彌漫性浸潤型星形細(xì)胞瘤中單絲氨酸蛋白激酶1、基質(zhì)金屬蛋白酶-14和血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)及意義

宋 軍 王穎翠 謝宗凱 (即墨市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)二科，山東 即墨 266200)

彌漫性浸潤型星形細(xì)胞瘤病變進(jìn)展中常出現(xiàn)蛋白的表達(dá)異常，對(duì)促進(jìn)病變有重要價(jià)值。單絲氨酸蛋白激酶(LIMK)1、基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-14在腫瘤中高表達(dá)參與腫瘤的進(jìn)展〔1～3〕，而血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)通過促進(jìn)腫瘤血管的新生進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的發(fā)展〔4〕。本實(shí)驗(yàn)分析彌漫性浸潤型星形細(xì)胞瘤術(shù)后組織中LIMK1、MMP-14和VEGF蛋白的表達(dá)及意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料 2009年1月至2012年12月我院確診為彌漫性浸潤型星形細(xì)胞瘤的患者95例作為觀察組，術(shù)后立即取材，并置于中性甲醛溶液中固定。切片均由病理醫(yī)師閱片，分型及分級(jí)均符合WHO中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。男50例，女45例，年齡57～79(平均67.2)歲。分級(jí):Ⅰ級(jí)22例，Ⅱ級(jí)26例，Ⅲ級(jí)28例，Ⅳ級(jí)19例。收集非腫瘤病變切除的正常的腦組織60例作為對(duì)照組，取材和固定方法同上，其中男30例，女30例，年齡56～78(平均67.9)歲。

1.2 LIMK1、MMP-14和VEGF的檢測 應(yīng)用免疫組化SP法檢測，應(yīng)用DAB染色，按試劑說明進(jìn)行操作，嚴(yán)格質(zhì)量控制。

1.3 結(jié)果評(píng)價(jià) LIMK1陽性部位為細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞膜，MMP-14和VEGF陽性部位為細(xì)胞質(zhì)。計(jì)數(shù)5個(gè)陽性細(xì)胞集中的區(qū)域，取平均值。以陽性細(xì)胞≥25%為陽性，以陽性細(xì)胞＜10%為陰性，計(jì)算陽性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、線性相關(guān)性分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組中LIMK1、MMP-14和VEGF蛋白表達(dá)的比較 觀察組中LIMK1、MMP-14和VEGF表達(dá)的陽性率明顯高于對(duì)照組(P ＜0.000 1)，見表1。

表1 兩組LIMK1、MMP-14和VEGF蛋白陽性表達(dá)的比較〔n(%)〕

2.2 觀察組中LIMK1、MMP-14和VEGF在不同臨床病理特征中的表達(dá) 觀察組中LIMK1、MMP-14和VEGF的表達(dá)與腫瘤最大直徑、分級(jí)、有無壞死及Ki67的表達(dá)密切相關(guān)(P＜0.05)，見表2。

2.3 觀察組中LIMK1、MMP-14和VEGF表達(dá)陽性率的相關(guān)性觀察組中 LIMK1和 VEGF(r=0.46，P=0.029 1)、MMP-14和VEGF(r=0.43，P=0.021 7)的表達(dá)均具有正相關(guān)性。

表2 觀察組中LIMK1、MMP-14和VEGF表達(dá)的陽性率與臨床病理特征的關(guān)系〔n(%)〕

3 討論

VEGF在腫瘤形成過程中對(duì)基質(zhì)血管的生成作用強(qiáng)，在VEGF高表達(dá)和分泌的情況下，一是通過腫瘤周圍正常的腦組織中的毛細(xì)血管出芽形成，另一種是通過平滑肌細(xì)胞/血管周細(xì)胞增生和聚集進(jìn)行血管重塑〔5〕。MMP-14是MMPs中的經(jīng)典成員，降解細(xì)胞外基質(zhì)是其主要作用，但是近年來學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)MMP-14可以有效地促進(jìn)血管生成，尤其是對(duì)VEGF介導(dǎo)的血管生成作用〔6〕。LIMK1在發(fā)揮作用時(shí)可以產(chǎn)生兩種信使RNA:一種編碼全長LIMK1蛋白、另一種因刪除61個(gè)堿基而使編碼蛋白缺乏羥基末端激酶域的蛋白，此時(shí)通過作用于C末端的激酶結(jié)構(gòu)域而負(fù)性調(diào)節(jié)激酶活性，同時(shí)介導(dǎo)蛋白質(zhì)的相互作用，參與決定細(xì)胞生長調(diào)節(jié)及細(xì)胞骨架的重組等〔7～9〕。也有學(xué)者認(rèn)為當(dāng)LIMK1活化后，抑制了纖絲狀肌動(dòng)蛋白的聚合，使肌動(dòng)蛋白的穩(wěn)定性受到了影響，此時(shí)對(duì)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、分裂均有促進(jìn)作用。賀曉燕等〔10，11〕認(rèn)為LIMK-1的高表達(dá)與腫瘤的微脈管生成相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示LIMK1、MMP-14和VEGF在腫瘤發(fā)生中發(fā)揮重要促進(jìn)作用。3種蛋白參與腫瘤的生長、增殖及浸潤。由于分級(jí)、壞死及增殖均是判斷腫瘤生物學(xué)行為、預(yù)后及病理診斷的依據(jù)，因此3種蛋白的表達(dá)不僅可以判斷腫瘤的生物學(xué)行為和預(yù)后，也可以為病理診斷提供客觀指標(biāo)。由于Ki67具有有效標(biāo)記細(xì)胞增殖的特點(diǎn)，也提示 LIMK1、MMP-14和VEGF對(duì)細(xì)胞增殖有重要促進(jìn)作用。相關(guān)性分析顯示觀察組中LIMK1和MMP-14均與VEGF有相關(guān)性，提示LIMK1和MMP-14高表達(dá)時(shí)可以促進(jìn)VEGF表達(dá)，也提示LIMK1和MMP-14對(duì)血管生成的作用是通過調(diào)節(jié)VEGF高表達(dá)實(shí)現(xiàn)的〔12，13〕。同時(shí)LIMK1和MMP-14可以促進(jìn)細(xì)胞肌動(dòng)蛋白絲聚合，使腫瘤細(xì)胞具有更強(qiáng)的周圍組織浸潤的能力。

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