健脾理氣方對痞滿患者血漿MTL、CGRP、NO的影響

趙 鵬，黃穗平，尚文璠，譚明義

(1.廣東省中西醫結合醫院，廣東佛山528200;2.廣東省中醫院，廣東廣州510120)

痞滿患者多伴有早飽、噯氣、反酸、惡心等癥狀。在功能性消化不良4個亞型中，動力障礙型約占50%，此類患者胃排空延遲、胃動力減低是其主要改變。有研究［1］發現:此類患者多有胃排空遲緩并伴有血漿胃動素(MTL)水平明顯降低。降鈣素基因相關肽(CGRP)可降低胃內壓，抑制胃腸運動，松弛胃竇環行肌和胃底縱行肌，通過外周靜脈注射降鈣素基因相關肽可明顯延遲胃排空。有研究［2］發現:胃竇壁內一氧化氮合酶(NOS)及神經纖維末梢增多、活性增強普遍見于胃排空延遲的消化不良患者。健脾理氣方由四君子湯加味而成，經過臨床廣泛運用，治療痞滿病療效確切。2007年3月—2008年1月，筆者針對健脾理氣方對脾虛氣滯型痞滿病患者血漿中MTL、CGRP、NO等胃腸動力相關因子的影響進行研究，以探討該方治療痞滿病的作用機制。

1 一般資料

選擇廣東省中醫院、廣州軍區總醫院消化內科住院和門診脾虛氣滯型痞滿病患者63例，采用隨機數字表法隨機分為治療組和對照組。治療組32例，男14例，女18例;年齡18～65歲，平均(37.59±1.98)歲;病程1 個月 ～2 a，平均(10.64 ±3.42)個月。對照組31例，男18例，女13例;年齡18～65 歲，平均(38.26 ±1.67)歲;病程 1 個月 ～3 a，平均(11.27±3.28)個月。兩組患者一般資料對比，差別無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

2 診斷標準

中醫診斷、辨證標準按照《中藥新藥治療痞滿證的臨床研究指導原則》［3］;西醫診斷標準按照《2003年中國中西醫結合學會重慶會議制訂的《慢性胃炎中西醫結合診斷標準》［4］和2006年9月中華醫學會消化病學分會全國第二屆慢性胃炎共識上海會議制訂的《慢性胃炎診斷標準》［5］。

3 試驗病例標準

3.1 納入病例標準

符合痞滿病中西醫診斷標準及中醫辨證的患者，可納入試驗病例。

3.2 排除病例標準

①有過多兼夾證或明顯兼夾證者;②辨證不明及影響消化道動力的器質性疾病;③全身其他系統疾病;④近2周內，使用過影響胃腸動力藥物者。

4 治療方法

治療組給予健脾理氣方，藥物組成:陳皮10 g，法半夏 15 g，木香 10 g，砂仁 10 g，黨參 15 g，茯苓15 g，白術 15 g，浙貝母10 g，海螵蛸15 g，郁金15 g，延胡索15 g，炙甘草6 g。對照組給予《國家藥典》香砂六君子方，藥物組成:木香6 g，砂仁6 g，黨參10 g，茯苓 9 g，白術 9 g，陳皮 9 g，法半夏 12 g，炙甘草6 g。為增強患者的依從性，兩組均選用免煎顆粒劑沖服，每日2次。試驗期間不得使用對本病本證有治療作用的其他藥物。

兩組均以4周為1個療程，共治療1個療程。

5 檢測試劑與材料

5.1 主要試劑

抑肽酶。MTL和CGRP指標檢測試劑盒:內含酶聯板、標準品(凍干品)、樣品稀釋液、檢測稀釋液AB、檢測溶液AB、底物溶液、濃洗滌液。NO酶標檢測試劑盒。

5.2 主要器材

一次性采血器、微量移液器、一次性微量試管、低速臺式離心機、－70℃冷凍冰箱、抗凝采血管、微量有機分析專用超純水機、恒溫生化培養箱、離心機、酶標儀、分光光度計。

6 檢測指標與方法

6.1 血液采集

在早晨采集外周靜脈血2 mL置于抗凝采血管中，在4℃以3 000 r/min轉速離心10 min，分離的血漿存放于－70℃超低溫冰箱。治療前后各采血1次。

6.2 MTL 檢測

采用酶聯免疫法。首先將試劑恢復到室溫，設標準、待測樣品、空白孔，除空白孔外，其余各孔分別加待測樣品、標準品各100 μL，輕晃，混合均勻，酶標板加蓋，37℃反應120 min;棄液，甩干;每孔先后加檢測溶液 A、B 各100 μL，37 ℃，60 min，棄液，洗板，甩干;之后每孔加底物溶液90 μL，37℃避光顯色30 min;每孔加終止溶液50 μL;15 min內用酶聯儀依序測量各孔OD值，代入標準曲線回歸方程式，計算樣品濃度。

6.3 CGRP 檢測

檢測步驟同MTL檢測方法。

6.4 NO 檢測

一氧化氮在血液中以亞硝酸鹽和硝酸鹽的形式存在，測得這兩類物質的濃度便可得知NO的濃度。取試管數支分別標明空白管、標準管、測定管;按試劑說明書分別加入等量蒸餾水、20 μmol/L亞硝酸鈉、樣品，混勻后放置 10 min，3 500 ～4 000 r/min，離心10 min，取上清液，分別加入顯色劑0.4 mL混合均勻，15 min之后進行550 nm比色，0.5 cm光徑比色杯，水調零，測每個試管的 OD值，計算 NO濃度。

7 統計學方法

采用SPSS 13.0統計分析軟件處理。計量資料數據以均數()±標準差(s)表示，組間比較采用t檢驗;計數資料組間比較采用χ2檢驗;等級資料組間比較采用Ridit分析。以P＜0.05為差別有統計學意義。

8 結果

8.1 兩組基線期組間對比

結果顯示:治療前治療組與對照組血漿MTL、CGRP、NO濃度組間對比，差別無統計學意義(P＞0.05)。

8.2 兩組治療4周后血漿 NO、CGRP、MTL水平對比

見表1。

表1 兩組治療4周后血漿NO、CGRP、MTL水平對比 ±s

表1 兩組治療4周后血漿NO、CGRP、MTL水平對比 ±s

注:與對照組對比，＊＊ P ＜0.01。

組 別 例數 血漿NO/(μmol·L-1) CGRP/(μg·L-1) MTL/(ng·L-1)治療組 32 39.22±4.32＊＊ 33.75±3.86＊＊ 286.51±5.67＊＊31 43.10 ±3.94 56.44 ±3.77 242.61 ±5.74對照組

8.3 治療組治療4周后與治療前血漿NO、CGRP、MTL水平對比

見表2。

表2 治療組治療4周后與治療前血漿NO、CGRP、MTL水平對比 ±s

表2 治療組治療4周后與治療前血漿NO、CGRP、MTL水平對比 ±s

注:與治療前對比，＊＊ P ＜0.01。

時 間 例數 血漿NO/(μmol·L-1) CGRP/(μg·L-1) MTL/(ng·L-1)治療后 32 39.22±4.32＊＊ 33.75±3.86＊＊ 286.51±5.67＊＊31 58.37 ±3.23 86.43 ±3.76 188.21 ±6.32治療前

9 討論

痞滿的病因可歸納為素體脾虛、外邪入侵、飲食不節、情志不暢;病機可總結為中焦氣機不利，脾升胃降失常。臨床主證為自覺心下痞塞，胸膈脹滿，觸之無形，按之柔軟，壓之無痛［6］。有研究［7］表明:健脾中藥顆粒劑能明顯改善此類患者的鋇條排空率、促進胃動力。有學者研究［8］發現:脾虛型痞滿患者的胃動力較正常人低，血漿胃動力指標紊亂，血漿胃腸動力因子與痞滿的證型表現有相關性，脾虛患者血胃動素濃度顯著低于正常人。胃腸道受到神經—體液調節系統的精密調控。胃動素是啟動消化間期胃腸移行性復合運動的重要激素，在消化間期Ⅲ相誘發上消化道蠕動，并誘發胃電活動，功效強、作用久。有實驗表明:提高胃動力低下大鼠血液及胃竇組織中胃動素含量能夠提高大鼠的胃腸動力［9］。相應的中藥煎劑能明顯提高模型大鼠血漿中胃動素含量，改善胃動力障礙大鼠的胃腸機能狀態，增加其胃腸運動功能［10］。胃竇和十二指腸存在著特異的胃動素受體，胃動素通過直接作用于平滑肌細胞上的胃動素受體而起作用，胃的排空與血MTL濃度有高度相關性［11］。血 MTL濃度與胃電圖的研究表明:胃電圖中的平均振幅和頻率與MTL呈線性關系。CGRP廣泛分布于胃腸道黏膜下層和肌間神經叢，具有調節胃腸血流及運動功能的作用，能降低細胞膜對Ca2+的通透性，影響細胞內外的鈣離子濃度進而影響胃腸平滑肌細胞的舒縮活動［12］;此外，CGRP能促進胃腸生長抑素的釋放從而抑制胃腸蠕動［13］。

NO作為神經傳遞和調節的媒介，具有重要的胃腸運動調節作用，對胃腸道的作用與MTL相反，能使胃停止收縮，進而產生容受性舒張運動，胃的運動狀態與幽門、胃竇、胃體處黏膜血流中的NO濃度相關。有報道［14］稱:外源性NO能引起類似非腎上腺素能非膽堿能神經刺激下胃腸平滑肌的松弛和超極化作用。戴益琛等［15］報道幽門松弛與閉合狀態和胃的局部黏膜中NO水平相關，松弛者比閉合者NO含量明顯增加。因此，推斷NO水平升高是引起幽門松弛的重要因素。健脾理氣方由補益脾胃之氣、補中兼行、溫而不燥的四君子湯加味而成。本研究顯示:健脾理氣方與香砂六君子方都能使脾虛氣滯型痞滿患者血CGRP、NO濃度下降、血MTL濃度升高;組間對比顯示:健脾理氣方對脾虛氣滯型痞滿患者的胃腸動力相關因子的改善程度優于香砂六君子組，也表明健脾理氣方具有明確的促胃動力作用。

動物實驗發現:四君子湯能升高脾虛模型大鼠的血MTL水平，加強其胃腸運動［16］，具有雙向調節胃腸運動的功效［17－18］。白術能明顯增加胃竇肌間神經叢中P物質的含量，減少血管活性腸肽、NOS的含量，這在白術的促動力效應中起一定作用。上述研究表明:健脾理氣方可有效調節血漿中MTL、CGRP、NO等胃腸動力相關因子。筆者推測此應該是健脾理氣方治療脾虛氣滯型痞滿病的作用機制之一。

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