結(jié)直腸癌中血管內(nèi)皮生長因子和一氧化氮表達(dá)及其臨床意義

田雅軍 王立君 趙 鵬 張 煜 范 震

1.南京軍區(qū)杭州療養(yǎng)院門診部，浙江杭州 310007；2.杭州市第一醫(yī)院，浙江杭州 310006

結(jié)直腸癌是消化系統(tǒng)的常見腫瘤，近年來發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，其發(fā)生、發(fā)展和傳播、轉(zhuǎn)移是一個(gè)多因素共同作用的復(fù)雜過程。血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）被認(rèn)為是促進(jìn)腫瘤血管生成最重要的調(diào)節(jié)因子，可誘導(dǎo)瘤內(nèi)或瘤周的淋巴管及血管生成及擴(kuò)張[1]。NO具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的作用，在腫瘤的轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)、侵襲過程中發(fā)揮重要作用。本組研究分析VEGF和NO在結(jié)直腸癌中的表達(dá)水平，并探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2010年1月～2012年1月南京軍區(qū)杭州療養(yǎng)院和杭州市第一醫(yī)院收治的55例結(jié)直腸癌患者，均經(jīng)病理檢查確診。其中，男31例，女24例；年齡33～72歲，平均（47.3±2.8）歲；直腸癌33例，結(jié)腸癌22例；TNM分期（2009年國際抗癌聯(lián)盟標(biāo)準(zhǔn)）：Ⅰ期7例，Ⅱ期11例，Ⅲ期20例，Ⅳ期17例；低、未分化腺癌20例，高、中分化腺癌35例；無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移24例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移31例；術(shù)后復(fù)發(fā)14例，未復(fù)發(fā)41例。排除標(biāo)準(zhǔn)：術(shù)前接受放療或化療治療患者。選取同期正常健康人群34例，其中，男18例，女16例；年齡31～70歲，平均（44.6±2.4）歲。 將 55 例結(jié)直腸癌患者設(shè)為觀察組，34例正常健康體檢人群設(shè)為對(duì)照組。

1.2 方法

兩組患者均晨起抽取空腹靜脈血2 mL，于4℃下以3 000 r/min離心10 min，分離出血清置于-70℃冰箱中保存待測(cè)。VEGF采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測(cè)，試劑盒購自美國RD公司。NO應(yīng)用分光光度計(jì)法檢測(cè)，試劑盒購自上海研吉生物科技有限公司。均嚴(yán)格按試劑盒規(guī)定操作，檢測(cè)VEGF、NO水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料符合正態(tài)分布以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間均數(shù)比較采用成組設(shè)計(jì)的t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組VEGF、NO水平比較

觀察組VEGF、NO水平均顯著低于對(duì)照組，兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組血管內(nèi)皮生長因子和一氧化氮水平比較（±s）

表1 兩組血管內(nèi)皮生長因子和一氧化氮水平比較（±s）

組別 例數(shù) VEGF（ng/L） NO（μmol/L）觀察組對(duì)照組55 34 t值 P值384.6±42.4 137.2±26.1 2.163＜0.05 77.9±11.7 40.5±9.3 2.085＜0.05

2.2 VEGF、NO陽性表達(dá)與腫瘤大小、部位、分期、復(fù)發(fā)比較

VEGF、NO陽性表達(dá)與腫瘤大小、部位比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。腫瘤分期、復(fù)發(fā)與VEGF、NO陽性表達(dá)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜ 0.05，P ＜ 0.01）。

表2 血管內(nèi)皮生長因子和一氧化氮陽性表達(dá)與腫瘤大小、部位、分期、復(fù)發(fā)比較[n（%）]

3 討論

結(jié)直腸癌是臨床常見的消化系統(tǒng)腫瘤，其最顯著的生物學(xué)特征是侵襲與轉(zhuǎn)移，癌癥的傳播、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)嚴(yán)重影響結(jié)直腸癌患者的生存期，術(shù)后生存率較低，嚴(yán)重威脅人類的健康。結(jié)直腸癌是一個(gè)多因素、多步驟、多途徑的復(fù)雜過程，包括細(xì)胞的增殖、凋亡的抑制、腫瘤基質(zhì)和腫瘤周圍血管的形成等多個(gè)方面，此過程又受到多種因素的調(diào)控。近年屢有報(bào)道VEGF的異常表達(dá)與結(jié)直腸癌的發(fā)病相關(guān)，但是關(guān)于NO與結(jié)直腸癌的關(guān)系相關(guān)的研究較少，本組研究分析了VEGF和NO表達(dá)與結(jié)直腸癌的關(guān)系。

VEGF特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，為內(nèi)皮細(xì)胞特異的有絲分裂源，在內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和血管構(gòu)建中起著重要的作用，是一種血管滲透劑。惡性腫瘤增殖擴(kuò)散的各個(gè)階段均有新生血管生成。VEGF阻止血管內(nèi)皮細(xì)胞管腔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)退化和細(xì)胞凋亡，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞變形、移動(dòng)、分裂和增殖，增強(qiáng)血管通透性和血管新生，形成新的腫瘤供血血管網(wǎng)，是一種明確的血管形成及血管通透性誘導(dǎo)因子，在許多新生血管形成中起關(guān)鍵作用，與腫瘤轉(zhuǎn)移及預(yù)后相關(guān)。許多體液因子及腫瘤基因都是通過調(diào)節(jié)VEGF而促進(jìn)或抑制腫瘤血管生成。VEGF在刺激血管生成的同時(shí)，還具有增加微小血管通透性、促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖遷移、促進(jìn)基質(zhì)降解等機(jī)制促進(jìn)腫瘤最終導(dǎo)致腫瘤病灶新生血管形成，病灶浸潤、增殖和轉(zhuǎn)移，與直腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系密切[2-3]，是目前發(fā)現(xiàn)的最重要的腫瘤血管生長因子。近年不僅應(yīng)用于臨床腫瘤發(fā)生、發(fā)展的檢測(cè)，同時(shí)也可作為放療效果預(yù)測(cè)指標(biāo)[4]。

NO是神經(jīng)元釋放的血管活性因子，也可由胃腸、腦、心、肝、腎等臟器的組織細(xì)胞產(chǎn)生，具有舒張血管的作用，可以松弛血管平滑肌抑制其細(xì)胞增殖，改善血管緊張度，調(diào)節(jié)血流、抑制血小板的聚集和白細(xì)胞的激活[5]，其水平可反映臟器血液循環(huán)狀態(tài)和生理功能情況。腫瘤患者本身存在缺血、缺氧、免疫力低下狀態(tài)。NO在組織中的濃度異常降低后，可介導(dǎo)活化的巨噬細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡及DNA損傷，增加血管通透性，促進(jìn)腫瘤血管形成，在機(jī)體正常組織免疫力低下、缺氧、缺血的狀態(tài)下加速腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移。結(jié)直腸癌患者血清中NO含量發(fā)生異常改變，可能與腫瘤細(xì)胞大量增殖，代償性產(chǎn)生大量代謝產(chǎn)物釋放入血有關(guān)，導(dǎo)致機(jī)體抗腫瘤能力降低，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，同時(shí)對(duì)腫瘤的侵襲、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移起到一定的作用[6]。

本組研究表明在結(jié)直腸癌中VEGF、NO均為高表達(dá)，認(rèn)為二者可以作為結(jié)腸癌檢測(cè)時(shí)的預(yù)測(cè)因子，而且VEGF、NO陽性率可以反映腫瘤分期與復(fù)發(fā)情況。本組研究表明TNM分期Ⅳ期時(shí)，VEGF、NO陽性率的表達(dá)均最低，其機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。術(shù)后復(fù)發(fā)組織中，其陽性率顯著升高，表明VEGF、NO陽性率表達(dá)有可能作為是否復(fù)發(fā)的指標(biāo)。本組沒有考察VEGF、NO兩個(gè)因子在結(jié)直腸癌表達(dá)的相關(guān)性。但臨床研究表明VEGF可通過細(xì)胞內(nèi)鈣調(diào)蛋白及磷酸肌醇途徑影響NO的形成[7]，而NO參與VEGF誘導(dǎo)的腫瘤血管形成的內(nèi)皮細(xì)胞移動(dòng)、溶解基質(zhì)和復(fù)發(fā)。因此，二者可能在結(jié)直腸癌組織中表達(dá)具有一定的相關(guān)性，尚需下一步研究與探討。

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