(河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腦病三區(qū)，河南鄭州450000)

中風(fēng)芪紅利水膠囊為河南中醫(yī)學(xué)院一附院博士生導(dǎo)師王新志教授在吸取前人治療經(jīng)驗(yàn)和教訓(xùn)，博覽歷代中醫(yī)古籍，并根據(jù)多年臨床的實(shí)踐，結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究成果研制出的針對(duì)缺血性中風(fēng)氣虛血瘀、水濕停滯的中藥復(fù)方制劑，臨床運(yùn)用數(shù)十年，療效明顯。為探討其治療急性腦缺血損傷的發(fā)生機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)觀察了中風(fēng)芪紅利水膠囊對(duì)急性腦缺血大鼠凝血及纖溶系統(tǒng)的影響。

1 材料與方法

1.1 動(dòng) 物

健康Wistar大鼠100只，普通級(jí)，雄性，體質(zhì)量(310±20)g，由鄭州大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.2 藥品與試劑

中風(fēng)芪紅利水膠囊［鄭藥制劑(2002)BW－10208］，0.5 g/粒，由河南中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院制劑室提供。將該藥浸膏，加入由蒸餾水制成的5 g/L羧甲基纖維素鈉溶液中，配制成濃度為375，125 g/L的混懸藥液。按10 μL/g灌胃，相當(dāng)于成人劑量的30，10倍，依次為高、低劑量組。步長(zhǎng)腦心通膠囊，規(guī)格0.4 g/粒，陜西咸陽(yáng)步長(zhǎng)制藥有限公司產(chǎn)品，批號(hào)Z050715。將膠囊內(nèi)容物加入蒸餾水制成的5 g/L羧甲基纖維素鈉溶液中，配成濃度為276 g/L的混懸藥液。按10 μL/g灌胃，相當(dāng)成人劑量的10倍。活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶原時(shí)間(PT)、纖維蛋白原(FIB)試劑盒，由鄭州世帝儀器公司提供，批號(hào)3400350；D－二聚體試劑盒北京捷門生物公司提供，批號(hào)20041062。

1.3 模型的建立、分組與給藥

將100只Wistar大鼠根據(jù)體質(zhì)量隨機(jī)分成10組，每組10只；任取1組為假手術(shù)組，其余9組用于建立腦缺血模型。參照文獻(xiàn)方法［1］制備Wistar大鼠大腦中動(dòng)脈缺血模型。大鼠蘇醒后，動(dòng)物向左側(cè)做轉(zhuǎn)圈運(yùn)動(dòng)，即表示造模成功。假手術(shù)組分離頸總動(dòng)脈、頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈，僅結(jié)扎頸外動(dòng)脈。根據(jù)Kulurz的神經(jīng)缺損三級(jí)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)［2］，將符合神經(jīng)缺損評(píng)分二級(jí)的造模成功大鼠40只，根據(jù)體質(zhì)量隨機(jī)分為步長(zhǎng)腦心通組，中風(fēng)芪紅利水膠囊高、低劑量組，模型對(duì)照組4組，每組10只。步長(zhǎng)腦心通組給予276 g/L步長(zhǎng)腦心通混懸藥液，中風(fēng)芪紅利水膠囊高、低劑量組依次給予375，125 g/L中風(fēng)芪紅利水膠囊混懸藥液，模型對(duì)照組和假手術(shù)組給5 g/L CMC-Na；均按10 μL/g體質(zhì)量灌胃給藥，1 d 1次。各組術(shù)后第1天開(kāi)始給藥，第4天同時(shí)處死，最后1次給藥在采集標(biāo)本前1 h進(jìn)行。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)

檢測(cè)大鼠血清中FIB、D－二聚體、PT和APTT。取大鼠的腹主動(dòng)脈血1.8 mL，注入含有枸櫞酸鈉(0.109 mol/L)0.2 mL 硅化玻璃試管中，混勻，3 000 r/min離心10 min，分離血漿在2～8℃保存。各檢測(cè)指標(biāo)按測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)由專人操作，6 h之內(nèi)測(cè)定完畢。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 14.0統(tǒng)計(jì)分析軟件處理。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)()±標(biāo)準(zhǔn)差(s)表示，組間對(duì)比采用 t檢驗(yàn)。以P＜0.05為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠PT、APPT對(duì)比

與假手術(shù)組對(duì)比，模型對(duì)照組大鼠的PT、APTT縮短，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。與模型對(duì)照組對(duì)比，中風(fēng)芪紅利水膠囊高、低劑量組和步長(zhǎng)腦心通組 PT、APTT延長(zhǎng)，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。與步長(zhǎng)腦心通組對(duì)比，中風(fēng)芪紅利水膠囊高、低劑量組 PT、APTT延長(zhǎng)，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。中風(fēng)芪紅利水膠囊高、低劑量組之間兩指標(biāo)對(duì)比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表1。

表1 各組大鼠PT、APTT對(duì)比 ±s

表1 各組大鼠PT、APTT對(duì)比 ±s

注：與假手術(shù)組對(duì)比，* P＜0.05；與模型對(duì)照組對(duì)比，##P＜0.01；與步長(zhǎng)腦心通組對(duì)比，ΔΔ P ＜0.01。

PT/min APTT/min假手術(shù)組組 別 動(dòng)物數(shù)10 12.02 ±0.26 32.47 ± O.25模型對(duì)照組 10 10.64±0.62* 30.17 ±0.20*步長(zhǎng)腦心通組 10 12.84±0.38## 33.87 ±0.14##中風(fēng)芪紅利水高劑量組 10 14.47±0.24##ΔΔ 35.48±0.45##ΔΔ中風(fēng)芪紅利水低劑量組 10 14.39±0.32##ΔΔ 35.18±0.74##ΔΔ

2.2 各組大鼠FIB、D－二聚體含量對(duì)比

與假手術(shù)組對(duì)比，模型對(duì)照組大鼠血漿FIB含量升高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而D－二聚體含量差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。與模型對(duì)照組對(duì)比，中風(fēng)芪紅利水膠囊高、低劑量組和步長(zhǎng)腦心通組FIB含量降低，D－二聚體的含量明顯升高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01或P＜0.05)。與步長(zhǎng)腦心通組對(duì)比，中風(fēng)芪紅利水膠囊高、低劑量組FIB含量降低，D－二聚體的含量明顯升高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。中風(fēng)芪紅利水膠囊高、低劑量組間兩指標(biāo)對(duì)比，差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見(jiàn)表2。

表2 各組大鼠FIB、D－二聚體含量對(duì)比 ±s

表2 各組大鼠FIB、D－二聚體含量對(duì)比 ±s

注：與假手術(shù)組對(duì)比，* P ＜0.05；與模型對(duì)照組對(duì)比，#P ＜0.05，##P ＜0.01；與步長(zhǎng)腦心通組對(duì)比，ΔΔ P＜0.01。

組 別 動(dòng)物數(shù) FIB/(g·L－1) D－二聚體/(mg·L－1)10 3.16 ±1.52 0.19 ±2.17模型對(duì)照組 10 3.87 ±2.27* 0.81 ±1.44步長(zhǎng)腦心通組 10 2.37 ±1.08# 2.96 ±2.73#芪紅利水高劑量組 10 2.08±2.03##ΔΔ 4.94±0.17##ΔΔ芪紅利水低劑量組 10 2.11±2.08##ΔΔ 4.67±0.13##假手術(shù)組ΔΔ

3 討論

在長(zhǎng)期的臨床實(shí)踐中，缺血性中風(fēng)的病機(jī)被認(rèn)為是在陰陽(yáng)氣血虧虛的基礎(chǔ)上，在憂患惱怒、嗜食厚味、勞倦內(nèi)傷等誘因作用下，臟腑功能失調(diào)，氣虛益甚，氣血逆亂于腦，致腦脈痹阻。津血同源，互相存用，瘀血內(nèi)阻，血不利則為水，營(yíng)津不行致水濁內(nèi)生，壅塞氣機(jī)，而加重瘀血產(chǎn)生，形成瘀水互結(jié)腦脈痹阻的病理變化。缺血性中風(fēng)的病位在腦竅，病性是本虛標(biāo)實(shí)。中風(fēng)芪紅利水膠囊由黃芪、紅花、水蛭、益母草、丹參等藥物組成。方中重用黃芪，大補(bǔ)脾胃之氣，使氣旺促進(jìn)血行，祛瘀而不傷正，并有利水之效，為君藥；紅花、益母草、水蛭、丹參均為臣藥。諸藥合用，共奏利水通絡(luò)、益氣活血之效。凝血酶原時(shí)間用以檢測(cè)外源性凝血功能，部分活化凝血活酶時(shí)間用以檢測(cè)內(nèi)源性凝血功能。纖維蛋白原是影響全血及血漿黏度的重要指標(biāo)。D－二聚體是纖維蛋白被纖溶酶水解后產(chǎn)生的一種特異性的降解產(chǎn)物，是反映體內(nèi)血栓形成和纖溶系統(tǒng)活化的分子標(biāo)志物。目前許多資料［3］研究顯示：纖維蛋白原、D － 二聚體、PT、APTT是監(jiān)測(cè)凝血與纖溶系統(tǒng)的非常有意義的實(shí)驗(yàn)指標(biāo)，并對(duì)血栓性疾病的明確診斷、療效觀察具有重要的意義。急性腦梗死患者的體內(nèi)凝血系統(tǒng)與纖溶系統(tǒng)失衡，血液呈現(xiàn)高凝狀態(tài)。急性期治療的目標(biāo)在于阻止凝血狀態(tài)進(jìn)一步惡化發(fā)展，促進(jìn)纖溶系統(tǒng)激活，加速血栓溶解［4］。本研究顯示：中風(fēng)芪紅利水膠囊可使模型大鼠PT、APTT時(shí)間明顯延長(zhǎng)，纖維蛋白原含量下降，D－二聚體含量增加。表明：中風(fēng)芪紅利水膠囊可增強(qiáng)凝血功能，降低全血及血漿黏度，激發(fā)纖溶系統(tǒng)活性，促進(jìn)血栓溶解和血管再通。此為中風(fēng)芪紅利水膠囊的臨床使用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

［1］張學(xué)輝，張嘉眉.補(bǔ)陽(yáng)還五湯對(duì)大鼠腦梗死 ET、SOD、MDA 的影響［J］.中醫(yī)藥學(xué)刊，2002，20(4)：462.

［2］Kuluz JW，Prado RJ.The effect of nitric oxide synthasein fract volume after reverible focal ischemia in conscious rats［J］.Stoke，1993，24(12)：2023 －2029.

［3］黃興漢.缺血性腦血管病的凝血纖溶變化及溶栓治療［J］.卒中與神經(jīng)疾病，2006，3(2)：101.

［4］黃五軍.缺血性腦血管病凝血纖溶變化和溶栓治療［J］.卒中與神經(jīng)疾病，2003，3(2)：101.