兩種不同工藝制備的芪茵顆粒對大鼠高脂血癥治療作用的研究

薛清方 聶繼紅

1.新疆醫科大學33期研究生，新疆 烏魯木齊 830011;2.新疆醫科大學附屬中醫醫院，新疆 烏魯木齊 830011

高脂血癥是體內脂類代謝紊亂導致血脂水平增高的一種疾病，并由此引發一系列的臨床病理表現。大量研究表明高脂血癥是冠心病、粥樣動脈硬化形成的主要因素。隨著人們生活水平的不斷提高，高血脂的發病率有明顯增高的趨勢。

芪茵顆粒是我院曾斌芳主任醫師多年來的經驗方，臨床療效顯著。其功效為疏肝扶脾補腎，消導化痰，活血消積，用于肝郁脾虛脂肪性肝病。本實驗通過研究兩種不同工藝制備的芪茵顆粒對大鼠高脂血癥治療作用的效果，從而為芪茵工藝的制定提供科學依據［1－3］。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 Wistar大鼠50只，體重180～220g，雌雄各半，由新疆醫科大學實驗動物中心提供，實驗動物生產許可證號:SCXK(新)2003－0002。

1.1.2 高脂飼料的制備 高脂飼料由膽固醇3kg(2%)、膽鹽1.5kg(1%)、丙硫氧嘧啶0.3kg(0.2%)、豬油15kg(10%)、蛋黃粉7.5kg(5%)、基礎飼料122.7kg(81.8%)配制而成。其中豬油為市售豬油加熱，濾過，去渣而成。蛋黃粉是將雞蛋煮熟后，將蛋黃剝出、過篩、60℃烘干。飼料的混勻壓制由新疆實驗動物研究中心代為加工。

1.1.3 實驗儀器 TC測定試劑盒 (批號:141611102)，TG測定試劑盒 (批號:141711022)，LDL－C測定試劑盒(批號:142010027)。全自動生化分析儀 (深圳 邁瑞BS320)，低溫離心機 (THERMO MULTIFUGE H32)。

1.1.4 藥物 血脂康膠囊，由北京北大維信生物科技有限公司提供 (批號:20110803)。

工藝1(水提工藝):將茵黃顆粒的全部藥材進行水提，加10倍量水提取2次，每次1小時，合并藥液，濾過，濾液濃縮至1.20～1.30(60℃)的稠膏，60℃以下干燥，粉碎成細粉。

工藝2(水醇提工藝):將茵黃顆粒中部分藥材進行水提，加10倍量水提取2次，每次提取1小時，合并藥液，濾過，濾液濃縮至1.20～1.30(60℃)的稠膏，60℃以下干燥，部分藥材加10倍量80%乙醇醇提2次，每次1小時，合并藥液，濾過，濾液濃縮至1.20～1.30(60℃)的稠膏，60℃以下干燥，混合后，粉碎成細粉。

藥物配置:上述兩種工藝制備的浸膏配置成1g/4.4g(每克藥物相當4.4g原生藥)的溶液。

1.2 實驗方法

1.2.1 高脂血癥動物模型的建立 選用Wistar大鼠50只，雌雄各半，除正常對照組10只外，其余大鼠采用高脂飼料喂養6周復制高脂血癥大鼠模型。

1.2.2 動物分組及給藥方法 除正常大鼠 (給予1.0ml/100g生理鹽水)外，將40只造模大鼠隨機分為4組:模型對照組 (給予1.0ml/100g生理鹽水)、血脂康膠囊陽性對照組 (給予1.0ml/100g血脂康藥液)、芪茵顆粒水提組(2ml/100水提溶液)、芪茵顆粒水醇提組 (2ml/100g水醇提溶液)。模型動物均用高脂飼料飼養，正常對照組用基礎飼料飼養，用藥共計8周。

1.2.3 樣本取材及處理 高脂血癥大鼠模型建立前50只大鼠尾部取血測定相關血清學指標，高脂飼料常規喂養6周后尾部取血測定相關血清學指標 (確定模型是否成功);給藥8周后于末次給藥1小時后，10%水合氯醛腹腔麻醉，腹主動脈采血，于4000rpm離心15min，取上層血清，－20℃保存待測;并取肝臟組織放入中性福爾馬林溶液固定。

1.2.4 數據處理及統計檢驗 本實驗中所有計量資料均以均數±標準差 (χ±s)表示。采用PEMS3.1統計軟件進行統計分析，組間比較采用方差分析。

2 實驗結果

通過表1可以看出，模型組大鼠血脂較正常組明顯升高。各治療組組大鼠經過治療后TC、TG、HDL－C和LDL－C值及ALT與模型組比較有顯著性差異 (p＜0.05或p＜0.01);芪茵顆粒水醇提組比芪茵顆粒水提組療效好;

通過表2可以看出，模型組大鼠血脂較正常組明顯升高。各治療組組大鼠經過治療后TC、TG、HDL－C和LDL－C值及ALT與模型組比較有顯著性差異 (p＜0.05或p＜0.01);芪茵顆粒水醇提組比芪茵顆粒水提組療效好，及其作用機制可能與肝臟保護，免疫及炎性細胞因子調節，載脂蛋白表達有關，其作用機制需進一步研究。

表1 芪茵顆粒對高脂血癥大鼠各指標的影響♂ (±s)

表1 芪茵顆粒對高脂血癥大鼠各指標的影響♂ (±s)

注:正常組比較，*p＜0.05，＊＊p＜0.01;與模型組比較，#p＜0.05，##p＜0.01

模型組 6 1陽性對照組 6 芪茵顆粒水提組 6 9.26±3.93# 1.11±0.79 3.16±0.75# 7.82±3.05# 124.04±57.91##芪茵顆粒水醇組 6 4.49±1.50## 0.61±0.60 5.31±1.56 2.50±1.15## 54.14±10.66正常組對照組 6 實驗分組n##

表2 芪茵顆粒對高脂血癥大鼠各指標的影響♀ (±s)

表2 芪茵顆粒對高脂血癥大鼠各指標的影響♀ (±s)

注:正常組比較，*p＜0.05，＊＊p＜0.01;與模型組比較，#p＜0.05，##p＜0.01

.20±8.79模型組 6 12.50±2.29＊＊ 0.52±0.08 5.81±0.82＊＊ 11.76±2.63＊＊ 65.95±18.84陽性對照組 6 9.83±3.69# 0.45±0.29# 5.01±1.50# 14.00±2.87# 56.28±28.82##芪茵顆粒水提組 6 7.30±3.35# 0.46±0.16# 4.08±0.76# 5.53±3.07 44.78±19.29##芪茵顆粒水醇組 6 4.64±0.70## 0.32±0.13# 4.93±1.66# 2.74±0.82 46.07±43.10 TC TG HDL－C LDL－C ALT正常組對照組 6 1.34±0.36 0.47±0.28 2.46±0.66 0.31±0.12 41實驗分組n##

3 討論

3.1 高脂血癥模型的建立 現在常用于形成高脂血癥的動物有小鼠、大鼠、家兔、豚鼠等［4］。目前采用較多的動物模型，有高脂飼料喂養法建立的模型和腹腔注射建立的急性高脂血癥模型，前者與臨床較接近。動物多選用大鼠、家兔，其中大鼠由于造模方法簡單，成本適中，血量較小鼠多，易飼喂，食性與人相近等優點，為首選動物。高脂飼料配方大同小異，均有豬油、膽固醇、蛋黃等，其中豬油的比例較重要，脂類含量越高，模型成立所需的天數越少，配方中加用膽鹽可加強外源性膽固醇的吸收。甲狀腺抑制藥丙基硫氧嘧啶，可抑制體內膽固醇分解，使血液中的膽固醇和甘油三脂升高。綜合文獻方法，確定本次實驗高脂飼料組方。從本實驗結果可以看出:模型組 (水提組和水醇提組)與正常組比較TC，TG，LDL－C明顯升高，HDL－C明顯降低，均有非常顯著的差異 (P＜0.01)，表明本實驗所造模型成功。

3.2 對調脂療效的評價 從本實驗結果看出:雌雄組大鼠的TC、TG和LDL－C與模型組比較，均呈下降趨勢，說明芪茵顆粒提取物對高脂血癥大鼠的血脂有降低作用。而水醇提組較水提組下降趨勢明顯，可能原因為芪茵顆粒經水醇提取后，提取物中黃酮、蒽醌類極性較小的化合物含量增加，有文獻報道［5－7］黃酮類成分通過提高肝臟SOD活性，減少自由基產生，能夠降低血清和肝臟MDA含量，抑制脂質過氧化，從而防止脂質代謝紊亂，降低血脂。故在后續試驗中將選用工藝2(水醇提工藝)進行進一步研究。

本實驗對芪茵顆粒降血脂作用的研究僅僅是個開端，僅得出了其對高血脂癥大鼠有一定治療作用的結果，還需進行大量相關研究，使芪茵顆粒能夠進入臨床試驗階段，有望成為治療或預防心腦血管疾病的藥品。

［1］方圻，王鐘林.血脂異常防治建議［J］.中華心血管病雜志，1997，(3):10－13.

［2］諸駿仁.血脂異常防治研究的現狀與展望［J］.中華心血管病雜志，2002，(11):4－5.

［3］寇文镕.血脂異常的防治［J］.中華醫學信息導報，2003， (9):19－20.

［4］李儀奎.中藥藥理實驗方法學［M］.第二版.上海:上海科學技術出版社，2006:38.

［5］李楚華，李續娥，方昆陽，等.決明子蒽醌在細胞內膽固醇的合成中的作用［J］.中國組織工程研究與臨床康復，200 8，1 2(33):6593－6596.

［6］Mo ln ar P，Kawas e M，Satoh K，et al.Biological act ivi ty of carotenoids in red paprika，vnlencia orange and go lden delicious apple［J］.Phytother Res，2005，19(8):700－707.

［7］李貴海，孫敬勇，張希林，等.山楂降血脂有效成分的實驗研究［J］.中草藥，2002，33(1):51－52.