E-cadherin和CD44V6對乳癌腋窩淋巴結轉移的預測價值

孟 新，張程達，牛雅萱，劉秀瑋，王 蒙，張衛東#

1)鄭州大學公共衛生學院流行病學教研室 鄭州 450001 2)中國醫學科學院；北京協和醫學院 北京 100000 3)河南省人民醫院檢驗科 鄭州 450000

乳癌淋巴結轉移是乳癌治療中的難題，及早發現對乳癌的早日康復有深遠意義。許多研究[1-3]表明E-cadherin表達降低和CD44V6表達增強與乳癌淋巴結轉移關系密切。該研究對98例乳癌患者術后存檔組織蠟塊進行E-cadherin、CD44V6檢測，以術后病理診斷作為腋窩淋巴結轉移的金標準，評價用這兩個指標預測乳癌腋窩淋巴結轉移的價值。

1 材料與方法

1.1臨床資料收集河南省人民醫院2010年10月至2011年10月期間收治的98例患者的乳腺組織存檔蠟塊，經病理證實均為浸潤性導管癌。患者均為女性，年齡28～85歲，中位年齡49歲；有腋窩淋巴結轉移56例，無腋窩淋巴結轉移42例；臨床TNM分期Ⅰ期4例，Ⅱ期69例，Ⅲ期25例；腫瘤直徑≤2 cm 30例，2～5 cm 60例，>5 cm 6例，直接侵犯胸壁或皮膚2例。患者術前均未進行放療或者化療，均行改良根治術。

1.2乳癌組織中E-cadherin、CD44V6蛋白檢測標本經福爾馬林固定，常規石蠟包埋切片，用免疫組化SABC法檢測E-cadherin、CD44V6蛋白。鼠抗人E-cadherin單克隆抗體、鼠抗人CD44V6單克隆抗體、免疫組化試劑盒均購于上海長嘉公司。實驗步驟嚴格按照說明書進行。最后經顯色、復染、脫水、透明和封片后，光鏡下觀察。E-cadherin陽性表現為胞膜或細胞連接部位出現棕黃色顆粒，高倍鏡下共計數200個細胞，陽性細胞百分率>90%為陽性，≤90%或僅為胞質染色或無染色為陰性。CD44V6陽性表現為胞膜出現棕色顆粒，高倍鏡下計數200個細胞，陽性細胞百分率≥10%為陽性，<10%為陰性。

1.3統計學處理采用SPSS 17.0進行統計學分析。以術后病理診斷作為腋窩淋巴結轉移的金標準，分別計算E-cadherin和CD44V單獨或聯合預測的靈敏度、特異度、誤診率、漏診率，進行真實性評價；計算一致率和Kappa指數，進行可靠性評價；檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1E-cadherin和CD44V6在乳癌組織中的表達98例標本中，E-cadherin陽性61例，陰性37例。CD44V6陽性52例，陰性46例。

2.2E-cadherin和CD44V6表達對乳癌腋窩淋巴結轉移的預測結果E-cadherin、CD44V6單獨及聯合診斷結果見表1～4，預測結果見表5。

表1 E-cadherin對乳癌腋窩淋巴結轉移的診斷結果

Kappa=0.507,P=0.001。

表2 CD44V6對乳癌腋窩淋巴結轉移的診斷結果

Kappa=0.259,P=0.010。

表3 E-cadherin/CD44V6串聯診斷結果

Kappa=0.332,P<0.001。

表4 E-cadherin/CD44V6并聯診斷結果

Kappa=0.445，P<0.001。

表5 E-cadherin、CD44V6單獨及聯合預測結果

3 討論

臨床上篩查乳癌腋窩淋巴結轉移狀態的方法比較多，主要是影像學診斷，如超聲、MR以及鉬靶X線結合彩超，還有近年來發展起來的成本較高的PET-CT等分子顯像方法。如果要對腋窩淋巴結轉移進行準確評價，需要依賴腋窩清掃篩選和病理檢查結果。目前對于腋窩淋巴結清掃術仍然存在爭議，其對患者的主要創傷是上肢水腫，可引起患者不同程度的并發癥，嚴重影響患者的生活質量[4]。有些分子生物學指標與乳癌腋窩淋巴結轉移存在相關性，可以用來預測淋巴結轉移狀態，而且不會對患者產生任何影響。E-cadherin是鈣離子介導的黏附調節分子，廣泛分布于上皮組織中，細胞上E-cadherin表達水平降低或活性受到抑制會使正常細胞與細胞間的黏附減弱，影響細胞分化和黏著，腫瘤細胞間的連接也降低，腫瘤細胞易從母體脫離，從而發生轉移[5-6]。因此E-cadherin表達下降或者活性受到抑制，會增強腫瘤細胞的浸潤和轉移。CD44V6蛋白是一種跨膜性糖蛋白黏附分子，CD44V6表達水平可以用作判斷乳癌轉移傾向的臨床參考指標[7]。

該研究采用單一因素和聯合模式評價E-cadherin和CD44V6對乳癌腋窩淋巴結轉移的預測價值。在單一因素模式中，E-cadherin預測淋巴結轉移的特異度達92.86%，誤診率為7.14%，而且一致率為74.49%，說明用E-cadherin預測無淋巴結轉移的特異性很強，這對乳癌的研究有很大價值。有文獻[8]報道有70%～75%的患者實際無淋巴結轉移，但目前因缺乏無創傷診斷的檢測方法，這些患者也接受了腋窩淋巴結清掃術的過度治療，嚴重影響了患者術后的生活質量。因此對腋窩淋巴結轉移狀態進行相對準確的評價而使無淋巴結轉移的患者免于淋巴結清掃將極大改善患者的預后。E-cadherin的高特異度且簡單無創傷的特點有望用于解決這個問題。

單一模式CD44V6預測淋巴結轉移的靈敏度和特異度分別為64.29%和61.91%，其預測乳癌腋窩淋巴結轉移的特異度不及E-cadherin。Jansen等[9]認為CD44V6不能成為乳癌預后的獨立因素,尚無充足的證據可以肯定CD44 變異型與腫瘤進展密切相關。但CD44V6是黏附分子，其過度表達是乳癌浸潤轉移的一個重要因素[10]。作者又研究了E-cadherin和CD44V6聯合模式，發現串聯模式預測淋巴結轉移狀態的特異度高達95.24%，說明把E-cadherin和CD44V6結合起來預測腋窩淋巴結轉移比單以E-cadherin預測的特異度要高，可據此較為準確地判定無淋巴結轉移患者，為腋窩淋巴結清掃術的取舍和術后治療方案的選擇提供有益的參考。并聯模式預測的靈敏度(83.93%)比單一因素預測的靈敏度都要高，所以采用E-cadherin和CD44V6并聯模式進行預測可以提高乳癌腋窩淋巴結轉移的檢出率。

綜上所述，E-cadherin單一因素和E-cadherin與CD44V6的串聯模式預測乳癌腋窩淋巴結轉移的特異度高，可為腋窩淋巴結清掃術的取舍和術后治療方案的選擇提供幫助；CD44V6是否能作為獨立的觀察指標還有爭議，其特異度不如E-cadherin，但與E-cadherin并聯后檢測的靈敏度上升，能提高腋窩淋巴結轉移的檢出率。

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