人前列腺癌組織中PCA-1及Ki-67蛋白的表達*

姚 杰,劉秉乾,魏金星

鄭州大學第一附屬醫院泌尿外科 鄭州 450052

前列腺癌是歐美國家老年男性最常見的惡性腫瘤，近年來在我國此病的發病率快速上升。目前對前列腺癌的治療主要采取以根治性手術為主，輔以內分泌治療和放療的綜合治療方案，但患者的生存率未見顯著改善，尋找與前列腺癌進展相關的蛋白并進行靶向治療是目前前列腺癌研究的熱點。前列腺癌抗原-1(prostate cancer antigen-1,PCA-1)是近年來發現的前列腺癌特異基因，與前列腺癌的發生和進展密切相關[1-2]，但是作用機制尚不明確。Ki-67是一種增殖細胞相關的核抗原，其功能與有絲分裂密切相關，在細胞增殖中不可或缺。該研究采用免疫組織化學SP法檢測前列腺癌組織中PCA-1和Ki-67蛋白的表達，探討PCA-1在前列腺癌中的表達及其與腫瘤細胞增殖之間的關系。

1 對象與方法

1.1研究對象收集2011年1月至2012年5月在鄭州大學第一附屬醫院泌尿外科切除的前列腺癌組織標本153例。患者年齡55～82歲，中位年齡69歲。Gleason組織分化程度：高、中分化93例，低分化60例；TNM分期：T1、T2期63例，T3、T4期90例。患者術前均未接受化療和激素治療。收集同期住院患者的前列腺增生組織標本135例，患者年齡59～80歲，中位年齡66歲。所有組織標本均經組織病理學確診。

1.2PCA-1和Ki-67蛋白的檢測采用免疫組化SP法。PCA-1和Ki-67一抗及二抗(SP-9002通用試劑盒)和DAB顯色試劑盒均購于北京中杉金橋生物技術有限公司。標本4 μm厚切片，一抗按照1100稀釋，DAB顯色，蘇木素復染，常規脫水、透明、封片。用PBS代替一抗作陰性對照。PCA-1及Ki-67均以細胞核或細胞質呈現棕黃色顆粒或者黃色顆粒為染色陽性細胞。于陽性細胞最密集處連續觀察5個高倍鏡視野，每個視野計數100個細胞，計算陽性細胞百分比，按陽性細胞百分比評分：0為0分，～20%為1分，～50%為2分，>50%為3分。按染色強度計分：淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。以上2者的乘積>3分為陽性。

1.3統計學處理采用SPSS 17.0分析，前列腺癌和前列腺增生組織中、不同臨床病理特征患者的前列腺癌組織中2種蛋白陽性表達率的比較采用χ2檢驗，以列聯系數評估前列腺癌組織中2種蛋白表達的關系。檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 2種組織中PCA-1與Ki-67蛋白的表達見圖1、表1。

圖1 2種組織中PCA-1(1)和Ki-67(2)蛋白的表達 (SP，×400)A：前列腺增生；B：前列腺癌。

例(%)

2.2前列腺癌組織中PCA-1和Ki-67蛋白的表達和臨床病理特征的關系見表2。

表2前列腺癌組織中PCA-1
和Ki-67蛋白的表達與臨床病理特征的關系

例(%)

2.3前列腺癌組織中PCA-1與Ki-67蛋白表達的關聯性分析見表3。

表3前列腺癌組織中PCA-1與Ki-67蛋白表達的關聯性

PCA-1Ki-67陽性陰性合計陽性11028138陰性41115合計11439153

rP=0.340，P<0.001 。

3 討論

目前一致認為與前列腺癌進展相關的腫瘤標記物有PSA、P504s等，但是隨著研究的進展及臨床的驗證，這些標記物在前列腺增生及前列腺炎等良性疾病中也可以有異常表達，因此尋找一個更具有特異性的前列腺癌腫瘤標記物就顯得至關重要。PCA-1是2005年Nobom等利用熒光差異顯示分析技術克隆出的一種新的人類基因，僅在前列腺癌細胞株及組織標本中表達[1-2]。

Ki-67蛋白是反映細胞增殖活性的核標記物，與細胞有絲分裂的周期密切相關，Ki-67抗原自進入G1期開始表達，在G2期和M期的表達達到高峰，之后Ki-67抗原迅速降解，G0期不表達[3-5]。Ki-67現已成為檢測腫瘤細胞增殖動力學的關鍵指標。臨床研究[6]表明，Ki-67的表達與腫瘤的良惡性、惡性腫瘤的發展甚至于腫瘤的轉移和預后等都高度相關。

該研究結果顯示，前列腺癌組織中PCA-1蛋白的陽性表達率為90.2%，遠高于前列腺增生組織。該研究結果亦表明PCA-l表達與前列腺癌的腫瘤組織分化程度和臨床分期相關，提示PCA-1的表達與前列腺癌的發生發展密切相關，可以作為預測因子輔助判斷患者的預后。前列腺癌組織中Ki-67的表達與PCA-1的表達呈正關聯，提示PCA-1的表達與前列腺癌的細胞增殖關系密切，PCA-1可能是通過增加前列腺癌細胞增殖活性促進前列腺癌的進展。

[1] 劉秉乾，武玉東，魏金星，等.前列腺癌組織中前列腺癌抗原-1的表達及臨床意義[J].中華男科學雜志，2007,13(11)：997

[2] Konishi N,Nakamura M,Ishida E,et al.High expression of a new marker PCA-1 in human prostate carcinoma[J].Clin Cancer Res,2005,11(14):5090

[3] 樊素珍，苑中甫.宮頸癌組織中Annexin A2和Ki-67蛋白的表達[J].鄭州大學學報：醫學版，2010,45(1)：81

[4] 南燕，李紅雨，許雅娟.宮頸癌組織中TSPAN-1與Ki-67蛋白的表達[J].鄭州大學學報：醫學版，2010,45(3)：469

[5] Jin Q,Zhang W，Qiu XG，et al.Gene expression profiling reveals Ki-67 associated proliferation signature in human glioblastoma[J].Chin Med J(Engl)，2011,124(17)：2584

[6] 于勇，李道源，陸浩源，等.hK2、Ki-67在前列腺癌組織中的表達及其臨床意義[J].中國癌癥防治雜志，2012,4(2)：190