鹿角膠抗乳腺增生的作用研究

林 賀,律廣富,田文婷,盧晗瑩,林

(長春中醫(yī)藥大學(xué),吉林長春130117)

鹿角膠為鹿科動物馬鹿(Cervus elaphu sLinnaeus)或梅花鹿(Cervus nippon Temminck)已骨化的角或鋸茸后翌年春季脫落的角基,經(jīng)水煎煮、濃縮制成的固體膠。甘、咸,溫。歸腎、肝經(jīng)。溫補肝腎,益精養(yǎng)血。用于肝腎不足所致的腰膝酸冷,陽痿遺精,虛勞羸瘦,崩漏下血,便血尿血,陰疽腫痛[1]。現(xiàn)代研究[2-3]表明,鹿角膠含膠質(zhì)25%、磷酸鈣50%～60%,及少量雌酮。另含有多種氨基酸,包括色氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、精氨酸等,又含有硫酸軟骨素A、雄激素、膽堿樣物質(zhì)及多種微量元素。本實驗主要觀察鹿角膠對乳腺增生模型大鼠的治療效果。

1 實驗材料

1.1 實驗動物 Wistar大白鼠,雌性未孕,體質(zhì)量180～220 g,購自吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院動物實驗中心,動物質(zhì)量合格證編號:SCXK-(吉)2010-0005。

1.2 藥品與試劑 鹿角膠(河南老君堂制藥有限公司生產(chǎn),批號090013)。苯甲酸雌二醇注射液(天津金耀氨基酸有限公司生產(chǎn),規(guī)格:1 mL/mg,批號:0910051)。黃體酮注射液(浙江仙據(jù)制藥股份有限公司生產(chǎn),規(guī)格:10 mg×10支,批號:100917)。血清孕酮(P)、血清黃體生成激素(LH)、血清促濾泡生成激素(FSH)、血清雌二醇(E2)試劑盒,由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。

1.3 儀器 LBY-N6B全自動血液流變儀,由北京普利生儀器有限公司出品。FJ-2008P自動γ免疫計數(shù)器,由西安市二六二廠出品。

2 實驗方法

2.1 分組及給藥 雌性大鼠50只,按體質(zhì)量隨機分為5組,即空白對照組,模型對照組,鹿角膠高、中、低劑量組,見表1。于造模完成后,正常對照組和模型組大鼠予蒸餾水灌胃,其余各組按表1所示給予不同劑量的鹿角膠灌胃,每日1次,10 mL/kg,共28 d。

2.2 模型建立 正常對照組大鼠腹腔注射生理鹽水0.2 mL/只,每日1次,連續(xù) 30 d,其他各組大鼠腹腔注射苯甲酸雌二醇注射液0.5 mg/kg,每日1次,連續(xù)25 d,隨后腹腔注射黃體酮注射液4 mg/kg,每天1次,連續(xù)5 d[4-5]。

2.3 檢測指標(biāo) 于實驗開始和結(jié)束時用游標(biāo)卡尺測量第二對乳房直徑和乳頭高度。末次給藥后1 h,戊巴比妥鈉30 mg/kg麻醉,腹主動脈取血3 mL,4 000 rpm離心15 min,分離血清,用放射免疫法測定血清中孕酮(P)、黃體生成激素(LH)、促濾泡生成激素(FSH)、雌二醇(E2)含量;另取全血3 mL用肝素抗凝,進行血液流變學(xué)測定。

3 統(tǒng)計方法

統(tǒng)計學(xué)分析采用t檢驗,統(tǒng)計結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準差( x±s)表示。

4 結(jié)果

4.1 外觀肉眼觀察 造模第3周大鼠開始出現(xiàn)豎毛、皮毛欠光澤、脫毛、倦怠、反應(yīng)遲鈍、易激怒等癥狀,并且持續(xù)加重一直到實驗結(jié)束。與此同時造模大鼠乳房直徑及乳頭高度出現(xiàn)不同程度的增大。灌服鹿角膠2周后,給藥組大鼠上述癥狀明顯得到改善,鹿角膠高、中劑量組乳房直徑及乳頭高度明顯減小。提示鹿角膠能夠減輕乳腺增生大鼠外觀癥狀,見表1。

表1 鹿角膠對乳腺增生模型大鼠乳房直徑和乳頭高度的影響( x±s,n=10) mm

4.2 對血清中孕酮(P)、促濾泡生成激素(FSH)、雌二醇(E2)、黃體生成激素(LH)水平的影響 與空白對照組比較,模型對照組大鼠血清E2和LH含量增加,P和FSH含量降低。與模型對照組比較,鹿角膠能顯著降低乳腺增生大鼠血清E2和LH含量,顯著增高血清P含量,對FSH含量有增加作用。提示鹿角膠能夠顯著調(diào)節(jié)乳腺增生大鼠血清雌激素水平,見表2。

表2 鹿角膠對乳腺增生模型大鼠血清中雌激素P、FSH、E2、LH水平的影響( x±s)

4.3 對血液流變學(xué)的影響 與空白對照組比較,模型對照組大鼠全血比黏度,血漿黏度及紅細胞壓積均明顯增高。與模型對照組比較,鹿角膠能顯著降低大鼠全血比黏度、血漿比黏度及紅細胞壓積,但對血沉值無明顯影響。提示鹿角膠能夠明顯改善乳腺增生大鼠各血液流變學(xué)指標(biāo),見表3。

表3 鹿角膠對乳腺增生模型大鼠血液流變學(xué)的影響( x±s,n=10)

5 討論

乳腺增生病,屬中醫(yī)乳癖范疇[6]。其病機主要為七情過度,或悲或喜、或憂慮,致七情郁結(jié),肝失條達,肝郁氣滯,氣機運行不暢,氣血瘀滯于經(jīng)脈,乳房脈絡(luò)瘀阻而發(fā)病,不通則痛,引起乳房疼痛。或七情郁結(jié),加以年高腎虛,致脾失健運,痰濕內(nèi)生,腎氣不足,沖任脈失調(diào),氣機不利,運行氣血無力,積瘀聚于乳房、胞宮,或致乳房疼痛而結(jié)塊,或月事紊亂失調(diào)。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認為乳腺增生病的發(fā)病主要是內(nèi)分泌失調(diào)所致,即在高雌激素(E2)、低孕激素(P)狀態(tài)長期影響下,乳腺組織出現(xiàn)實質(zhì)細胞數(shù)量上的增多和形態(tài)結(jié)構(gòu)上的變異[7]。

本實驗結(jié)果表明,造模后大鼠外觀表現(xiàn)為豎毛、皮毛欠光澤、脫毛、倦怠、反應(yīng)遲鈍、易激怒以及乳房直徑增加,乳頭高度增大;動物體內(nèi)血清中雌激素水平紊亂;全血比黏度、血漿比黏度比及紅細胞壓積增高。口服給予鹿角膠治療后,可明顯對抗苯甲酸雌二醇和黃體酮引起的大鼠乳腺增生,明顯減小乳房直徑,乳頭高度;顯著降低乳腺增生大鼠血清雌二醇含量和催黃體生成素含量,升高孕酮含量和催卵細胞激素含量,調(diào)節(jié)血液中雌孕激素的相對平衡;明顯降低動物全血比黏度、血漿比黏度和紅細胞壓積,改善乳腺增生大鼠的血液流變性。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2010:302.

[2]蒙海燕.鹿茸及鹿角膠主要傳統(tǒng)功效作用機理研究[D].長春:長春中醫(yī)藥大學(xué),2008.

[3]程顯隆,李文杰,魏鋒.動物膠類藥材的鑒別方法研究進展[J].亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥,2011,7(3):167-169.

[4]陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1993:366.

[5]吳承東,楊煥杰.消癖合劑對大鼠乳腺增生的影響[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2011,17(10):223-225.

[6]王虎良.從郁論治乳腺增生癥[J].浙江中醫(yī)雜志,2012,47(8):586-588.

[7]劉聰,岳永花,郝旭亮.乳腺增生發(fā)病機制的研究進展[J].醫(yī)學(xué)綜述,2012,18(5):704-707.