艾滋病患者抗病毒督導治療療效分析*

李曉菲，余祖江，梁紅霞，何 云，江河清，闞全程

1)鄭州大學第一附屬醫(yī)院藥劑科 鄭州450052 2)鄭州大學第一附屬醫(yī)院感染科 鄭州450052 3)鄭州市第六人民醫(yī)院 鄭州400050

#通訊作者，男，1963年5月生，博士，主任藥師，研究方向:藥學及免疫學，E-mail :johnyue1970@yahoo.com

高效抗逆轉錄病毒治療(highly active antiretroviral therapy，HAART)已經(jīng)成為抗人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus，HIV)感染最有力的工具。HAART 除可以用于成人、青少年外，重要的是可以應用于兒童和孕婦，能顯著減少HIV 的母嬰傳播率，抑制病毒復制，部分恢復機體的免疫功能［1］。有效的抗病毒治療可以降低機會性感染的發(fā)生率，提高生活質量，但不規(guī)范的抗病毒治療，則可能導致耐藥毒株的發(fā)生，降低抗病毒療效，造成機會性感染發(fā)生，降低生命質量。為了探索適合我國的抗病毒治療模式和規(guī)范，作者對某一艾滋病治療示范區(qū)部分HIV 感染者進行全程督導治療，探討可能適合我國的HAART 模式，為我國艾滋病(acquired immunodeficiency syndrome，AIDS)正規(guī)治療提供理論基礎。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇2005年1月至2006年12月AIDS 治療示范區(qū)某一鄉(xiāng)村HIV 感染者377例，年齡18～65 歲男208例，女169例;均通過ELISA 檢測和HIV 免疫印跡試驗鑒定為陽性。入選標準:CD4+T 淋巴細胞1.0～3.5×105L－1，HIV-RNA ＞5×104拷貝/mL。排除標準:①血紅蛋白＜90 g/L。②WBC ＜2×109L－1。③嗜中性粒細胞數(shù)＜1×109L－1。④血小板＜7.5×1010L－1。⑤胰淀粉酶＞440 U/L。⑥血肌酐＞200 μmol/L。⑦天門冬氨酸氨其轉移酶(ALT)＞120 U/L ，丙氨酸氨基轉移酶(AST)＞120 U/L 和堿性磷酸酶(ALP)＞450 U/L;總膽紅素(TB)＞40 μmol/L。

1.2 實驗分組和治療 患者隨機分為督導治療組和未督導治療組。督導治療組134例，男79例，女55例，年齡18～64(38.4±25.6)歲;督導治療組243例，其中男129例，女114例，年齡19～65(39.1±24.6)歲。2組患者的治療均采用HAART 方案:齊多夫定(AZT，東北制藥廠)，300 mg/次，2 次/d，二去氧肌苷(DDI，東北制藥廠)，200 mg/次(若體質量小于60 kg則125 mg/次)，2 次/d，拉米夫定(3TC，葛蘭素史克公司)，300 mg/次，1 次/d，司他夫定(D4T，上海迪賽諾生物有限公司)，40 mg/次(若體質量小于60 kg 則30 mg/次)，2 次/d，奈韋拉平(NVP，上海迪賽諾生物有限公司)200 mg/次，2 次/d(14 d 導入期內200 mg/次，1 次/d)。督導治療組患者:15 d 定期隨訪，堅持發(fā)藥到手，服藥到口，建立嚴格規(guī)章制度，采用教育等方法促進患者長期、規(guī)律服藥。未督導治療組患者未采取以上督導措施。

1.3 觀測指標

1.3.1 CD4+和CD8+T 淋巴細胞計數(shù) 用EDTA K2抗凝采靜脈血2 mL，輕輕顛倒混勻，16～25℃保存，48 h 內檢測，每個樣品準備2 個試管，分別加入抗體(CD4+或CD8+單克隆抗體)和對照同型抗體，同時加入100 μL 抗凝血液樣品。混勻后放置室溫10～15 min。每管加入紅細胞裂解液500 μL，紅細胞充分裂解后加入熒光微球100 μL，加入500 μL PBS 稀釋后上機(美國Beckman 公司產(chǎn)品)分析結果。

1.3.2 WBC 計數(shù) 用EDTA K2抗凝采靜脈血2 mL，輕輕顛倒混勻，應用Beckman Coulter HMX 血細胞分析儀檢測。

1.3.3 HIV-RNA 定量檢測 按照試劑盒要求(由深圳匹基生物工程公司提供)，常規(guī)獲得患者的血漿100 μL，加200 μL RNA 提取液，混勻，常規(guī)酚:氯仿:異戊醇提取，4℃13 000 r/min 離心，14 min 后取上清，加2 倍乙醇沉淀，離心后加體積分數(shù)為75%的乙醇洗滌，沉淀烘干后加20 μL 的無RNA 酶水溶解，依次加入隨機引物行逆轉錄。按試劑盒要求進行PCR 定量擴增。反應條件為:42℃，45 min;94℃，5 min 后進入主循環(huán)92℃30 s，55℃30 s，72℃30 s ，45 個循環(huán)，定量檢測PCR 產(chǎn)物。所測外周血標本病毒檢測值取對數(shù)，檢測病毒數(shù)值為陰性者按0 計算。

外周血內CD4+、CD8+T 淋巴細胞，WBC 和HIV-RNA 定量檢測共計12 個月，其中第1 到3 個月每月檢測1 次，后每3 個月檢測1 次上述指標。

1.4 統(tǒng)計學處理 用SAS 9.1 分析數(shù)據(jù)，2組患者外周血CD4+、CD8+T 淋巴細胞、WBC 計數(shù)和HIVRNA 載量的比較采用重復測量資料的方差分析，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 2組患者外周血CD4+T 淋巴細胞計數(shù) 見表1。

表1 2組患者外周血CD4 +T 淋巴細胞計數(shù)比較×109/L

2.2 2組患者外周血CD8+T 淋巴細胞計數(shù) 見表2。

2.3 2組患者外周血WBC 計數(shù) 見表3。5 分色法檢測AIDS 人群治療前后WBC 計數(shù)，共檢測7 次(其中第1 次為治療前)。

2.4 2組患者HIV-RNA 檢測值比較 見表4。

表2 2組患者外周血CD8 T 淋巴細胞計數(shù)比較×10/L

表3 2組患者外周血WBC 計數(shù)比較×109/L

表4 2組患者HIV-RNA 檢測值比較×104 拷貝/mL

3 討論

盡管目前聯(lián)合治療還沒有達到理論水平，但聯(lián)合治療是目前艾滋病患者最主要的治療方法［2］。隨著聯(lián)合抗病毒治療的療程進行，治療過程中出現(xiàn)的耐藥問題越來越引起了人們的重視。發(fā)展中國家與部分發(fā)達國家藥物價格昂貴，另一方面藥物產(chǎn)生的副作用以及藥物之間的大量相互作用也使患者難以接受治療［3］。如果治療方案不完善或者應用不當會導致病毒出現(xiàn)抗藥性。Prosperi 等［4］研究結果顯示，曾廣泛應用抗病毒藥物治療后未堅持治療，導致了HAART 的失敗。另外研究［5-6］顯示病毒變異和耐藥株正在不斷出現(xiàn)，甚至一種耐藥可以引起藥物交叉耐藥。我國在開展HAART 治療中也發(fā)現(xiàn)不同程度的耐藥病毒株，這為防治艾滋病的傳播增加了難度［7-8］。

該研究發(fā)現(xiàn)，2組治療人群在抗病毒治療過程中，細胞免疫功能顯著提高:抗病毒治療第1 個月起，CD4+T 淋巴細胞、CD8+T 淋巴細胞或者WBC計數(shù)逐漸上升，治療3 個月后CD4+T 淋巴細胞、CD8+T 淋巴細胞和WBC 計數(shù)逐漸穩(wěn)定。但HIVRNA 定量檢測結果提示抗病毒治療后前3 次獲得相似的抗病毒治療效果，從第5 次檢測開始未督導治療組HIV-RNA 檢測值明顯高于督導治療組，隨著時間延長，2組之間HIV-RNA 檢測值的差距加大。表明隨著抗病毒治療時間的延長，未督導治療組逐漸出現(xiàn)耐藥，但免疫功能重建后的CD4+、CD8+T 淋巴細胞計數(shù)并沒有隨之下降，出現(xiàn)滯后。

一般認為，首次治療方案失敗后選擇另一種治療方案進行補救治療，療效不容樂觀，短期內獲得最大限度病毒抑制的可能性較低［9］。作者的上述結果表明在不規(guī)范的抗病毒治療過程中，耐藥出現(xiàn)時間早而且多，但CD4+、CD8+T 淋巴細胞和WBC 計數(shù)下降并未同期出現(xiàn)，給國人，尤其農(nóng)村地區(qū)以“感覺”進行抗病毒帶來困難。因此規(guī)范化的抗病毒治療或者僅根據(jù)CD4+水平進行抗病毒治療是不夠的，需要進一步研究更完善和簡單的督導治療方案。

［1］Hammer SM，Katzenstein DA，Hughed MD，et al.A trial comparing nucleoside monotherapy with combination therapy in HIV-infected adults with CD4 cell counts from 200 to 500 per cubic millimeter.AIDS Clinical Trials Group Study 175 Study Team［J］.N Engl J Med，1996，335(15):1081

［2］Perelson AS，Essunger P，Cao Y，et al.Decay characteristics of HIV-1 infection compartments during combination therapy［J］.Nature，1997，387(66I9):188

［3］曹韻貞.高效抗艾滋病毒治療的效果評論［J］.國外醫(yī)學:流行病學傳染病分冊，2000，27(1):1

［4］Prosperi MC ，Zazzi M ，Punzi G ，et al .Low rate of virological failure and maintenance of susceptibility to HIV-1 protease inhibitors with first-line lopinavir/ritonavir-based antiretroviral treatment in clinical practice［J］.J Med Virol，2010，82(12):1996

［5］Rizzardini G，Capetti A.Switch to abacavir-based triple nucleoside regimens in HIV-1 infected patients never treated with suboptimal antiretroviral therapy:a review［J］.Med Sci Monit，2006 ，12(12):RA269

［6］Metzger DS，Woody GE，O' Brien CP.Drug treatment as HIV prevention:a research update［J］.J Acquir Immune Defic Syndr，2010，55(Suppl 1):S32

［7］Zhang FJ，Maria A，Haberer J，et al.Overview of HIV drug resistance and its implications for China［J］.Chin Med J (Engl)，2006，119(23):1999

［8］Cao YZ，Lu HZ.Care of HIV-infected patients in China［J］.Cell Res，2005，15(11/12):883

［9］Sosman JM.Optimizing HIV care:policy implications［J］.Am J Manag Care，2010，16(13 Suppl):S339