抗HLA-I/II抗體、抗心磷脂抗體和抗β2糖蛋白1抗體與不孕和流產的關系

王一峰 秦衛兵 楊寧 崔蓉 王小蘭 王永霞

抗HLA-I/II抗體、抗心磷脂抗體和抗β2糖蛋白1抗體與不孕和流產的關系

王一峰 秦衛兵 楊寧 崔蓉 王小蘭 王永霞

目的 探討抗HLA-I/II抗體、抗心磷脂抗體(ACA)和抗β2糖蛋白1(β2GP1)抗體與不孕和流產的關系。方法 選取2011～2012年在本院就診的不孕癥患者550例、復發性流產患者1650例和正常分娩者150例。對各組分別進行抗HLA-I/II抗體、抗心磷脂抗體和抗β2GP1抗體檢測, 并將陽性率進行比較。 結果 不孕組抗HLA-I/II陰性率、ACA和抗β2GP1陽性率分別為76.0%、19.3%和17.5%；RSA組抗HLA-I/II陰性率、ACA和抗β2GP1陽性率分別為85.0%、23.5%和22.7%；均顯著高于對照組,P＜0.05。結論 抗HLA-I/II抗體、抗心磷脂抗體和抗β2GP1抗體是引起不孕和復發性流產的重要因素。

抗HLA-I/II抗體；抗心磷脂抗體；抗β2GP1抗體；不孕癥；復發性流產

復發性流產(recurrent spontaneous abortion, RSA)是指妊娠20周前連續自然流產3次及3次以上者, 為常見的妊娠并發癥, 發生率約為1～5%。RSA的病因十分復雜, 除了胚胎染色體或流產夫婦染色體異常、解剖異常、內分泌異常、和感染等病因外, 免疫學異常逐漸被認為是導致RSA發生的主要病因［1］。根據流產的發病機制, 目前, 國際上將與免疫有關的RSA分為自身免疫型和同種免疫型兩大類。其中,自身免疫型RSA主要與抗磷脂抗體(antiphosphlipid antibody,APA)、抗β2GP1抗體陽性有關, 而URSA則與母體封閉抗體缺乏有關。不孕癥是婦科常見病之一, 原(繼)發性不孕也存在免疫學因素［2］。近年來, 抗HLA-I/II抗體、抗心磷脂抗體和抗β2GP1抗體與不孕和復發性流產之間的關系成為研究熱點。本文通550例不孕癥、1650例RSA患者和150例正常分娩者抗HLA-I/II抗體、抗心磷脂抗體和抗β2GP1抗體檢測, 探討這三種抗體與不孕、RSA的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011-01至2013-03于本院門診就診的不孕患者550例、RSA患者1650例, 病例入選標準：①不孕癥組：具有正常性生活, 不避孕, 一年以上不孕者作為不孕癥組；②RSA組：妊娠早期自然流產3次或3次以上,同時無死胎、死產及活產史, 婦檢及其他檢查均排除染色體、解剖、內分泌、感染等因素者作為RSA組。患者年齡在20～45歲, 平均為(25.6±3.6)歲, 流產時孕周6～16周, 平均孕周(8.7±2.3)周；另選擇同期正常分娩者150例作為正常對照組。兩組之間平均年齡及平均孕周無差異。抽取外周血3 ml, 離心, -20℃保存。

1.2 實驗方法 ACA和抗β2GP1試劑盒采用德國Orgentec公司的原裝試劑盒, 用ELISA 分析儀在波長450 nm處讀取吸光度值( OD), 定性檢測ACA及抗β2-GP1抗體, 陰性對照的OD值應<0.20, Correction值標于陰性對照上, Cutoff = Correction +陰性對照OD值, Index值 = 樣本OD值/ Cutoff 值, Index≥1為陽性,≤0.9為陰性。ELISA 分析儀自動使用擬合的參數曲線計算抗體的吸光度值和滴度。抗HLA-I/II抗體試劑盒采用美國ONE LAMBDA公司原裝試劑盒, 檢測方法按說明說進行。

1.3 統計學方法 應用SPSS 13.0統計軟件對實驗數據進行統計處理, 計量資料以均數±標準差( x-±s)表示, 以P＜0.05具有統計學意義。

2 結果

不孕組抗HLA-I/II陰性率、ACA和抗β2GP1陽性率分別為76.0%、19.3%和17.5%；RSA組抗HLA-I/II陰性率、ACA和抗β2GP1陽性率分別為85.0%、23.5%和22.7%；對照組抗HLA-I/II陰性率、ACA和抗β2GP1陽性率分別為20%、3.3%和2.7%；不孕組、RSA組與對照組比較, P＜0.01, 差異具有顯著統計學意義 (如表1所示)。

表1 不孕、RSA組與對照組抗HLA-I/II陰性率、ACA、抗β2GP1陽性率比較［n(%)］

3 討論

如果將妊娠這一復雜的生理過程看作是器官移植, 將帶有父系異體抗原成分的胚胎看成是母體的移植物, 那么母體與作為移植物的胚胎細胞在母胎界面上相互識別, 母體在識別胚胎抗原的同時, 產生封閉抗體。母體中的細胞毒淋巴細胞與產生的封閉抗體結合后, 細胞的毒作用被封閉, 防止對胎兒的殺傷；同時胚胎細胞上的抗原與封閉抗體相結合, 對母體的淋巴細胞與胚胎細胞之間的通路進行阻斷。目前的研究結果在孕婦首次妊娠時會出現封閉抗體,在分娩后3～6周上升, 以后將持續存在［3］。 封閉抗體在妊娠中起到對母體淋巴細胞識別父系抗原的抑制作用以及保護胎兒等作用, 是保證孕婦順利分娩的重要抗體。如果在妊娠過程中母體由于某種因素, 封閉抗體缺乏, 將會導致母體對作為移植物的胚胎排斥, 進而造成復發性流產［4］。由于封閉抗體是一組復雜的抗體組合, 現在人們還不清楚其具體組成, 人們通常將抗HLA-I/II抗體作為封閉抗體的代表。本研究中, 我們發現不孕癥和RSA兩組的抗HLA-I/II抗體陰性率顯著高于對照組, 說明封閉抗體缺乏是導致不孕和復發性流產的一個重要因素。

ACA 是一組自身免疫性抗體, 本研究主要探討ACA與不孕、RSA的相關性。正常情況下, 帶有負電荷的心磷脂(心肌、子宮居多) 位于細胞膜脂質雙層的內層, 不被免疫系統識別, 一旦暴露, 心磷脂抗原刺激機體產生一種自身免疫性抗體即ACA, 它是強烈的凝血活性物質, 可直接造成血管內皮細胞損傷。ACA 可能通過以下途徑導致流產發生[5,6]：作用于血管內皮細胞膜上的磷脂, 抑制花生四烯酸的釋放, 進一步影響前列腺素的產生；促進血管收縮以及血小板聚集；與血小板磷脂結合, 誘導血小板激活、聚集, 導致血管內血栓形成；通過干擾血栓調節素, 抑制纖溶酶原的活化。因此, ACA 能使母體血液高凝, 在胎盤微小血管處形成血栓或梗死, 引起母-胎間血液循環障礙, 胎盤與母體間的物質交換減少和屏障功能下降, 造成胎兒營養供給不足而流產和死亡。然而并非所有 RSA 者都有胎盤或絨毛血管內的血栓形成,進一步的研究發現, ACA 破壞或阻礙滋養層細胞正常功能,導致滋養層蛻膜淺植入, 因此認為胎盤形成不良可能是引起RSA的發病機制之一［7］。本研究中, 我們發現不孕癥和RSA兩組的ACA陽性率明顯高于對照組, 表明ACA是導致不孕和RSA的重要因素之一。

β2GP1(又稱載脂蛋白H)是由肝細胞合成, 是血漿中含量較豐富的一種單鏈糖蛋白。在血漿中與脂蛋白結合, 其第1、2、5功能區有大量帶正電荷的氨基酸序列, 與帶陰離子磷脂的物質結合后, β2GP1將其隱藏的抗原表位顯露, 導致了抗β2GP1抗體產生［8］。體外實驗證明, 它能抑制內源性的凝集通路及抑制血小板上的凝血酶原酶的活性。近年來研究表明, 抗β2GP1抗體與妊娠疾病有一定聯系, 是導致抗磷脂綜合征的主要抗體。抗β2GP1抗體陽性人群發生相關臨床癥狀的比率高于ACA 陽性人群, 因此, 直接測抗β2GP1抗體可能更具特異性。本研究中, 我們發現不孕癥和RSA兩組的抗β2GP1抗體陽性率明顯高于對照組, 表明抗β2GP1抗體是導致不孕和RSA的重要因素之一。ACA陽性的檢出率較抗β2GP1抗體的檢出率高, 這一方面是因為能與磷脂結合產生ACA的磷脂結合蛋白不限于β2GP1。聯合ACA和抗β2GP1抗體檢測可增加抗磷脂綜合征在不孕和RSA檢測的準確性,比單獨檢測ACA準確性提高許多, 大大減少抗磷脂綜合征的漏診率和誤診率。本研究表明抗HLA-I/II抗體、ACA和抗β2GP1抗體與不孕和RSA有直接關系, 因此, 在臨床工作中遇到不孕癥和RSA患者時有必要進行抗HLA-I/II抗體、ACA和抗β2GP1抗體檢測, 以便及時診斷并對癥治療。

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Relationship between anti-HLA-I/II antibodies, anticardiolipin antibodies, anti-β2GP1 antibodies and infertility, recurrent spontaneous abortion

WANG Yi-feng, QIN Wei-bing, YANG Ning, et al.
Family Planning Research Institute of Guangdong Province,Guangzhou 510600,China

Objective To investigate the relationship between anti-HLA-I/II antibodies, anticardiolipin antibodies, anti-β2GP1 antibodies and infertility, recurrent spontaneous abortion.Methods Selected 550 patients with infertility, 1650 patients with recurrent spontaneous abortion and 150 normal deliveries between 2011 and 2012 in our hospital in accordance with the a certain principles of income group.All patients were given anti-HLA-I/II antibodies, anticardiolipin and anti-β2GP1 antibodies detection, negative rate of anti-HLA-I/II antibodies, anticardiolipin antibody and anti-β2GP1 antibody positive rates were compared.Results Negative rate of anti-HLA-I/II antibodies in infertility and RSA group, anticardiolipin and anti-β2GP1 antibody positive rate was higher than those in control group, differences were significant, (P<0.01).Conclusion Anti-HLA-I/II antibodies, anticardiolipin antibodies, anti-β2GP1 antibodies are important factors of infertility and RSA.

Anti-HLA-I/II antibodies; Anticardiolipin antibody; Anti-β2GP1 antibodies; Infertility;Recurrent spontaneous abortion

510600 廣州, 廣東省計劃生育科學技術研究所

秦衛兵