楊黃總黃酮分散片的制備及質量控制

張 怡

楊黃即瓦尼木層孔菌(Phellinus Vaninii Ljub)，又名桑黃，屬擔子菌亞門、層菌綱、非褶菌目、銹革孔菌科、木(針)層孔菌屬［1］，有“森林黃金”之美稱。楊黃具有抗腫瘤、抗炎、抗血管生成活性等多種藥理作用［2-4］，在我國傳統中藥中用于治療痢疾、盜汗、血崩等［5］。楊黃總黃酮成分是其抗氧自由基的主要活性部位［5］，目前，國內還沒有較好的楊黃總黃酮制劑上市［6］，多是將楊黃經簡單處理后作為保健品使用，未發揮其治療作用。本研究將楊黃總黃酮提取物制成分散片，可減少患者的服藥量，且由于分散片兼具口服固體制劑和口服液體制劑的優點，具有分散度高、溶出速度快、吸收快、生物利用度高等優點，對提高療效、擴大臨床應用具有重要意義。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 TDP型單沖壓片機(上海天祥健臺制藥機械有限公司)，YD-20智能片劑硬度儀(天津大學無線電廠)，UV-2401型紫外分光光儀(日本島津公司)，F7-2000脆度儀(天津大學無線電廠)，ZB-IB型智能崩解儀(天津大學精密儀器廠)。

1.2 試藥 微晶纖維素(MCC)、羥丙甲纖維素(HPMC)、立崩(超級羧甲基淀粉鈉)、交聯聚維酮(PVPP)、低取代羥丙纖維素(L-HPC)、羧甲基淀粉鈉(CMS-Na)均為安徽淮南山河藥用輔料有限公司生產;α-乳糖(一水)、淀粉、糊精、硬脂酸鎂、無水乙醇、聚維酮K17(PVP K17)均為國藥集團化學試劑有限公司產品;楊黃總黃酮提取物為本實驗室自制(AlCl3絡合法測得總黃酮含量為70.6%)，蘆丁對照品購自南京澤朗植提有限公司，含量≥98%。

2 方法與結果

2.1 分散片的制備 準確稱取30 g桑黃子實體粉末(過 60目篩)，置燒瓶中，加 70%乙醇900 mL，室溫下浸泡12 h后，超聲提取30 min，抽濾，殘渣再超聲提取1次，合并2次濾液，濃縮烘干，得到桑黃總黃酮提取物。稱取一定量桑黃總黃酮提取物，加適量填充劑，按等量遞增的方法均勻混合，加粘合劑制軟材，過16目篩濕法制粒，60℃干燥30 min，過篩整粒，外加崩解劑和適量潤滑劑(硬脂酸鎂)后壓片。控制平均片重約0.25 g，每片含總黃酮約6.5%。

2.2 處方篩選

2.2.1 填充劑的選擇 固定粘合劑、崩解劑和壓力等條件，選擇合適的填充劑，考察MCC、乳糖、淀粉和糊精作為填充劑對分散片崩解時限、崩解時限及硬度的影響，見表1。

由表1可知，MCC作為填充劑的崩解效果最好，但硬度最小;乳糖為填充劑崩解效果不如MCC，但外觀光潔完整，可壓性好，綜合考慮，選用MCC和乳糖混合作為填充劑。不同比例的MCC和乳糖作為填充劑的崩解效果見表2。

表1 填充劑的選擇

表2 填充劑比例的選擇

2.2.2 粘合劑的選擇 粘合劑用量對顆粒粘度和濕度的影響很大，從而影響顆粒的流動性和可壓性等重要的物理性質。本文考察了5%PVP K17乙醇溶液、2%HPMC溶液、50%乙醇、10%淀粉漿作為粘合劑對崩解時限的影響。結果顯示，5%PVP K17乙醇溶液作為粘合劑時，分散片的崩解時間、顆粒性質、片劑外觀、硬度較好。

2.2.3 崩解劑選擇 考察 PVPP、L-HPC、CMSNa、立崩用做外加崩解劑壓片，崩解時限見表3，考慮崩解時間、外觀以及價格因素，選擇立崩作為外加崩解劑。崩解劑用量見表4。

表3 崩解劑種類的選擇

表4 崩解劑用量的選擇

從表4可以看出，立崩用量在一定范圍內能夠使片劑迅速崩解，但用量多于5%時崩解反而變慢，可能是由于基團的引濕性，導致立崩部分水解后產生膠狀物質;也可能是立崩會在水中粘結并在藥片表面形成水化膜反而阻止了水分的滲入，延長片劑崩解的速度。

2.2.4 壓力的選擇 壓力的大小決定分散片的硬度，是決定片劑成型性的重要條件。保持處方不變，調整壓力大小，考察分散片的崩解時限。結果見表5。

表5 壓力大小的考查

結果表明，壓力對藥片的崩解和外形影響很大。從表5可以看出，壓力與崩解時間成正比。

能源互聯網統籌了智能電網、微電網、泛能網等概念，但智能電網是能源互聯網的基礎和核心，是能源轉化和配置的重要平臺。能源互聯網的架構如圖2所示。

2.3 處方優化 選擇崩解劑用量、填充劑比例和壓力為考查因素設計正交實驗(表6)，以崩解時間作為指標，篩選制備楊黃總黃酮分散片的最優處方。結果見表7。

表6 因素水平表

表7 正交試驗設計及試驗結果分析

根據正交試驗結果，各因素的影響次序為:A＞C＞B，MCC與乳糖之比影響最大。最佳處方為:A2B3C3，即 MCC∶乳糖為6∶2，立崩用量為 7%，壓力大小為3 kg。

2.4 驗證試驗 按最佳處方與工藝制備3批楊黃總黃酮分散片，考察分散片的外觀、硬度、崩解時間。結果所得片劑外觀光潔，硬度較好，崩解時間分別為18、16、16 s，表明處方合理、工藝穩定。

2.5 質量控制

2.5.1 含量測定 標準曲線:精密稱取蘆丁對照品25.0 mg，用70%乙醇溶解并定容于50 mL量瓶中，配成0.5 mg/mL的溶液。分別吸取0.0、0.8、1.6、2.4、3.2、4.0 mL 標準液于 50 mL 量瓶，加入4.0 mL AlCl3溶液，搖勻，加15 mL去離子水后用70%乙醇定容。空白輔料溶液同樣處理做空白，30℃水浴10 min，放冷20 min后，在408.20 nm處測定吸光度值。以濃度(μg/mL)為橫坐標、吸光度A為縱坐標進行線性回歸，得方程:A=0.028 C-0.001，R2=0.999 4，曲線在 1 ～40 μg/mL 范圍內線性良好。

楊黃總黃酮分散片含量測定:取楊黃總黃酮部位分散片10片，研細混勻，精密稱定細粉0.25 g(約相當于黃酮25.0 mg)于50 mL量瓶，70%乙醇超聲后定容，過濾，精密量取續濾液5.0 mL于50 mL量瓶，加70%乙醇定容，精密吸取5.0 mL與5.0 mL 1%AlCl3絡合10 min后在408.2 nm波長處測定吸光度。測得片劑總黃酮含量為6.46%，RSD為1.97%。

2.5.2 片重差異 按《中國藥典》2010年版一部附錄ⅠD規定操作，平均片重為0.248 g，重量限度為±7.5%以內，表明片重差異合格。

2.5.4 脆碎度 按《中國藥典》2010年版二部附錄ⅤE規定操作，測得失重0.62%，不超過1%，符合規定。

2.5.5 崩解時限 按《中國藥典》2010年版一部附錄ⅫA操作，測得平均崩解時限為17 s，符合規定。

3 結論與討論

3.1 試驗結果表明，主藥含量10%，填充劑為MCC與乳糖(6∶2)，粘合劑為5%PVP K17乙醇溶液，濕法制粒，外加7%立崩和適量硬脂酸鎂，壓片，壓力控制在3 kg，為制備楊黃總黃酮分散片的最佳處方工藝。

3.2 主藥含量 參照《中華本草》楊黃日服用量6～15 g，每天服用9片以內，計算得到主藥含量10%為宜。

3.3 按照等量遞增的方法使藥物和輔料能夠充分地混合均勻，提高崩解效率。

3.4 單沖壓片機壓片時，人工操作壓力、速度、次數等不同造成的各種干擾使片劑崩解時產生差異，在實際大批量生產過程中，使用的制粒壓片機實現自動化、機械化，能生產外形更加美觀，崩解更加穩定快速，質量更加符合要求的片劑。

［1］戴玉成，圖力古爾.中國東北野生食藥用真菌圖志［M］.北京:科學出版社，2007:164-166.

［2］Huang HY，Chieh SY，Tso TK，et al.Orally administered mycelial culture of Phellinus linteus exhibits antitumor effects in hepatoma cell-bearing mice［J］.J Ethnopharmacol，2011，133(2):460-466.

［3］Kim BC，Choi JW，Hong HY，et al.Heme oxygenase-1 mediates the anti-inflammatory effect of mushroom Phellinus linteus in LPS-stimulated RAW264.7 macrophages［J］.J Ethnopharmacol，2006，106(3):364-371.

［4］Lee YS，Kim YH，Shin EK，et al.Anti-angiogenic activity of methanol extract of Phellinus linteus and its fractions［J］.Journal of Ethnopharmacology，2010，131(1):56-62.

［5］Shon MY，Kim TH，Nak JS.Antioxidants and free scavenging activity of phellinus baumii(Phellinus of hymenochaetaceae)extracts［J］.Food Chemistry，2003，(82):593-597.

［6］高行恩，史經略.桑黃保健果醋的開發與研究［J］.中國調味品，2008(12):59-61，83.