AHDC1基因變異及臨床病理指標對食管癌高低發區患者生存期的影響*

李洪雷，范宗民，王偉鵬，周勝理，王亞豪，黃 靜，董金成，李 貝，郭金生，張連群，王立東#

1)鄭州大學第一附屬醫院河南省食管癌重點開放實驗室；鄭州大學基礎醫學院 鄭州 450052 2)磁縣醫院胃鏡室 磁縣 056500 3)河南科技大學第一附屬醫院呼吸內科 洛陽 471003 4)淇縣衛生局 淇縣 456750 5)姚村食管癌醫院普外科 林州 456592 6)安陽腫瘤醫院胃鏡室 安陽 455000

食管癌預后極差，中晚期食管癌患者5 a生存率僅約10%[1-2]。作者所在的課題組近20 a的現場研究發現少部分患者生存期超過10 a，其中最長的達39 a。顯然，單純從臨床特征和形態學改變并不能解釋這種現象，可能存在某種分子機制影響著食管癌的預后。作者所在的課題組2009年的研究[3]結果顯示，位于AT鉤 DNA結合蛋白1(AT hook DNA binding containing 1，AHDC1)基因上的單核苷酸多態性(single nucleotide polymorphisms，SNPs)位點rs4908343變異與食管癌易感性高度相關。作者觀察了AHDC1基因變異及臨床病理因素對食管癌患者生存期的影響，以加深對食管癌預后分子機制的認識，同時為建立食管癌預后的客觀評價體系提供線索。

1 對象與方法

1.1研究對象3 478例患者主要來自河南、河北和山西三省交界的太行山食管癌高發區。患者的一般資料、治療方式和早中晚分期、腫瘤浸潤程度、淋巴結轉移及分化程度等信息全部來自河南省食管癌重點開放實驗室資料庫。3 478例中男2 111例，年齡27～85(59.0±9.0)歲，女1 367例，年齡30～99(60.0±9.2)歲。

1.2隨訪采用入戶家訪、現場問卷普查、電話隨訪調查3 478例食管癌患者的生存狀況，隨訪截止時間為2011年12月18日；隨訪內容側重于患者是否健在、死亡時間、死亡原因等；通過醫院病理查詢核實患者的臨床病理情況。成功隨訪2 416例，其中健在1 574例，死亡842例。終點事件為死亡。

1.3AHDC1基因分型患者簽訂知情同意書后，每例采集5 mL空腹外周靜脈血(EDTA抗凝)。和安徽醫科大學合作，采用Taqman基因分型技術，檢測AHDC1 基因rs4908343位點，rs4908343位點上游引物5’-AACCAGGGTCTGACTAACTCC-3’，下游引物為5’-GTTGAAGTGCCAAGAAAGGA-3’，Taqman探針1為5’-FAM-TGGGCTATGACAAAGAG MGB-3’，Taqman探針2為5’-HEX-TGGGCTATGA CAAGGAG-MGB-3’。

1.4統計學處理采用SPSS 17.0處理數據。采用χ2擬合優度檢驗判斷AHDC1基因型分布是否符合Hardy-Weinberg平衡定律，χ2檢驗分析基因型分布與淋巴結轉移、臨床分期、分化程度、浸潤程度、治療方式及高低發區的關系；采用Kaplan-Meier法繪制生存曲線并進行Log-Rank檢驗，采用Cox回歸模型對食管癌生存時間的影響因素進行多因素分析。檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1遺傳平衡吻合度檢驗2 416例經基因分型，共獲得2 285例的分型結果。AHDC1基因rs4908343位點的基因分型(AA型1 025例，AG型1 008例，GG型252例)經Hardy-Weinberg平衡檢驗，觀察值和預測值吻合好(χ2=0.031，P=0.984)。

2.2AHDC1基因型與臨床病理因素及高低發區的關系見表1。表1顯示，AHDC1基因型分布與臨床病理因素及高低發區無關。

表1 AHDC1基因型分布與各因素的關系 例(%)

*數據有刪失。

2.3食管癌患者預后的單因素分析AHDC1基因AA/AG型患者5 a生存率高于GG型患者，浸潤黏膜層患者高于浸潤肌層和漿膜層患者，無淋巴結轉移患者高于有淋巴結轉移患者，早期患者高于中、晚期患者，手術治療的患者高于非手術患者，食管癌高發區高于低發區，見表2。

2.4Cox回歸分析將單因素分析有意義的指標納入Cox回歸模型，結果顯示AHDC1基因型、臨床分期和高低發區是食管癌患者預后的影響因素，見表3。

表2 食管癌患者預后的單因素分析

表3 Cox回歸模型分析結果

3 討論

該研究發現AHDC1基因變異可能是判斷食管癌患者預后的重要分子指標，攜帶AA/AG型的食管癌患者5 a生存率高于GG型患者，同時AHDC1基因型分布與臨床病理因素及高低發區無關，提示AHDC1基因型變異與食管癌的預后有關，但又獨立于傳統的臨床病理指標，該基因可能是通過其他途徑影響食管癌的預后。AHDC1蛋白由1 603個氨基酸組成，包含2個AT鉤DNA結合結構域和1個1類PDZ結構域結合基序，含有AT鉤DNA結合結構域的蛋白可以影響染色體的結構并可調控AT富含區基因的轉錄[4-5]。AT結構是一種輔助蛋白基序，DNA損傷因素(如電離輻射、紫外線)使其磷酸化進而反饋作用于DNA，促進損傷修復[6-8]。既往研究[9]顯示，食管癌的發病及預后與基因的損傷及修復密切相關。該研究顯示攜帶AHDC1基因AA/AG型的患者預后優于GG型，可能與AHDC1對基因的損傷修復功能有關。

該研究還顯示，食管癌臨床分期等傳統病理特征是判斷患者預后的影響因素，這與以往文獻報道一致[10-12]。

最后，高發區患者比低發區患者預后好，提示外界干預和環境因素對食管癌的預后也有影響，以往研究[1]發現外界因素是通過內部遺傳因素而影響食管癌的發病。

綜上所述，食管癌預后的機制十分復雜，各獨立因素之間又相互影響。作者將在下一步的研究中深入了解AHDC1基因變異對食管癌預后的作用機制，為個體化治療提供新的線索，從而開啟食管癌治療的新途徑，延長食管癌患者的生存時間。

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