梅毒血清試驗對梅毒診斷及療效的臨床價值

熊文翠，馬雅英，劉士君

(平湖市第一人民醫院，浙江 平湖 314200)

·基礎與臨床研究·

梅毒血清試驗對梅毒診斷及療效的臨床價值

熊文翠，馬雅英，劉士君

(平湖市第一人民醫院，浙江 平湖 314200)

目的：探討3種梅毒血清學試驗對梅毒診斷及療效的臨床價值。方法對10711例血清標本用梅毒螺旋體抗體酶聯免疫吸附試驗(TP-ELISA)進行梅毒篩查，陽性標本進一步用梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)和甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)滴度檢測。結果10711例血清標本進行TP-ELISA篩查，檢出陽性441例，經TPPA法確診陽性422例，陽性符合率為95.69%。441例TP-ELISA陽性標本進行TRUST法檢出陽性240例，陽性符合率為54.42%，符合率明顯低于TP-ELISA，差異有統計學意義(χ2=402.83,P<0.05)。結論TP-ELISA法敏感性較高，操作方便，可作為梅毒的常規篩查，但存在假陽性問題，尤其以60歲以上的老年人居多。TPPA法敏感性和特異性最高，作為確診試驗，但操作繁瑣，不適合常規篩查。TRUST法敏感性和特異性均低于TP-ELISA法和TPPA法，僅可作為療效觀察和隨訪有無復發或再感染的指標。

梅毒；梅毒螺旋體抗體酶聯免疫吸附試驗；梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗；甲苯胺紅不加熱血清試驗

Abstract: [Objective] To explore the clinical value of three kinds of syphilis serology test for syphilis diagnosis and curative effect.[Method]All of 10711 clinical specimens underwent routine TP antibody screening with enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) method; positive samples were further tested by treponema pallidum particle agglutination (TPPA) and toluidine red unheated serunm test (TRUST) . [Result]10711 serum samples were screened.there were 441 positive samples tested by TP-ELISA. Among them, the number of the same result tested by TPPA was 422 and the positive coincidence rate was 95.69%. Among the 441 positive samples, 240 were positive results by TRUST, the positive coincidence rate was 54.42%. Positive rate was significantly lower than TP-ELISA. There was significant difference (χ2=402.83,P<0.05). [Conclusion]TP-ELISA shows better sensibility, easy automation, as routine screening method, but it exists false positive, especially for old people of (≥60 years old). The sensitivity and specificity of TPPA are highest, as confirmed diagnose test. However, the complicated operation TPPA is not suitable as a routine screening method. The sensitivity and specificity of TRUST are the lowest, only be as a curative effect observation and follow-up whether relapse re-infection indicators.

Keywords: syphilis ; TP-ELISA ; TPPA ; TRUST

梅毒是由蒼白螺旋體(Treponema Pallidum ,TP)引起的一種性傳播疾病，病程呈慢性病變，可以侵犯皮膚粘膜及神經、心血管、骨骼等組織器官，該病臨床表現復雜，危害大。因此，選擇敏感性、特異性均高的血清學實驗方法無論是對梅毒的診斷、治療、預防，還是對血液制品的梅毒篩查都是十分重要的。目前主要是通過檢測血清中的非特異性反應素和特異性抗體診斷梅毒。近年來我院采取TP-ELISA作為梅毒篩查試驗，陽性結果經TPPA確證，并以TRUST滴度為療效觀察，現針對這一檢測體系做一個回顧性分析。

1 資料與方法

1.1 標本來源

本院2012年1～6月住院和門診檢測梅毒抗體的患者共10711人，年齡0～90歲,中位數M=41歲。

1.2 試劑和儀器

TP-ELISA試劑和TRUST試劑由北京萬泰生物藥業股份有限公司提供，TPPA由日本富士瑞必歐株式會社生產。儀器為安圖斯Anthos2010酶標儀、新波SYM-B10全自動酶標洗板機、XK96-8型梅毒旋轉振蕩器。

1.3 方法

用TP-ELISA法對臨床標本進行篩查，大于臨界(cut-off)值為陽性，并對陽性標本進一步做TPPA確證和TRUST滴度檢測。所有試驗均按試劑說明嚴格操作。

1.4 統計學處理

采用SPSS13.0軟件對數據進行統計分析，計數資料采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2．1 3種血清血清學方法對TP抗體檢測的結果比較

采用TP-ELISA法對10711例標本進行篩查，篩查出陽性441例，陽性檢出率為4.12%。其中經TPPA確診陽性422例，陰性19例，2種試驗陽性符合率為95.69%。441例TP-ELISA陽性標本進行TRUST法檢出陽性240例，經TPPA確診240例，陽性符合率為54.42%。而201例TRUST陰性中，TPPA確診182例，陰性19例。3種方法比較結果，差異有統計學意義(χ2=402.83,P<0.05)。結果見表1。

表1 TP-ELISA、TPPA與TRUST3種方法檢測結果比較

2．2 TP-ELISA法的假陽性分析

TP-ELISA陽性的441例標本中有19例(4.3%)TPPA陰性，且以老年人居多，≥60歲的9例(47.37%)。針對這一特殊現象，本文對這19例患者進行調查，結果見表2。

表2 441例TP-ELISA法陽性標本中TPPA陰性和TPPA陽性病人基本資料比較

2．3 3種血清學方法檢測梅毒抗體的臨床意義

根據實驗室檢測結果與實際臨床分析，再結合有關文獻報道[1]，總結其臨床意義。結果見表3。

表3 3種血清學方法聯合檢測梅毒抗體的臨床意義

3 討論

TP-ELISA法是近年來隨著梅毒螺旋體基因工程研制成功而發展起來的一種血清學檢測方法，具有較高的敏感性和特異性。有文獻報道，TP-ELISA可以比TPPA更早地檢測出TP特異性抗體[2]。TP-ELISA實際操作技術簡便，試劑價格較便宜，適合血站獻血者篩查、醫院大批量標本的檢測。其主要缺點是存在假陽性率偏高的問題[3]。本文結果顯示，TP-ELISA陽性的441例患者中有19例TPPA確證陰性，且臨床上找不到梅毒感染的其他依據，假陽性率4.31%。這19例患者以老年人居多，≥60者9例(47.37%),包括11例有多年糖尿病、心腦血管疾病、高血壓等病史，4例有乙肝病毒、丙肝病毒或結核桿菌感染等傳染病史，2例輸血史。武建國[4]報道老年患者梅毒血清學試驗假陽性的原因可能是：老年患者所患的基礎疾病可能使機體釋放誘導產生抗類脂質抗體和/或抗梅毒抗體的交叉抗原；另外，TP-ELISA法因抗原可能不純，而且使用了人血清白蛋白，使假陽性抗原位點的可能性增加[5]。所以TP-ELISA陽性的患者還需進一步做TPPA，以免誤診。

TPPA是將特異性的梅毒螺旋體抗原包被在明膠顆粒上進行血清抗體檢測，不受生物素影響，有很高的敏感性和特異性，是梅毒抗體的確診方法[6]。但TPPA試劑價格昂貴，試驗時間較長，且操作繁瑣，不適合大批量標本的檢測。

TRUST采用重懸于含有特制的甲苯胺紅溶液中制成，在白色卡片上進行實驗，以檢測血清或血漿中的反應素。由于TP感染后，抗心磷脂抗體出現晚于特異性螺旋體抗體，而且梅毒晚期又可能轉陰，故TRUST法不適宜一期梅毒、三期梅毒的診斷，對潛伏期和神經梅毒也不敏感[7]。但此法操作較為簡單，其滴度變化可作為梅毒治療療效觀察的指標。TRUST試驗滴度與病程有關，當感染者接受治療后或疾病處于非活動期時，TRUST滴度下降或消失，復發或感染時又會轉陽，故其滴度變化有助于判斷梅毒復發及再感染。

這3種血清學方法聯合應用對梅毒的篩查、確診、療效觀察可謂相輔相成，其結果解釋如表3。TP-ELISA敏感性較高，對于初次檢測TP-ELISA陽性而TPPA陰性的檢測者，建議2周后隨訪復查TPPA，以排除窗口期因特異性抗體效價低而出現的TPPA假陰性。徐樹良等[8]隨訪調查26例梅毒抗體TP-ELISA陽性而TPPA陰性獻血者，發現有9例TPPA先后轉陽性。但是TP-ELISA由于存在“鉤狀效應”而造成的假陰性問題不容忽視，當TP-ELISA陰性而TPPA陽性、TRUST滴度陽性的矛盾結果時應考慮到這種情況，應將標本稀釋后復檢；或TP-ELISA初篩陰性而臨床高度懷疑為梅毒時，應建議進一步檢測TPPA。

綜上所述，3種方法在臨床上的意義不同，TP-ELISA法是梅毒篩查的理想方法，對于陽性標本應做TPPA確證，TRUST可作為療效觀察和隨訪有無復發或再感染的指標。值得重視的是沒有任何一種梅毒螺旋體血清學檢測方法其敏感性和特異性可以達到100%，為了避免生物學假陽性干擾，應結合患者的病史，臨床表現等進行綜合分析，才能作出正確的判斷。

[1]彭紅,劉熔,趙素元.梅毒血清學檢測流程的臨床流行病學評價[J]. 中國衛生檢驗雜志, 2010,20 (2):329-331.

[2]徐樹良,趙源源,王寧武,等. 26例梅毒抗體ELISA陽性TPPA陰性獻血者隨訪調查[J]. 中國輸血雜志, 2002,15(4) :265-266.

[3]季德成,李曉平,董春雷,等. ELISA法檢測老年人梅毒抗體易產生假陽性分析[J]. 放射免疫學雜志, 2005,18 (3): 239-240.

[4]武建國. 老年人抗梅毒螺旋體抗體測定的假陽性率偏高[J]. 臨床檢驗雜志, 2006, 24(4): 241-243.

[5]彭明喜. 酶聯免疫吸附試驗檢測梅毒抗體假陽性的原因分析[J]. 現代實用醫學，2006, 18 (2) :127-128.

[6]馬聰,王芳,徐武夷. 梅毒螺旋體實驗室檢測技術的研究進展[J]. 中華醫院感染學雜志, 2002, 12(12): 959.

[7]黃永梅. ELISA﹑TPPA和TRUST﹑RPR梅毒檢測方法的比較[J]. 國際醫藥衛生導報, 2006, 12(8): 88-89.

[8]徐樹良,趙源源,王寧武,等. 26例梅毒抗體ELISA陽性TPPA陰性獻血者隨訪調查[J]. 中國輸血雜志, 2002,15(4) :265-266.

Clinicalvalueofsyphilisserologytestforsyphilisdiagnosisandcurativeeffect

XIONGWencui，MAYaying,LIUShijun

(The First People′s Hospital of Pinghu , Zhejiang 314200,China)

熊文翠(1978-)，女，浙江平湖人，本科，主管技師。研究方向：免疫檢驗

R446

B

1672-0024(2013)06-0055-03