葫蘆種子干熱處理對黃瓜綠斑駁花葉病毒及發芽率的影響

馬凱慧，王毓洪，嚴蕾艷，應泉盛，王迎兒，張華峰

（浙江寧波市農業科學研究院，315040）

黃瓜綠斑駁花葉病毒（cucumber green mottle mosaic virus，CGMMV）是煙草花葉病毒屬葫蘆科的重要病毒之一[1]，是一種典型的種傳病毒，為害十分嚴重。該病毒所有的株系都極其穩定[2]，典型的CGMMV病毒株系的致死溫度為90～100℃；體外保毒期長達119 d[3]。

應用干熱處理方法能安全有效地對葫蘆科、茄果類、十字花科等作物種子進行消毒[4]。鑒于不同作物的生物學特性有所差異，對種子進行干熱處理時，適宜的溫度和時間也不盡相同。已有研究報道，用于殺滅種子帶菌的干熱處理一般為70～75℃處理3～5 d[5]。本試驗以葫蘆種子為試驗材料，通過不同條件的干熱處理后，檢測并分析種子帶毒情況和發芽率，進而篩選出葫蘆種子干熱處理的最適條件。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試葫蘆品種為夜開花，種子采自農戶發病田內植株。

1.2 試驗設備

恒溫恒濕干熱處理器，恒溫箱。

1.3 試驗方法

試驗共設6個處理，3次重復，每次重復種子數為1000粒。處理條件：第一階段設置溫度35℃，處理24 h；第二階段設置溫度 50℃，處理24 h；第三階段設置溫度分別為65，70，72，75，80，85℃，處理72 h。最后冷卻24 h。

處理后的試驗種子保存1周，然后催芽，1周后統計發芽率。取100粒出芽種子播種，控制適宜溫濕度和光照，待葫蘆苗長出真葉后，取樣，用ELISA檢測法檢測葫蘆真葉病毒情況。

2 結果與分析

由表1可見，不同的處理條件下，葫蘆種子發芽率有差異，當干熱處理溫度為35-50-65℃、35-50-70℃和35-50-72℃時，葫蘆種子發芽率較高。之后隨著溫度的升高，葫蘆種子發芽率明顯降低，溫度越高，發芽率越低。所以，65，70，72℃都可能是較適宜的干熱處理溫度。但對于病毒本身來說，溫度越高，殺毒越有利，種子的帶毒性越小。所以，結合發芽率和殺毒條件，72℃為葫蘆種子干熱處理的最佳條件。

將在35-50-72℃條件下進行干熱處理后的種子放置一周，讓種子適當的恢復水分之后，進行催芽和播種，取葫蘆苗的真葉進行病毒檢測。

根據表2結果，葫蘆種子病毒檢測結果由干熱處理前的陽性變為干熱處理后的陰性，即處理后未檢測到病毒。這證明葫蘆真葉不帶毒，35-50-72℃條件的干熱處理對種子殺毒效果好。

3 討論與小結

對于黃瓜綠斑駁花葉病毒，干熱處理溫度越高，殺毒效果越好。有報道稱，在干熱處理過程中75℃處理72 h可以使病毒完全失活，85℃處理24 h也可以得到同樣的效果[6]。但是干熱處理的溫度條件對種子發芽率的影響較大[7]，處理溫度過高會對種子造成較嚴重的傷害，進而影響發芽率，所以試驗設置了 65，80，72，75，80，85℃ 6 個溫度條件。通過試驗可知，葫蘆種子在65℃、70℃和72℃時受干熱處理的損傷程度都較小，發芽率符合要求，即干熱處理對種子發芽率的影響較?。唤Y合干熱處理對葫蘆種子黃瓜綠斑駁花葉病毒的殺毒效果，在72℃時可以有效殺滅病毒。所以，選擇35-50-72℃作為葫蘆種子干熱處理的最適溫度條件。

表1 染病葫蘆干熱處理后的發芽率

表2 病毒檢測結果

[1]張永江.黃瓜綠斑駁花葉病毒研究進展[J].河南農業科學，2006（8）：9-12.

[2]馮蘭香，謝丙炎，楊宇紅，等.檢疫性黃瓜綠斑駁花葉病毒的檢測和防疫控制[J].中國蔬菜，2007（9）：34-38.

[3]吳鑫，丁元明，何月秋，等.檢疫有害生物——黃瓜綠斑駁花葉病毒[J].現代農業科學，2009，16（2）：87-89.

[4]宋順華，鄭曉鷹.干熱滅菌處理技術——一種防治種傳病害的有效方法[J].蔬菜，2008（10）:41.

[5]李瑞云，楊琳，常華，等.不同溫度干熱處理對幾種蔬菜種子萌發的影響[J].中國蔬菜，2011（16）：61-71.

[6]蔡明，江冬，張麗英，等.黃瓜綠斑駁花葉病毒種子處理試驗研究[J].植物檢疫，2011，25（1）：62-63.

[7]Kim S M，Nam S H,Lee J M,et al.Destruction of cucumber green mottle mosaic virus by heat treatment and rapid detection of virus inactivation by RT-PCR[J].Molecules and Cells,2003,16(2):338-342.